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       【摘要】 
       目的通过测定贵州产淫羊藿药材不同种类、不同药用部位中多糖的含量，为合理开发利用贵州淫羊藿资源提供理论依据。方法采用硫酸－苯酚法，对贵州产10种淫羊藿药材不同药用部位中的多糖含量进行测定。结果10种贵州产淫羊藿药材因种类、产地、药用部位不同，其多糖含量存在差异，根和叶中多糖含量差异较小，根和叶中的多糖含量均大于叶柄和茎的。结论为保证贵州淫羊藿资源的可持续利用，淫羊藿药材入药以地上部分（去粗梗）更为合理。
       【关键词】  贵州产； 淫羊藿； 药用部位； 多糖； 苯酚硫酸法
       Quantitative Analysis of Polysaccharide in Different Medicinal Parts of Epimedium Herbs in Guizhou
       WGNG Yueyun ，XU Wenfen*，HE Shunzhi
        
       (Department of Pharmacology，Guiyang College of Traditional Chinese Medicine，Guiyang 550002，China)
       Abstract：ObjectiveTo provide a basis for development of Epimedium herbs resources in Guizhou,the contents of polysaccharide of Epimedium herb samples of different species,different medicinal parts were determined. MethodsDifferent medicinal parts of 10 species in Guizhou were determined by phenol-sulfuric acid method. ResultsThe content of polysaccharide was influenced by different species, different origins and different medicinal parts,and the polysaccharide content of leaf was higher than that of stem and petiole was similar to the content of root. ConclusionIt is right to collect the leaf and stem parts of the herbs which provide a reliable basis for conservation and reasonable development of Epimedium herbs resources in Guizhou.
       Key words：Guizhou；  Epimedium herbs；  Different medicinal parts；  Polysaccharide；  Phenol-sulfuric acid method
       
