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蓝草空气消毒乳剂的研制及其抗菌抗病毒实验
作者:高莉莉 王和平 王亚贤 凌庆枝    
作者单位:浙江医药高等专科学校,浙江 宁波 315100; 黑龙江中医药大学,黑龙江 哈尔滨 150040

《时珍国医国药》 2009年 第3期

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       【摘要】 
       目的研制一种中药空气消毒剂——蓝草消毒乳,并观察其抗菌、抗病毒作用。方法以板蓝根、连翘、金银花等中药提取物与熏衣草精油配制成中药空气消毒乳剂,并以1∶1水溶液作为样品源液进行抗菌、抗病毒实验。结果自行研制的蓝草消毒乳剂外观浅棕色,均匀细腻,易流动,香气怡人,室温自然贮藏3个月,质量稳定。蓝草消毒乳剂对流感病毒FM1有抑制作用;对条件致病菌群及致病菌均有抑菌作用。结论自行研制的蓝草消毒乳剂有抑菌、抑病毒作用,对环境中(空气)微生物抑制作用明显。
       【关键词】  蓝草空气消毒乳 自行研制 条件致病菌群 致病菌 流感病毒亚甲型鼠肺适应株
       随着社会进步和大众生活水平的提高,人们对周围环境空气质量的要求越来越高,既需要健康卫生,又要求空气清新,因此,保持工作和生活的环境空气清洁、无污染,对提高人们生活质量有重要意义,是人们共同的愿望和追求。空气清新消毒对净化空气、消除环境异味等有重要作用。中药消毒是近年来兴起的一项消毒技术,具有价格低廉、无毒副作用、气味芳香、不伤害眼睛、不刺激皮肤及呼吸道黏膜等优点[1],相关产品的研发不仅有重要的社会意义,而且有广阔的市场前景,为此,近年来我们开展了中药空气清新消毒剂的研究,自行研制了一种中药制剂——蓝草空气消毒乳剂,并对其抗菌、抗病毒作用进行了实验。现报道如下。
       1  材料
       
   
       筛选出适合空气消毒的中药材:板蓝根(Radix Isatidis)为十字花科植物松蓝Isatis indigotica Fort的干燥根;金银花为忍冬科植物忍冬Lonicare japonica Thunb.的干燥花蕾或带初开的花;连翘为木犀科植物连翘Forsythia Suspensa (Thunb.)Vahl的干燥果实;百部为百部科植物直立百部Stemona sessilifolia(Miq.)Miq.,蔓生百部S.jaqonica(Bl.)Miq或对叶百部S.tuberosa Lour.的干燥块根;广藿香Pogostemon cablin(Blanco)Benth为唇形科植物广藿香的干燥地上部分;薄荷(Herba Menthae)系唇形科植物薄荷的干燥地上部分;桂枝为樟科樟属植物肉桂Cinnanum cassia Presl的干燥嫩茎;天然香料熏衣草精油(Lavandin)。以上中药均购自宁波市药材公司,经鉴定符合用药要求。
       2  方法
       2.1  制剂的制备
       2.1.1   药液提取及精制  将薄荷、广藿香、桂枝3味药采用蒸馏法,提取挥发油;将金银花、连翘、板蓝根、百部与上述药渣混合加8倍量水,煎煮,1 h/次,提取3次,合并提取液,浓缩至1g/ml,加入95%乙醇,便加边搅拌使含醇量为70%;减压浓缩,调pH至7.0,得浓缩液,备用。
       2.1.2  乳剂的制备 
       
       处方:①油相:硬脂酸5.0g,色拉油5.0 ml,挥发油0.5 ml(桂枝油0.075 ml,薄荷油、藿香油各0.06 ml,熏衣草油0.305 ml);②水相:三乙醇胺2.0 ml,1∶1精制药液(pH 7.0)87.5 ml,蒸馏水适量,溶解后定容至200 ml。
       
       乳剂的制备:精密称取硬脂酸5.0 g,量取色拉油5.0 ml,置于同一烧杯中,水浴加热至70℃,使之熔融;另量取蒸馏水100 ml,置于另一烧杯中,并向其中加入2.0 ml三乙醇胺,搅拌使其溶解,水浴加热至70℃。将油相以细流状缓慢倒入水相中,400r/ min搅拌10 min,取出。待降温至40℃时,向其中加入挥发油,300 r/min搅拌至室温即成初乳。然后向其中缓慢加入药液87.5 ml,边加边搅(400 r/min),待药液与初乳完全混合均匀后,停止搅拌,加蒸馏水定容至200 ml,即得成品乳剂(含量为0.44 g/ml)。该制剂为浅棕褐色易流动、细腻均匀、有熏衣草香气的液体。室温自然贮藏3个月,质量稳定。
       2.2  实验室抗菌效果检测将大肠杆菌E.coli,链球菌Streptococcurs,金黄色葡萄球菌Staphyloccous aureus Rosenbach,柠檬色葡萄球菌Staphyloccous citreus,表皮葡萄球菌Staphyloccous epidermidis标准菌株分别用肉汤稀释,制成菌液。
       2.2.1  试管法  取消毒乳液一定量,加入1%氯化钠,再加入二倍量水,加热至沸使其破乳,置冰箱中冷却使其分层,分取水层,加入适量(0.5%)吐温80,制成1∶1水溶液作为样品原液。
       
