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       【摘要】 
       探索新的何首乌物质基础研究方法。通过分析现行的何首乌物质基础研究方法的局限性，结合笔者近年来在中药物质基础研究和中药血清药物化学研究中的体会，提出了用血清药物化学的研究方法进行何首乌物质基础研究并在研究中引入高效液相色谱二极管陈列检测器-质谱联用（HPLC-DAD-MS）指纹图谱技术的设想。　
       【关键词】  何首乌； 血清药物化学； 高效液相色谱二极管陈列检测器-质谱联用
       何首乌为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb.的干燥块根，是著名的生熟异治的中药，有生首乌和制首乌之分。生品性平，味甘、苦，归心、肝、大肠经；制品性变温、味转甘，归肝、肾经。生首乌截疟解毒，润肠通便；制首乌功善补益精血，固肾乌须［1］。目前，对何首乌的化学成分及药效研究较多，但有关的成分研究大多只限于成分的定性、定量的分析［2］，针对药效物质基础的研究极少。而药效物质基础研究是中药现代化的核心问题［3］，只有在中药物质基础研究成果的基础上，才能有效地进行相关中药复方产品的二次开发、中药有效部位以及中药有效单体成分的三个层次的研究开发工作，提高产品的技术壁垒。药效物质基础的关键，不仅是在体外研究药物的化学成分，其根本在于要明确药物以何种形式进入体内、进入体内后如何变化，只有这样我们才能把握中药的内在实质［4］，因此采用血清药物化学的研究方法对何首乌的血中移行成分进行详细分析，阐明何首乌在体内以何种成分、何种形式发挥作用具有重要意义。
       
       血清药物化学是从含有真正有效成分的血液中分取血清进行药物学研究，由日本学者田代真一于1988年提出，中药血清药物化学是以传统药物化学方法为基础，综合应用多种现代技术，分析鉴定进入体内后血清中移行成分，研究其与药效相关性，确定中药药效物质基础的应用学科。王喜军等［5，6］应用本方法已经成功的完成了茵陈蒿汤的生物药效学研究，同时也对六味地黄丸血清药物化学进行了研究。 中药血清药物化学研究对发展中药药代动力学，建立与国际接轨的中药及复方质量标准，阐明中药及复方的配伍机制，促进新药的开发将起到关键性的作用。
       
       本课题将高效液相色谱一二极管阵列检测器-质谱联用（HPLC-DAD-MS）指纹图谱技术用于何首乌活性成分的血清药物化学研究。HPLC-DAD-MS联用技术将液相色谱高效的在线分离能力与质谱的高选择性，高灵敏度的检测能力相结合，可以同时得到化合物的保留时间、在线紫外光谱、分子量及特征结构碎片等丰富的信息，是复杂体系分离最有力的研究手段［7］。质谱检测器（MSD）在选择合适的电离方法的前提下，大多数化合物都能被电离得到检测，因而可以获得更多的化合物的结构信息，DAD检测器联用可快速鉴定提取物中的已知成分，非常适合中药复杂体系的分析，有针对性地检测中药中不同类型的化学成分［8］，国内外许多优秀的专家学者在这个研究领域作了大量的工作 ［9，10］，积累了丰富的经验，这就为中药血清药物化学的研究提供了新思路和新方法。
       
       近年来有学者致力于将HPLC-DAD-MS技术应用到中药指纹图谱的研究［11~14］。在传统的色谱指纹图谱的研究工作中，为了尽可能地阐明中药的物质基础，需要分离多个活性成分或指标成分作为标准品，工作量巨大。将HPLC-DAD-MS技术应用于中药的物质基础研究，由于前述的DAD检测器和MSD检测器的独特优势，使得中药物质基础的研究有了质的飞越，不再需要对样品进行复杂的前处理。我们采用血清药物化学的方法研究何首乌活性成分，并在研究中将HPLC-DAD-MS指纹图谱技术用于何首乌血中移行成分的研究，为何首乌的血清药物化学研究，进而为何首乌活性成分的研究，提供了新的思路。
       
       此外，我们已经进行过初步预试，所得结果表明，用HPLC-DAD-MS指纹图谱技术用于何首乌活性成分的血清药物化学研究具有可行性，由于排除了何首乌粗提物本身理化性质的干扰，避免了直接体外实验得出的错误结论，将能发现何首乌中真正的活性部位和有效成分，为进一步进行活性成分的药代动力学研究及以何首乌为原料的新药的开发打下坚实的基础。
       【参考文献】
         　　［1］ 雷载权.中药学,第1版［M］.上海:上海科学技术出版社,1995:303.
       
       ［2］ 刘振丽,宋志前.不同地区制何首中二苯乙烯苷的含量测定及稳定性考察［J］.中成药,2002,24(9):684.
       
       ［3］ 姚新生.中药知识产权保护与中药作用物质基础研究［J］.中国处方药,2004,24（3）:50.
       
       ［4］ 王喜军.中药血清药物化学的研究动态及发展趋势［J］.中国中药杂志,2006,31（10）:789.
       
       ［5］ 王喜军.茵陈蒿汤的生物药学研究［J］.中西医结合肝病杂志，1998,8(8):10.
       
       ［6］ 王喜军,张 宁.六味地黄丸的血清药物化学研究［J］.中国天然药物,2004,2(4):219.
       
       ［7］ Xiao-Hui Fan, Yi-Yu Cheng, Zheng-Liang Ye, et al., Multiple chromatographic fingerprinting and its application to the quality control of herbal medicines［J］.Analytica Chimica Acta, 2006,555(2):217.
       
       ［8］ Qingqing Wu ,Yuehua Gu, Quantification of huperzine A in Huperzia serrata by HPLC-UV and identification of the major constituents in its alkaloid extracts by HPLC-DAD-MS-MS［J］.Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis,2006,40(4):993.
       
       ［9］ A. Romani, F. Ieri, B. Turchetti, N. Mulinacci, F et al., Analysis of condensed and hydrolysable tannins from commercial plant extracts ［J］.Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, In Press, Corrected Proof, Available online 10 January 2006.
       
       ［10］ A.R. Bilia, P. Melillo de Malgalhaes, M.C. Bergonzi ,et al., Simultaneous analysis of artemisinin and flavonoids of several extracts of Artemisia annua L. obtained from a commercial sample and a selected cultivar［J］.Phytomedicine, In Press, Corrected Proof, Available online 20 February 2006.
       
       ［11］ 李松林,林 鸽,钟凯声.等.应用HPLC-DAD-MS联用技术研究中药川芎指纹图谱［J］.药学学报,2004,39(8):621.
       
       ［12］ 余 静,李 茜,沈文斌,等.刺五加HPLC／UV／MS指纹图谱研究［J］.中国药科大学学报,2003,34(2):148.
       
       ［13］ Lolita Arnoldi, Mauro Ballero, Nicola Fuzzati, et al., HPLC-DAD-MS identification of bioactive secondary metabolites from Ferula communis roots ［J］.Fitoterapia, 2004,75(3~4):342.
       
       ［14］ H. B. Xiao , M. Krucker , K. Albert, et al., Determination and identification of isoflavonoids in Radix astragali by matrix solid-phase dispersion extraction and high-performance liquid chromatography with photodiode array and mass spectrometric detection ［J］.Journal of Chromatography, 2004,1032(1~2):117.