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       【摘要】 
       目的探讨黄芪多糖的微波辅助提取。方法以黄芪多糖的得率及纯度为考察指标，以水为提取剂，采用正交设计实验的方法，研究了黄芪多糖的微波提取工艺。结果确定的优化条件为：微波功率360W，提取时间10 min，液固比为5∶1 (ml∶g) ，测得样品中多糖得率和纯度分别为3.28%，46.56%。结论与直接加热提取法相比，微波提取能缩短提取时间，提高了提取效率。
       【关键词】  黄芪多糖 微波 提取 正交实验
       从蒙古黄芪中提取的黄芪多糖是一种杂多糖，由葡萄糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖和葡萄糖醛酸等单糖组成［1］。研究表明，黄芪多糖具有增强机体免疫功能、强心降压、降血糖、抗应激、抗肿瘤、抗病毒、抗辐射、抗氧化等多种药理功效［2］。目前对黄芪多糖提取的研究，多集中在加热浸提上［3～5］，而用微波辅助提取工艺优化条件的研究少有报道。本工艺对此进行了研究，确定了优化条件，并与加热浸提法进行了比较。
       1   材料与仪器
        黄芪，购自广西南宁市一心药业公司，经分析，符合《中国药典》2005年版Ⅰ部“黄芪”项下有关规定。
        98%硫酸、苯酚、95%乙醇、葡萄糖，以上试剂均为分析纯。苯酚使用前经蒸馏处理，收集180～182℃馏分待用。
        UV-2501PC型紫外可见分光光度计（日本岛津公司）；BS 124S电子分析天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；LABORTA 4000旋转蒸发器（德国Heidolph公司）；101A－E1电热鼓风干燥箱(上海实验仪器厂有限公司)；NJL07-3微波萃取器（南京杰全微波设备有限公司）。
       2  方法与结果
        2.1  黄芪多糖的测定方法采用苯酚-硫酸法［6］测定，以葡萄糖为标准样品。多糖在浓硫酸的作用下能水解生成单糖，并迅速脱水形成糠醛衍生物，然后与苯酚缩合成有色化合物，可用分光光度法测定其吸光度，确定其提取效果。
        2.2   微波提取条件的优化 将黄芪药材在恒温干燥箱中于60 ℃下干燥6 h，用固体样品粉碎机粉碎。准确称取20 g黄芪粉末，加入5～15倍量的水浸泡1 h，微波提取。提取的工艺参照文献［7］以微波功率、提取时间、液固比(ml∶g)各3个水平按L9（34）正交设计实验进行优选，提取液适当浓缩，加入约3～5倍浓缩液体积的95%乙醇醇沉，静置，过滤、干燥得到黄芪粗多糖。然后用水将一定量的多糖样品溶解，按测定标准曲线方法显色，于490   nm处测定吸光度值，由工作曲线或回归方程计算其多糖浓度，即可计算粗多糖的含量。
       3  结果
        3.1  最大吸收波长的选择 准确称取0.135 6 g葡萄糖标准品，蒸馏水溶解定容到100 ml容量瓶中，摇匀，配成葡萄糖标准溶液。取配置的标准葡萄糖溶液3.0 ml，加入5%的苯酚3.5 ml，摇匀，迅速加入浓硫酸15 ml，室温显色15 min，冷却，在波长为200 ～600 nm范围内，用紫外可见分光光度计扫描，测得最大吸收波长为490 nm。
        3.2  工作曲线及线性回归方程分别准确量取葡萄糖标准溶液0.5，2，3.5，5，6.5，8 ml置于50 ml棕色容量瓶中，用蒸馏水定容，分别吸取上述不同浓度的葡萄糖溶液3ml置于25 ml量瓶中，依次加入3.5 ml 5%苯酚水溶液、15 ml 98%浓硫酸，显色20 min，冷水中冷却至室温，加蒸馏水至刻度。以同样处理的蒸馏水为空白，于490 nm处测定溶液吸光度。以葡萄糖浓度为横坐标X，吸光度为纵坐标Y，线性回归得标准曲线：Y=47.575X+0.001 5（R2=0.998 5）。（见图1）。葡萄糖在0.001 6～0.026 0 mg/ml浓度范围与吸光度呈良好线性关系。
        图1  葡萄糖标准曲线
        3.3  实验因素对黄芪多糖提取效果的影响L9（34）正交实验设计因素水平及实验结果见表1～2。表1  L9（34）因素水平
        由表2的极差分析可知，本实验所设计的3个因素对黄芪多糖提取有着不同的影响，各因素对黄芪多糖提取的影响大小顺序为：B＞A＞C，由相关分析可知，最佳实验方案为B2A1C1，即微波提取的最优化条件为：提取时间10 min，微波功率360 W，液固比(ml∶g)5∶1。
        3.4  实验因素对黄芪多糖提取效果影响的方差分析进行实验因素对多糖提取效果影响的方差分析。结果见表3。由方差分析表3可知，因素B提取时间对黄芪多糖提取效果的影响达到显著性水平。
        3.5  微波提取与热水浸提法的比较按实验确定的微波提取优化条件进行黄芪多糖的提取，并与热水浸提进行比较。结果见表4。由表4可知，传统的加热浸提法提取时间较长，但多糖的得率及纯度高于微波辅助提取。微波能明显地促进多糖的提取过程，缩短提取时间，能够在10 min 内有效地将多糖提取出来，但微波在强化黄芪多糖的提取时，同时也促进了黄芪中其它成分的提取，多糖纯度低于加热浸提法。表2  正交实验结果表3  正交实验结果方差分析表4   微波提取与热水浸提结果比较
       4  结论
        通过实验确定的微波提取黄芪多糖的优化条件为：微波功率360 W，提取时间10 min，液固比(ml∶g)5∶1，测得多糖得率及纯度分别为3.28%，46.56%。微波辅助提取与传统的加热浸提法相比较，微波能明显地促进多糖的提取过程，缩短提取时间，但多糖纯度低于加热浸提法。参考文献：
       【参考文献】
         ［1］ 单俊杰，王顺春，刘 涤，等．黄芪多糖的化学和药理研究进展［J］.上海中医药大学学报，2000，14(3):62.
       
       ［2］ 黄 桢. 黄芪多糖的药理研究进展［J］.中国临床药学杂志，2002，11(5):315.
       
       ［3］ 李红民，黄仁泉，王亚洲．提高黄芪多糖提取收率的工艺研究［J］.西北大学学报，2000，30(6):509.
       
       ［4］ 韩鲁佳，阎巧娟，江正强，等.黄芪多糖及皂甙提取工艺研究［J］.农业工程学报，2000，16(5):118.
       
       ［5］ 孙瑞敏，刘冬平，陈 俊，等.黄芪多糖的提取［J］.南开大学学报，2005，38(1):33.
       
       ［6］ 周文兰，童列波．苯酚-硫酸法测定康克胶囊中多糖含量［J］.时珍国医国药，2001，12(7):505.
       
       ［7］ 刘青梅，杨性民，邓红霞，等.采用微波技术提取紫菜多糖的工艺研究［J］.农业工程学报，2005，21(2):153.