       淫羊藿来源于小檗科淫羊藿属Epimedium L.植物，是使用悠久的传统中药之一，也是贵州重要的道地药材，具有补肾阳、强筋骨、助阳益精等功效，主治阳痿遗精、筋骨痿软、风湿痹痛、麻木拘挛等症。据文献报道，淫羊藿多糖具有明显的免疫活性，是一种很有发展前途的生物调节剂［1］。现代临床上常用于治疗骨质疏松、更年期综合征、乳房肿块、高血压病、冠心病，具抗肿瘤、抗衰老等功效，受到国内外广泛关注。目前贵州产淫羊藿多达15种以上［2，3］，其中，巫山淫羊藿E. wushanense，为《中国药典》收载品种；粗毛淫羊藿E. acuminatum，天平山淫羊藿E. myrianthum，黔岭淫羊藿E.leptorrhizum，毡毛淫羊藿E.coactum为《贵州省中药材、民族药材质量标准》收载品种［4，5］。淫羊藿药材是相关医药工业生产重要的原料药材，本实验采用苯酚－硫酸法对贵州产不同种类淫羊藿药材不同药用部位中多糖的含量进行测定［6，7］，旨在为合理开发利用贵州淫羊藿资源，中药材淫羊藿GAP基地建设及其相关医药工业生产提供理论依据。
       1  仪器与材料
       1.1  仪器  上海第三分析仪器厂723型分光光度计；瑞士Mettler-Toledo AG135型电子天平。
       1.2  药材  10种淫羊藿药材实验样品采自贵州省余庆、贵阳乌当、龙里、雷山、剑河、江口、万山、务川等地（花期至果期采集，阴干或晒干），经何顺志研究员鉴定为：黔岭淫羊藿E.leptorrhizum，粗毛淫羊藿E. acuminatum，天平山淫羊藿E. myrianthum，巫山淫羊藿E.wushanense，剑河淫羊藿E.jianheense（暂定），万山淫羊藿E.wanshanense（暂定），时珍淫羊藿E.lishihchenii，四川淫羊藿E. sutchuenense. 长蕊淫羊藿E.dolichostemon，毡毛淫羊藿E.coactum，凭证标本存于贵州中药研究所标本室（HGCM）。
       1.3  对照品及试剂  无水葡萄糖、浓硫酸、苯酚均为分析纯。
       2  方法与结果
       2.1  对照品溶液的制备  精密称取经105℃干燥至恒重的无水葡萄糖60.0 mg，置于100 ml量瓶中，加水溶解至刻度，摇匀，即得。
       2.2  标准曲线的制备 精密量取对照品溶液（0.606 mg·ml-1）0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0，4.0 ml，分别置50 ml量瓶中，各加水至刻度，摇匀。分别精密量取上述溶液2 ml，置具塞试管中，各加4%苯酚溶液1 ml，混匀，迅速加入硫酸7.0 ml，摇匀，置40℃水浴中保温30 min，取出后置冰水浴中放置5 min，取出，以相应试剂为空白。以紫外-可见分光光度法于490 nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，进行回归计算，得到淫羊藿多糖的回归方程和相关系数为：Y=0.050 9X - 0.022，r=0.999 5，结果表明淫羊藿多糖在1.212～9.696 μg·ml-1范围内与吸光度的线性关系良好。
       2.3  供试品溶液的制备  取样品粉末约0.5 g（药材阴干或晒干后，粉碎过40目筛），精密称定，置锥形瓶中，精密加水50 ml，称定重量，静置1 h，加热回流1 h，放冷，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2 ml，置100 ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取2 ml，置具塞试管中，以“2.2”项下自“各加4%苯酚溶液1 ml”起，依法制备测定(同时采用烘干法测定药材水分)。  
       2.4  精密度实验  精密吸取对照品溶液2 ml，按标准曲线制备方法制备标准品供试品和空白对照液，在490 nm的波长处测定吸光度，重复测定5次，得RSD为0.21%，表明精密度良好。
       2.5  重复性实验  精密称取同一样品6份，按供试品溶液的制备方法制备，分别测定其吸光度,结果多糖含量RSD为0.23%，表明本法重复性良好。
       2.6  稳定性实验  精密称取同一样品，按供试品溶液的制备方法制备，分别于0，10，20，30，40，50，60 min测定其吸光度，测得多糖含量RSD为2.01%，表明供试品显色在1 h内基本稳定。
       2.7  回收率实验  精密称取已知多糖含量的样品6份，每份约0.2 g，分别精密加入葡萄糖对照品溶液（4.02 mg·ml-1）各5 ml，按供试品溶液的制备方法制备，分别测定其吸光度，6次平均回收率为97.64%，RSD为1.46%。结果见表1。
       表1  样品中淫羊藿多糖回收率实验结果 （略）
       2.8  样品含量测定  将采集的10种淫羊藿药材样品按不同药用部位分别制备供试品溶液，依法进行测定。结果见表2。
       表2  10种贵州产淫羊藿药材不同药用部位中多糖的含量（略）
       3  讨论
       
       由表2可知，贵州产的10种淫羊藿药材因种类、产地及药用部位的不同，其淫羊藿多糖的含量存在差异，根和叶中多糖含量差异较小，根和叶中的多糖含量均大于叶柄和茎的，其中贵州龙里和万山产的粗毛淫羊藿和万山淫羊藿叶中多糖含量较高。
       
       本实验参照文献［4］进行了加热回流提取和超声提取对比，结果为前者提取淫羊藿中多糖含量较高，故仍然选用文献的加热回流提取方法。
       
       通过对贵州产10种淫羊藿药材质量进行研究，为贵州淫羊藿资源的可持续发展、淫羊藿GAP基地建设及其相关医药工业生产提供了理论依据。
       【参考文献】
         　　［1］ 郭宝林，罗崇念，肖培根.淫羊藿多糖研究进展［J］.中国中药杂志，1998, 23( 7):436.
       
       ［2］ 徐文芬，何顺志. 中国淫羊藿大花类群的种类与地理分布［J］.中药材,2005,2（4）:267.
       
       ［3］ 何顺志，徐文芬，郭宝林. 中国淫羊藿小花类群的种类与地理分布［J］.中国药学杂志,2005,16：1217.
       
       ［4］ 国家药典委员会. 中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2005:153.
       
       ［5］ 贵州省药品监督管理局.贵州省中药材、民族药材质量标准［S］.贵州：贵州科技出版社，2003：350.
       
       ［6］ 朱永智，陈 旭.不同品种、产地的淫羊藿多糖的含量测定［J］.天津中医药,2004,21(1):68.
       
       ［7］ 杨武德.粗毛淫羊藿及其不同炮制品中多糖的测定［J］.中草药,2005,36(4)：543.