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       【摘要】 
       目的对民间药用植物长蕊珍珠菜Lysimachia lobelioides Wall.的化学成分进行研究。方法应用硅胶、聚酰胺、Sephadex LH20等柱色谱技术进行分离纯化，并运用现代波谱技术（ESIMS，1HNMR，13CNMR）进行结构鉴定。结果从75%乙醇提取物中分离鉴定了13个化合物，分别鉴定为，齐墩果酸（Ⅰ）；13 ， 28epoxy3 ， 23oleananediol16one（Ⅱ）；12oleanene3，22diol（Ⅲ）；山萘酚3O芸香糖苷（Ⅳ）；kaempferol 3O(2， 6diOrhamnopyranosyl)βDglucopyranoside（Ⅴ）；4′，5，6，7四羟基黄酮（Ⅵ）；熊果酸（Ⅶ）；正三十二烷酸（Ⅷ）；β谷甾醇（Ⅸ）；胡萝卜苷（Ⅹ）；十六烷酸（Ⅺ）；蔗糖（Ⅻ）；菠菜甾醇（ⅩⅢ）。结论化合物均为首次从该植物中分离得到。
       【关键词】  长蕊珍珠菜； 化学成分； 三萜； 黄酮； 甾醇
       Studies on the Chemical Constituents of Lysimachia lobelioides Wall.
       ZHU Zhu，ZHU Qiaoling，HAO Xiaojiang，YANG Xiaosheng
       1.The Key Laboratory of Chemistry for Natural Products of Guizhou Province and Chinese Academy of Sciences， Guiyang,Guizhou 550002， China；2. School of Pharmacology ， Guiyang Medical University，Guiyany,Guizhou 550004， China
       Abstract：ObjectiveTo study the chemical constituents of Lysimachia lobelioides Wall..MethodsThe constituents of Lysimachia lobelioides Wall. were isolated and purified by repeated silica gel and Sephadex LH20 chromatography， and their structures were elucidated on the basis of spectroscopic evidence (MS，NMR). ResultsThirteen compounds were obtained and identified as oleanolic acid (Ⅰ) ，13 ， 28epoxy3 ， 23oleananediol16one (Ⅱ) ， 12oleanene3 ， 22diol (Ⅲ) ， kaempferol 3Orutinoside (Ⅳ)，kaempferol 3O(2，6diOrhamnopyranosyl)βDglucopyrano side (Ⅴ) ，4"，5，6，7tetrahydroxyflavone (Ⅵ) ，ursolic acid (Ⅶ) ， lacceroic acid (Ⅷ) ，βsitosterol (Ⅸ) ， daucosterol (Ⅹ) ，hexadecanoic acid (Ⅺ) ， sucrose (Ⅻ)，chondrillasterol (ⅩⅢ) .ConclusionAll compounds the were obtained from this plant for the first time.
       Key words：Lysimachia lobelioides；  Chemical constituents；  Triterpenoid；  Flavonoids；  Sterols
       
       长蕊珍珠菜Lysimachia lobelioides Wall.为报春花科珍珠菜属植物，别名为花白丹、刀口药，分布于云南、四川西南部、贵州和广西西部等地。全草入药，用于活血调经，利水消肿。主治乳痈肿痛、刀伤出血、跌打损伤等［1］。珍珠菜属植物的成分报道较多，化合物类型主要是皂苷类、黄酮类化合物等［2］。根据文献调研，长蕊珍珠菜的化学成分研究尚未见报道。为发掘民间常用药材的活性物质，我们对长蕊珍珠菜的化学成分进行了研究。从它的乙醇提取物中分离纯化并结构鉴定了13个化合物，均为首次从该植物中分离得到。我们对分离得到的化合物开展了抗菌和抗病毒活性初步测试，未发现有活性的化合物。
