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       【摘要】 
       目的观察苦碟子注射液对大鼠急性酒精性肝损伤的影响。方法采用50％乙醇给大鼠灌胃5 d造成大鼠急性酒精性肝损伤模型，第3天检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST），第5天给药后检测血清ALT，AST，还原型谷胱甘肽（GSH）及肝匀浆超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）。结果苦碟子注射液可显著降低大鼠急性酒精性肝损伤模型血清ALT及AST（P<0.01或P<0.05），能明显抑制造模大鼠血清中GSH含量降低(P<0.01)，明显提高肝匀浆SOD水平(P<0.01)，降低肝匀浆MDA含量(P<0.05)。结论苦碟子注射液对大鼠急性酒精性肝损伤具有较好的治疗作用，为其临床用药提供了药效学基础。
       【关键词】  苦碟子 动物模型 急性肝损伤 乙醇
       苦碟子注射液是以苦碟子为原料提取精制而成的静脉注射液。临床上苦碟子注射液多应用于对缺血性心脑血管疾病、血管神经性头痛临床症状的改善，并取得较好疗效，但其对实验性急性肝损伤临床应用及基础研究很少。我们以急性酒精性肝损伤大鼠为模型，观察了该药对急性酒精性肝损伤的影响，为其临床应用提供实验和理论依据。
       1  材料与仪器
       1.1    动物健康SD大鼠36只，雄性，清洁级，体重170～190 g，由重庆市中药研究所动物室提供，许可证号：SCXK(渝)20020004。
       1.2    药物与试剂  苦碟子注射液，沈阳双鼎制药有限公司生产，批号：041013011；无水乙醇（分析醇），用时以蒸馏水稀释至50％备用。ALT（批号：20070601）、AST （批号：20070601）、考马斯亮蓝蛋白（批号：20070601）、SOD（批号：20070529）、MDA（批号：20070529）、GSH（批号：20070601）测定试剂盒均有南京建成生物工程研究所提供。
       1.3    仪器微量移液器，上海求精生化试剂仪器有限公司生产；HH-600电子恒温水浴锅，金坛市双捷实验仪器厂生产；721型分光光度计，上海欣茂仪器有限公司生产。
       2  方法
       2.1  动物分组  将大鼠随机分成模型组、空白组、苦碟子组，每组12只。
       2.2  造模及给药模型组：每天禁食不禁水6 h后按0.7 ml/100 g给大鼠灌胃50％乙醇，1 h后重复1次，连续5 d；苦碟子组：苦碟子注射液0.4 ml/100 g腹腔注射，每日禁食不禁水6 h后，灌酒（同模型组）和注射苦碟子交叉进行，各2次，每次间隔30 min，连续5 d；空白组给予等量生理盐水。于第3天末次灌胃后2 h(禁食不禁水16 h后)，3组大鼠常规消毒，割尾采血，离心后测血清ALT,AST。于第5天末次灌胃后2 h(禁食不禁水16 h后)，各组大鼠称重,腹腔注射2%戊巴比妥钠45 mg/kg(0.225 ml/100 g)，腹主动脉采血后处死。精确称量200 mg肝组织，用生理盐水4 ml制做成5%的肝匀浆，供测SOD及MDA。采血30 min后3 000 r/min离心，分离血清，供测ALT，AST，GSH。上述指标均按试剂盒操作说明书进行检测。
       2.3  统计学处理数据应用SPSS12.0软件包进行处理。各项数据以±s表示，用方差分析及两两比较t检验比较组间差异的显著性。
       3  结果
       3.1  一般情况模型组大鼠灌胃后出现醉酒症状，大约2 h后转醒。一般情况较差，食欲下降，毛发光泽度差，大便溏泻，体重增长缓慢。空白组大鼠一般情况良好，无上述情况发生。苦碟子组较模型组醉酒症状减轻，醉酒时间缩短，大约1 h后转醒。
       3.2  各组大鼠实验前后体重变化  见表1。
       表1  各组大鼠实验前后体重变化（略）
       与空白组比较，＊＊ P<0.01；与模型组比较，▲▲ P<0.01；n=12
       
       表1结果显示，与空白组比较，模型组和苦碟子组增重均显著降低，差异有显著性意义（P<0.01）；与模型组比较，苦碟子组的增重显著增高（P<0.01）。
       3.3  各组大鼠血清ALT，AST结果比较  见表2。
       表2  各组大鼠血清ALT,AST结果比较（略）
       与空白组比较，＊＊ P<0.01；与模型组比较，▲▲ P<0.01，▲ P<0.05
       
