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       【摘要】 
       目的研究灵芝提取物对睡眠的改善作用。方法通过直接睡眠实验、延长戊巴比妥钠睡眠时间、戊巴比妥钠阈下催眠剂量实验和缩短巴比妥钠睡眠潜伏期实验观察灵芝提取物对睡眠的作用。结果灵芝提取物在延长戊巴比妥钠睡眠时间、戊巴比妥钠阈下催眠剂量实验、缩短巴比妥钠睡眠潜伏期实验均有一定的作用。结论灵芝提取物对睡眠有一定的改善作用。
       【关键词】  灵芝提取物 生理活性 睡眠调节
       Functional Research of  Ganoderrma lucidum Extract on Sleep of Rats
       JIANG Haitao,    REN Yuanhao,YU Weiyan,ZHOU Quancheng， CUI Wei,CAI Jun,WU Jingyan
       （Department of Life Science of Nanjing Xiaozhuang University,Nanjing 211171,China;Jiangsu Wuzhong Natural Biotech Co.Ltd. Nanjing 210091,China;College of Life Science of Nanjing Normal University,Nanjing 210097,China）
       Abstract：ObjectiveTo study the effect of Ganoderrma lucidum extract on sleep.MethodsIts effect on sleep was observed through the experiments of sleep induced directly,prolonging sleeping time induced by pentobarbital sodium,affecting sleeping rate under the threshold hypnogenesis dosage of pentobarbital sodium,shortening sleep delitescence induced by tobarbital sodium.ResultsGanoderrma lucidum extract had significant effect on sleep improvement during the experiments above.ConclusionGanoderrma lucidum extract has effect on sleep of rats.
       Key words：Ganoderrma lucidum`s extraction；  Biological activity；  Sleep conditioning
       
       灵芝Ganoderma lucidum为担子菌纲灵芝属真菌，药用价值极高,具有益气安神、扶正固本之功效［1］，被视为珍贵的中药材,是中医药宝库中的珍品。现代药理学证明:灵芝含有多种生理活性物质,灵芝多糖是主要的有效成分，具有防辐射、抗肿瘤、调节血糖、降血脂、护肝等作用［2~4］。
       
       本文主要以灵芝提取物为实验材料结合相关实验方法来验证灵芝在睡眠改善中的作用，为研究灵芝的产品开发提供可靠的依据，充分发挥灵芝天然无毒以及在人类疾病治疗和身体调理中的作用。
       1  材料
       1.1  原料和试剂灵芝提取物：江苏吴中大自然生物工程有限责任公司提供 ；戊巴比妥钠（AR）：中国医药（集团）上海化学试剂公司；巴比妥钠（AR）：天津市科密欧化学试剂开发中心。
       1.2  动物雄性ICR小鼠，体重（22±4）g，江苏省药检所提供。
       
       2  方法
       2.1  直接睡眠实验选取60只小鼠，随机分成4组，分别为3个实验组和对照组。实验组给予不同剂量灵芝提取物：(低剂量150 mg/kg·bw、中剂量 450 mg/kg·bw和高剂量1 500 mg/kg·bw) ，对照组给予等量的蒸馏水。连续灌胃30 d，观察各组小鼠的睡眠发生率。睡眠以翻正反射消失为判断指标，当小鼠置于背卧位时，1 min内不能翻正，即认为翻正反射消失,进入睡眠。翻正反射恢复即为动物觉醒，翻正反射消失至恢复这段时间为动物睡眠时间。
       2.2  延长戊巴比妥钠睡眠时间分组和处理同“2.1”项。连续灌胃30 d, 最后一次给样或蒸馏水15 min后,各组小鼠腹腔注射50 mg/kg.bw戊巴比妥钠,注射量为0.2 ml/20 g,以翻正反射消失为指标,观察睡眠时间。 
       2.3  戊巴比妥钠阈下催眠剂量实验分组和处理同“2.1”项。连续灌胃30 d, 最后一次给样或蒸馏水15 min后,各组动物腹腔注射25 mg/kg·bw戊巴比妥钠最大阈下催眠剂量,观察30 min内入睡小鼠数(翻正反射消失1 min以上者)。
       2.4  缩短戊巴比妥钠睡眠潜伏期实验分组和处理同“2.1”项。连续灌胃30 d, 最后一次给样或蒸馏水10~20 min后,各组动物腹腔注射230 mg/kg·bw戊巴比妥钠,注射量为0.2 ml/20 g,以翻正反射消失为指标,观察睡眠潜伏期。 
       2.5  统计分析本实验结果采用SPSS13.0进行统计分析。
       3  结果
       3.1  直接睡眠实验结果 直接睡眠实验结果表明,样品组与对照组均无睡眠现象发生。
       3.2  延长戊巴比妥钠睡眠时间 表1可见,高、低两个剂量组与对照组相比差异显著，明显提高睡眠的时间。
       3.3  戊巴比妥钠阈下催眠剂量实验结果见表2，由表2可见低剂量组能明显提高戊巴比妥钠阈下催眠剂量诱导的小鼠睡眠发生率,与对照组相比差异显著(P<0.05)；高、中剂量组的睡眠发生率也有所提高，但无统计学差异。
       表1  灵芝提取物对戊巴比妥钠诱导睡眠时间的影响（略）
       与对照组比较，**P＜0.01；n=15
        