       1  仪器与试药
          
       XT4型显微熔点仪(温度计未校正，北京泰克仪器有限公司)；超导核磁共振波谱仪：INOVA400MHz（美国瓦里安公司）；质谱仪：HPMS5973(美国HP公司)；傅里叶变换红外光谱仪：Brucker Vector 22（德国Brucker公司）；Sephadex LH20为瑞典Amersham公司生产；薄层色谱硅胶GF254、柱色谱硅胶（200300目）均为中国青岛海洋化工集团公司生产。药材于200606采自贵州省兴义县，由贵阳中医学院陈德媛教授鉴定为报春花科珍珠菜属植物长蕊珍珠菜Lysimachia lobelioides Wall.。植物标本保存于贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室8号实验室。
       2 方法与结果
       2.1  提取和分离干燥长蕊珍珠菜全株4.5 kg，切碎后，经75%的乙醇回流提取3次，每次2 h，提取液合并减压浓缩至无醇味，加水稀释，分别用溶剂醋酸乙酯、正丁醇萃取，醋酸乙酯部分经硅胶柱层析，石油醚醋酸乙酯系统梯度洗脱，再通过反复的柱层析得到8个化合物。正丁醇部分用等量硅藻土拌样，分别用丙酮、甲醇回流提取各3次，2h/次，提取液减压浓缩，得到丙酮部分和甲醇部分，然后选择合适的柱色谱、系统，结合重结晶方法，得到5个化合物。
       2.2  结构鉴定
       2.2.1  化合物Ⅰ 
       白色粉末（氯仿）， mp 302～304℃，LiebermannBurchard反应阳性。EIMS m/z（%）：456（M+，1），248(100)，203（47），133（46），119（23）；1HNMR(400 MHz，CD3OD) δ：5.25(1H，brs，12H)，3.60(1H，dd，J=4.5，2.5 Hz， 3H)， 1.16(3H， s， CH3)，1.01(3H，s，CH3)，0.95(3H，s，CH3)，0.91(3H，s，CH3)，0.90(3H，s，CH3),0.842.05(24H，m)，0.81(3H，s，CH3)，0.78(3H，s，CH3)；13CNMR(100 MHz，CD3OD)δ：38.3（C1），27.5（C2），76.7（C3），38.5（C4），55.1（C5），18.0（C6），32.5（C7），38.5（C8），47.4 C9），36.6（C10）， 23.1（C11）， 122.1（C12）， 143.7（C13）， 41.0（C14）， 26.7（C15）， 22.8（C16）， 46.2（C17）， 39.3（C18）， 45.8（C19）， 30.5（C20）， 33.7（C21）， 32.4（C22）， 27.9（C23）， 16.6（C24）， 15.2（C25）， 16.8（C26）， 25.7（C27）， 180.5（28COOH）， 32.9（C29）， 23.3（C30）。以上数据与文献［3］报道的基本一致，与齐墩果酸对照品薄层层析比较，Rf值与显色情况一致，确定化合物为齐墩果酸 (oleanolic acid) 。
       2.2.2  化合物Ⅱ
       白色粉末（氯仿甲醇），EIMS m/z（%）：472（M+ ，11），341（7）， 249（12）， 235 (100) ， 217（46）， 203（64）， 121（61）， 81（77）；1HNMR (400 MHz  ， CDCl3) δ：3.65 ， 3.88 (2H ， d ， J=8.0 Hz ， 28H)， 3.46 ， 3.60 (2H ， d ， J=8.0 Hz ， 23H) ， 3.37 (1H ， d ， J=10.4 Hz ， 3H) ， 2.17， 2.69 (2H ， d ， J=16.0 Hz ， 15H) ， 1.03 (3H ， s ， CH3) ， 0.94 (3H ， s ， CH3) ， 0.93 (3H ， s ， CH3)， 0.86 (9H ， s ， CH3) ；13CNMR (100 MHz， CDCl3) δ：35.1（C1）， 29.6（C2）， 76.3（C3）， 49.6（C4）， 49.5（C5）， 18.5（C6）， 38.5（C7）， 36.7（C8）， 49.8（C9）， 41.8（C10），17.6（C11）， 31.4（C12）， 86.1（C13）， 42.5（C14）， 45.3（C15）， 213.8（C16）， 56.0（C17）， 54.4（C18），33.2（C19）， 31.6（C20），39.8（C21）， 23.5（C22）， 71.4（C23）， 16.2（C24）， 21.6（C25）， 18.4（C26）， 11.2（C27）， 75.0（C28），26.6（C29）， 24.7（C30）。以上数据与文献［4］报道的基本一致，故鉴定为13 ， 28epoxy3 ， 23oleananediol16one。