       表2结果显示，与空白组比较，模型组第3天、第5天血清ALT，AST水平均有明显升高(P<0.01)，且第5天血清ALT，AST水平高于第3天；与模型组比较，第3天时，苦碟子组可降低血清ALT，AST (P<0.05)；第5天时，苦碟子组可显著降低血清ALT (P<0.01)、AST（P<0.05）。
       3.4    各组大鼠血清GSH及肝匀浆SOD,MDA结果比较  见表3。
       表3  各组大鼠急性酒精性肝损伤模型血清GSH及肝匀浆SOD，MDA结果比较（略）
       与空白组比较，＊＊ P<0.01，＊ P<0.05；与模型组比较，▲▲ P<0.01，▲ P<0.05
       
       表3结果显示，模型组与空白组比较, 血清GSH含量明显降低 (P<0.01)， 肝匀浆SOD水平明显降低 (P<0.01)，肝匀浆MDA显著升高 (P<0.05)。与模型组比较，苦碟子组能明显抑制血清中GSH含量降低(P<0.01)，提高肝匀浆SOD水平(P<0.01)，降低肝匀浆MDA含量(P<0.05)。
       4  讨论
       
       应用大鼠酒精性肝病模型，必须考虑大鼠与人类种属的3个不同特点［1］：大鼠对酒精天生的反感；大鼠体内对酒精的代谢速度较人类快3～4倍；大鼠对酒精的耐受性高。针对这些特点，本实验参考朱平生等［2］的大鼠急性酒精性肝损伤造模方法，采用50％乙醇灌胃，2次/d，每次0.8 ml/100g，中间间隔1 h，既保证了一定的饮酒量，达到醉酒效果，又可以防止一次灌胃量过大，动物胃容纳不了，或一次饮酒量过大，动物急性酒精中毒致死。有文献报道发现急性酒精性肝损伤时，转氨酶的变化在第1周时最为显著，以后就逐渐自然下降，因此，我们选择第5天处死动物，以避免转氨酶自然降低造成假象。AST及ALT是临床上应用最广泛的反应肝细胞损害的指标。本实验中模型组血清ALT及AST水平均显著高于空白组，说明造急性酒精性肝损伤模型成功。苦碟子可显著降低血清ALT及AST水平，改善肝功能。
       
       目前认为，乙醇及其在肝细胞内代谢产生的毒性代谢产物所引起的代谢紊乱是导致酒精性肝损伤的主要原因［3］。乙醇所致肝损伤的重要机制之一是激活氧分子产生氧自由基导致肝细胞膜的脂质过氧化。SOD及MDA含量的高低可反映氧自由基水平和脂质过氧化的强度与速率。体内依赖性抗氧化系统中以GSH在抵抗酒精所致的肝损伤中起关键作用，酒精在体外和体内均可使肝脏GSH含量显著降低，GSH含量的减少可能是酒精导致肝脏脂质过氧化增强的原因之一［4］。
       
       酒为湿热有毒之邪，长期饮酒过量，酒毒湿热壅滞中焦，土壅木郁，肝胃不和，气滞与湿热内蕴胃脘，或结于胁下，发为胃痞、胁痛等伤酒之证。中医认为湿阻热壅是急性酒精性肝损伤的致病因素［5］，苦碟子以其清燥湿热之功效常用于湿热证的治疗。本实验结果显示，苦碟子能促进急性酒精性肝损伤大鼠的功能恢复，降低血清ALT及AST的活性，减轻肝细胞的炎症；抗脂质过氧化，提高肝内抗氧化酶SOD及GSH的活性，降低脂质过氧化产物MDA的含量，提示苦碟子药效的产生可能是抑制肝内氧自由基的生成，而且提高抗氧化机制GSH的防御作用，从而产生较好的抗脂质过氧化作用，改善了酒精导致的脂质过氧化引发的一系列病理反应，达到防治酒精性肝损伤的目的。
       【参考文献】
         　　［1］ 黄 健,楼雅卿.酒精和肝脏［J］.中国药物依赖性杂志,2000，9(2):88.
       
       ［2］ 朱平生，庞亚丽，王宇亮，等.大鼠急性酒精性肝损伤模型的脂质过氧化损伤观察［J］.中华中医药杂志,2006，21(6):376.
       
       ［3］ 曲海波,宗建成,王海苹,等.乌丹醒肝颗粒对大鼠急性酒精性肝损伤的影响［J］.齐鲁药事,2006,25(12):757.
       
       ［4］ 王宪龄,卢依平.柴胡黄芩配伍抗大鼠急性酒精性肝损伤作用研究［J］.中药药理与临床，2005,21(4):10.
       
       ［5］ 刘任惠,王宪龄,刘方洲,等. 柴胡黄芩配伍抗大鼠急性酒精性肝损伤作用的实验研究［J］. 时珍国医国药,2006,17(2):163.