       表2  灵芝提取物对戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠发生率的影响（略）
       与对照组比较，*P＜0.05
       3.4  缩短戊巴比妥钠睡眠潜伏期试验由表3可知,随着剂量的增大,睡眠潜伏的时间逐渐缩短。与对照组相比，高剂量组差异显著。中剂量组的睡眠潜伏时间也有一定的缩短。
       4  讨论
          
       实验结果表明：灵芝提取物在戊巴比妥钠诱导睡眠时间的实验中，与对照组比较，高、低两个剂量组差异极显著（P＜0.01），中剂量组与对照组相比也具有差异性，但无统计学意义；在缩短戊巴比妥钠潜伏期的实验中，与对照组比，高剂量组能显著缩短小鼠的睡眠潜伏时间（P＜0.05），中剂量组虽没有差异性，但仍将睡眠潜伏时间缩短了13%。虽然低剂量组与对照组相比没有缩短小鼠的睡眠潜伏时间，但是，在灵芝提取物对戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠发生率的实验中，低剂量组却能显著提高戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠发生率（P＜0.05）。参照《保健食品功能学检验与技术评价规范》［5］，可以判定灵芝提取物对睡眠具有一定的改善作用。
       表3  灵芝提取物对睡眠潜伏时间的影响（略）
       与对照组相比，差异显著*P＜0.05；n=5
       
       灵芝具有改善睡眠的作用可能通过灵芝多糖调节神经系统［6］，近而影响松果体对褪黑素的分泌；灵芝多糖还具有显著的拟SOD活性，促进H2O2的清除，对·OH-有清除作用，可显著清除机体产生的自由基，阻止自由基对机体的损伤，减少机体的疲劳［7］，因此，抗氧化作用也有可能是灵芝改善睡眠的作用机制之一；此外，灵芝对中枢神经系统有明显的镇静作用，能使动物的自发性活动减少，肌肉轻度松弛［8］，并能增强巴比妥类药物的中枢抑制作用，但本身并无催眠或麻醉作用［9］，这也可能是灵芝能改善睡眠原因的一方面。
       
       文献报道过灵芝改善睡眠的作用，但原料来源和剂量不同，实验效果也有所不同。本实验发现改善睡眠的效果与受试物剂量没有明显的线性关系，因此，相关的方法和作用需要进一步研究。
       【参考文献】
         　　［1］ 戴则林，董昌武.灵芝多糖的生物活性研究进展［J］.安徽中医学院学报，2005,24(5)：60.
       
       ［2］ 吴京燕,程光宇,江海涛,等.灵芝多糖合剂抗辐射保健功能的研究［J］.南京师大学报(自然科学版)，2003,26(3):79.
       
       ［3］ 罗少洪,杨 红.灵芝多糖调节血糖作用的实验研究［J］.广东药学院学报,2000,16(2):119.
       
       ［4］ 江海涛,侯玉如,余多慰,等.灵芝及其复方合剂对化学性肝损伤的保护作用［J］.中药药理与临床，2005，21(6):38.
       
       ［5］ 中华人民共和国卫生部.保健食品检验与评价技术规范［S］.北京：人民卫生出版社,2003.
       
       ［6］ 周法根，徐 红，叶远玲.灵芝颗粒治疗失眠症100例临床观察［J］.中国中医药科技，2004,11(5)：309.
       
       ［7］ 陈 灵，翟晓萌，罗九甫.灵芝发酵液对小鼠红细胞SOD活性的影响［J］.上海交通大学学报,1997,31(4):90.
       
       ［8］ 邱赛红，仇 萍，黄宇明，等.灵芝的药理研究状况［J］.湖南中医药导报，1999,5(10)：19.
       
       ［9］ 何显中.灵芝临床应用及药理作用［J］.时珍国医国药,2000,11(6)：573.