       校正pH至7.4~7.6,离心,分装,高压灭菌(8磅、15 min),待凉后4℃冰箱内保存,备用。
       
       试管法抗菌实验详见表1。
       表1  蓝草空气消毒乳抗菌实验(略)
       第9管不加菌作为药液对照,第10管不加药作为菌液生长情况对照,置37℃温箱中培养24 h,观察各管生长情况。
       
       凡能抑制试验菌生长的最高药物稀释度为该药物对试验菌的最低抑制浓度。然后,分别将未生长菌的培养液再接种于适当的琼脂平板上,如培养后重新长出试验菌,则说明仅有抑菌作用,如没有细菌长出则说明该药有杀菌作用,也可依次找出最小杀菌浓度。结果见表2。
       表2  蓝草空气消毒乳抗菌测定结果(略)
       “-”为无细菌生长;“﹢”为有细菌生长
       2.2.2   纸片法  ①金黄色葡萄球菌16~18 h液体培养物,用无菌棉签均匀涂布于普通平板表面,稍干,以无菌镊子取吸有一定量药物(样品原液)滤纸片,直径6 mm,平置于上述已接种细菌的平板表面,置37℃培养。次日观察含药纸片周围有无抑菌圈,并测量其大小。比较(样品原液)对试验菌株的抗菌作用(敏感性)。②将无菌普通平板培养基,放置于室内20 min,盖上平皿放置温箱37℃培养,次日观察周围有无抑菌圈,比较(样品原液)对空气当中微生物的抗菌作用(敏感性)。
       2.3  实验室抗病毒效果检测将Hep-2传代细胞,接种在96孔微量细胞培养板上,置于37℃培养箱中,长成单层,将药品稀释成不同浓度,加入细胞中,求出药液对细胞的无毒界限。然后,各孔分别加入所需浓度病毒液,每一病毒稀释度各加4孔,同时设病毒对照、细胞对照、药物对照、阳性药对照(抗感冲剂,国药准字:Z19993359,东北制药集团公司沈阳第二中药厂生产,每袋10 g),置CO2培养箱内,37℃培养,每天在倒置显微镜下观察,连续3 d,记录各孔变化情况。蓝草消毒乳剂对病毒致细胞病变的作用见表3。
       表3  蓝草空气消毒乳对病毒致细胞病变的作用(略)
       “﹢”为有抑制作用,“﹢-”为有延缓作用
       3  结果
       3.1  实验室抗菌检测结果实验室抗菌检测结果表明:蓝草空气消毒乳对条件致病菌及致病菌均有抑制作用。其对大肠杆菌抑菌效价为1∶16;链球菌抑菌效价为1∶8;金黄色葡萄球菌抑菌效价为1∶4;柠檬色葡萄球菌抑菌效价为1∶8;表皮葡萄球菌抑菌效价为1∶8。用纸片法试验显示在金黄色葡萄球菌周围有明显的抑菌圈,对抑制环境中微生物(空气)的作用更为理想。
       3.2  实验室抗病毒检测结果  蓝草空气消毒乳(样品原液)的1∶1浓度下,对流感病毒FM1株和肠道病毒ECHO11的致细胞病变分别具有抑制和延缓作用。
       4  讨论
       
       空气是致病微生物传播的重要途径,据报道世界上有14种传染病经空气传播[1]。目前,用化学或物理的方法消毒还存在许多不足。中医药预防外邪入侵不仅有完整的理论体系,且许多中药在体外有较强的抗菌抗病毒作用,特别是一些芳香化湿、清热解毒的中药经现代药理研究证实有广谱抗菌作用和体内外抗病毒作用,有一些作为天然香料的花草同时又具有抗菌抗病毒作用,这是开发和研究中药消毒剂强有力的基础。利用中药药性采用先进工艺提取制成空气消毒剂,一方面起到空气消毒作用,另一方面中草药的芳香可以起到提神醒脑,净化清新空气,满足防病、优化环境的要求。而且中药安全、无毒、无刺激,更适合在人员密度大,易污染的环境中使用。因此,越来越受到人们的重视。
       
       从近年来的报道看,中药空气消毒剂的研究以杀灭细菌较多,而杀灭真菌、病毒的研究较少[2]。蓝草空气消毒乳选用金银花、板蓝根、连翘、百部、薄荷、广藿香、桂枝等药,具有解表、清热解毒、芳香化湿功效。本实验表明,蓝草空气消毒乳对条件致病菌及致病菌均有抑制作用,对抑制环境中微生物(空气)的作用更为理想。对流感病毒FM1株和肠道病毒ECHO11的致细胞病变分别具有抑制和延缓作用。熏衣草香能起到避秽,掩盖不良异味,清新空气的作用。国外学者研究发现熏衣草香有助于改善心肌功能[3],不仅能诱导放松,同时可增加觉醒水平[4]。因此,本实验自行研制的蓝草空气消毒乳剂有望在家庭居室、办公室、会议室、学校教室、幼儿园、餐厅等人员密度较大的公共场所的空气消毒和清新中发挥良好的作用。
       【参考文献】
          [1] 赵阿娜,王撬撬.复方苍术雾化剂进行空气消毒的临床研究[J].中国药师,2005,8(5):399.
       
       [2] 王建中,王利敏,姚 冲,等.中药空气消毒剂研究现状[J].中医药学刊,2006,24(11):2053.
       
       [3] 小室一成.熏衣草有助改善心肌功能[J].中医药国际参考,2007,5:26.
       
       [4] Itoh M.熏衣草的生理效应研究[J].国外医学·中医中药分册,2004,26(5):303.

经典中医古籍

中药学教材(附图片)

穴位数据库(附图片)