       2.2.3  化合物Ⅲ
       白色粉末（氯仿甲醇），mp 220～221℃。EIMS m/z（%）：442（M+ ，4），234(100)， 219（41）， 207（14）， 176（35）， 135（28）；1HNMR (400 MHz ，CDCl3) δ：5.25 (1H ， br s ， 12H) ， 3.45 (1H ， dd ， J=4.8 Hz ， 9.6 Hz ， 3H) ， 3.23 (1H ， dd ， J=4.4 Hz ， 10.4 Hz ， 22H) ， 1.12 (3H ， s ， CH3) ， 1.04 (3H ， s ， CH3) ， 1.00 (3H ， s ， CH3) ， 0.98 (3H ， s ， CH3) ， 0.95 (3H ， s ， CH3) ， 0.91 (3H ， s ， CH3) ， 0.88 (3H ， s ， CH3)， 0.79 (3H ， s ， CH3)；13CNMR (100 MHz ，CDCl3) δ：32.8（C1）， 25.4（C2）， 79.0（C3）， 38.7（C4）， 55.2（C5）， 16.9（C6）， 38.6（C7）， 37.4（C8）， 47.6（C9）， 36.9（C10）， 20.0（C11）， 122.4（C12）， 143.8（C13）， 39.6（C14）， 27.2（C15）， 27.2（C16）， 42.0（C17）， 44.7（C18）， 41.4（C19）， 30.5（C20）， 46.1（C21）， 76.6（C22）， 28.2（C23）， 15.6（C24）， 15.6（C25）， 18.4（C26）， 25.8（C27）， 28.1（C28）， 32.8（C29）， 23.5（C30）。以上波谱数据与文献［5］报道的基本一致，该化合物鉴定为12oleanene3，22diol。
       2.2.4  化合物Ⅳ
       黄色针晶(甲醇)，mp 191～192℃，盐酸镁粉反应阳性，Molish反映阳性。ESIMS m/z：595 ［M+H］+ ，617 ［M+Na］+；1HNMR (400 MHz，CD3OD) δ：8.02(2H，d ， J=8.8 Hz， H2"， 6")， 6.75（2H ， d ， J=8.8 Hz ， H3"， 5"）， 6.10（1H ， d ， J=2.0 Hz， H8）， 5.97(1H ， d ， J=2.0 Hz ， H6)， 4.76(1H ， d ， J=7.6 Hz ， H1")， 4.50(1H ， s ， H1)， 3.263.82(m ， 糖基氢)， 1.18(3H ， s ， 5CH3)；13CNMR (100 MHz，CD3OD)δ：159.3(C 2)，134.9(C3)，178.1(C 4)，162.1(C5)，97.6 (C6)，165.5(C7)， 97.0(C8)，158.6(C9)，107.0 (C10)，121.0 (C1")，132.3(C2")，117.6 (C 3")，159.3(C4")，117.6(C5")，132.3 (C6")，102.1(C1")，73.9(C2")，75.4(C3")，70.3(C4")，75.2(C5")，67.9(C6")，102.0(C1)，71.9(C2)，72.1(C3)，72.8(C4)，69.7(C5)，17.9(C6)。以上数据与文献［6］报道的基本一致，故鉴定该化合物为山萘酚3O芸香糖苷（kaempferol 3Orutinoside）。
       2.2.5  化合物Ⅴ
       黄色粉末（甲醇），mp 246～248℃，盐酸镁粉反应阳性，Molish反映阳性。ESIMS m/z：741 ［M+H］+，763 ［M+Na］+ ；1HNMR (400 MHz ， CD3OD) δ：8.05 (2H ， d ， J=8.8 Hz ， H2"， 6")， 6.88 (2H ， d ， J=8.8 Hz ， H3"， 5")， 6.36(1H ， d ， J=2.0 Hz ， H8)， 6.17 (1H ， d ， J=2.0 Hz ， H6)， 5.60 (1H ， d ， J=8.0 Hz ， H1")， 5.20 (1H ， s ， H1)， 4.51(1H ， s ， H1)， 3.234.09 (m ， 糖基氢) ， 1.16(3H ， d ， J=6.0 Hz ， H6)， 0.96(3H ， d ， J=6.4 Hz ， H6)；13CNMR (100 MHz ， CD3OD) δ：158.4(C2)， 134.4(C3)， 179.4(C4)， 163.1(C5)， 99.7(C6)， 165.6 (C7)， 94.6(C8)， 158.6(C9)， 105.8(C10)， 123.0(C1")， 132.2 (C2")， 116.2(C3")， 161.3(C4")， 116.2(C5")， 132.2(C6")， 102.6(C1")， 77.5(C2")， 75.2 (C3")， 72.2(C4")， 75.7(C5")， 67.0(C6")， 100.8 (C1)， 72.1(C2)， 72.3(C3)， 73.8(C4)， 69.7(C5)， 17.5(C6)， 101.8 (C1)，70.7(C2)， 72.4(C3)， 74.0(C4)， 69.8(C5)， 17.9(C6)。以上波谱数据与文献［7］报道基本一致，故鉴定该化合物为kaempferol 3O(2， 6diOrhamnopyranosyl)βDglucopyranoside。
       2.2.6  化合物Ⅵ
       黄色粉末（甲醇），mp 272～274℃，盐酸镁粉反应阳性。EIMS m/z（%）：256（M+，100），258（10）， 242（6）， 229（9），213（15），185（20），129（32），97（30），73（66），55（90）；1HNMR(400 MHz ， CD3OD)δ：8.08(2H ， d ， J=8.0 Hz ， H2 "，H 6") ， 6.90(2H ， d ， J=8.1 Hz ， H3 "，H 5") ， 6.39(1H ， s ， H8)，6.17(1H ， s ， H3)；13CNMR (100 MHz ， CD3OD)δ：165.6(C2)，99.2 (C3)，177.4(C 4)，160.6(C5)，137.1(C6)， 148.0(C7)，94.4(C8)，158.7 (C9)，104.5 (C10)，123.7(C1")，130.7(C2"，C6")，116.3(C3"，C5")， 162.5(C4")。以上数据与文献［8］报道的基本一致，确定该化合物为4"，5，6，7四羟基黄酮（4"，5，6，7tetrahydroxyflavone ）。
       2.2.7  化合物Ⅶ
       白色粉末（氯仿），mp 270～272℃，LiebermannBurchard反应阳性。EIMS m/z（%）：456（M+，1），248(100)， 203（47）， 133（46）， 119（23）， 105（18）， 69（21）；1HNMR (400 MHz ，CDCl3) δ：5.24 (1H ， br s ， 12H) ， 3.20 (1H ， m ， 3H) ， 2.88 (1H ， d ， J=11.2 Hz ， 18H) ，1.14 (3H ，s，CH3) ， 1.09 (3H ，s，CH3) ， 0.96 (3H ，s，CH3) ， 0.93 (3H ，s，CH3) ， 0.91（3H，d ，J=6.5 Hz，30CH3 ）， 0.86（3H，d ，J=6.4 Hz，29CH3 ），0.85 (3H ，s，CH3)。以上数据与文献［9］报道的数据基本一致，TLC与熊果酸标准品对照，Rf值与显色情况完全一致，故确定化合物为熊果酸 (ursolic acid)。
       2.2.8  化合物Ⅷ
       白色粉末（氯仿），mp 92～93℃。EIMS(m/z): 480［M］+， 并出现452， 438， 424， 410， 396；353， 339， 325， 311， 297， 283；111， 97， 85， 71， 57， 43， 29等递减14的碎片峰，和129， 185， 241等相差56的含有羧基的碎片峰［(CH2) COOH］+。 1HNMR(400 MHz， CDCl3)δ：2.34(2H， t， J = 6.8Hz， H2)， 1.63(2H， t， J = 6.4Hz，H3)， 0.88(3H， t， J=6.0Hz， H32)。以上数据与文献［10］报道的数据基本一致，故确定该化合物为正三十二烷酸(dotricontanoic acid)。
       2.2.9  化合物Ⅸ
       白色针状结晶(氯仿)，mp 140～142 ℃，Libermann Burchard反应阳性。EIMS m/z (%)：414 (M+，19)， 396（4）， 329（5）， 271（19）， 255（18）， 213（11）， 145（31）， 81（50）， 69（39），55(100)；1HNMR(400 MHz，CDCl3) δ：5.43(1H， br d， J=5.2Hz， 6H)， 3.86(1H， m， 3H)， 1.00(3H， s， 19CH3)， 0.91(3H， d， J=8.0Hz， 21CH3) ， 0.89(3H， d， J=8.0Hz， 29CH3)， 0.87(3H， d， J=7.6Hz， 26CH3)， 0.86(3H， d， J=7.6Hz， 27CH3)， 0.69(3H， s， 18CH3)。以上数据与文献［11］中β谷甾醇的数据对照基本一致，且与β谷甾醇对照品混合熔点不下降，薄层层析Rf值和显色情况相同，因而鉴定为β谷甾醇(βsitosterol)。
       2.2.10  化合物Ⅹ
       白色粉末(氯仿甲醇)，mp 291～292℃，LibermannBurchard反应阳性，Molish反应为阳性。EIMS m/z(%)：414 (Mglc+，14)， 396(100)， 381(20)， 303(11)， 255(20)， 213(15)， 145(28)， 81(23)， 69(24)。以上波谱数据与文献［12］基本一致，且与胡萝卜苷对照品混合熔点不下降，薄层层析Rf值和显色情况相同，故该化合物确定为胡萝卜苷(daucosterol)。
       2.2.11  化合物Ⅺ
       白色无定型粉末（氯仿），mp 75～77℃。 EIMS m/z（%）： 256(M+，4)， 241（1）， 213（3）， 185（4）， 157（4）， 129（10）， 97（11）， 73（20）， 43（7）；1HNMR(400 MHz， CDCl3)δ：2.14(2H， t， J= 7.6Hz， H2)， 1.58(2H， t， J=6.8Hz， H3)， 0.89(3H， t， J=6.4Hz， H16)。以上光谱数据确定该化合物为十六烷酸（Hexadecanoic acid）。
       2.2.12  化合物Ⅻ
       白色方晶(甲醇)，mp 162～163℃。ESIMS m/z：365［M+Na］+，  341［MH］；13 CNMR（100 MHz，D2O）δ：93.0(C1)，72.6(C2)，73.2(C3) ，68.2(C4)，70.7(C5) ，61.1(C6)， 62.5(C1")，103.4(C2")，82.1(C3")，77.1(C4")，73.8(C5 ")，62.0(C6 ")。以上波谱数据与文献［13］一致，且与标准品的薄层层析Rf值相同，故该化合物定为蔗糖(sucrose)。
       2.2.13  化合物ⅩⅢ
       白色针晶(氯仿)，mp 160～161℃。EIMS m/z(%)：412(M+，22)， 397(9)，369(9)，271（100），255（35）；1HNMR(400 MHz， CDCl3)δ：5.14(1H ， t ， J=8.0Hz ， 7H) ， 5.01， 5.16(2H ， dd ， J=15.4Hz ， 8.6Hz ， 22 ， 23H) ， 3.58(1H ， m ， 3H) ， 1.01(3H ， d ， J=6.8Hz，21Me) ， 0.84(3H ， d ， J=6.4Hz ， 27Me) ， 0.83(3H ， d ， J=6.4Hz ， 26Me) ， 0.81 (3H ， s ， 19Me)，0.54(3H ， s ， 18Me)。13CNMR(100 MHz， CDCl3)δ：37.1（C1）， 31.4（C2）， 71.1（C3）， 37.9（C4）， 40.2（C5）， 29.6（C6）， 117.4（C7）， 139.6（C8）， 49.4（C9）， 34.2（C10）， 21.5（C11）， 39.4（C12）， 43.3（C13）， 55.1（C14）， 23.0（C15）， 28.5（C16）， 55.8（C17）， 12.2（C18）， 13.0（C19）， 40.8（C20）， 21.1（C21）， 138.2（C22）， 129.4（C23）， 51.2（C24）， 31.9（C25）， 21.4（C26）， 21.4（C27）， 25.4（C28）， 12.0（C29）。根据以上数据与文献［14］对照，故鉴定为菠菜甾醇(chondrillasterol)。
       3  讨论
              
       前期的文献工作表明三萜及其皂苷类和黄酮类化合物是珍珠菜属植物的主要化学成分，我们的研究结果也表明了这一点，为长蕊珍珠菜的综合开发利用提供了一定的参考价值。
        致谢！核磁共振和质谱波谱数据由贵州省、中国科学院天然产物化学重点实验室仪器室测定。
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