复方苦豆子颗粒对高脂血症大鼠血脂及脂质过氧气化物的影响
作者：曹亚军， 马建慧， 陈虹， 李丽燕
《时珍国医国药》 2006年 第10期
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【关键词】 复方苦豆子颗粒；,,高脂血症；,,血脂；,,丙二醛
摘要：目的观察复方苦豆子颗粒对高脂血症大鼠血脂水平的影响和抗脂质过氧化作用。方法采用喂养高脂饲料的方法复制高脂血症大鼠模型，随机分组，实验10周后测定血脂水平、动脉粥样硬化脂数（AI）、血清 MDA及肝组织中 TC、MDA的含量。结果与高脂模型相比，复方苦豆子颗粒组大鼠血清 TC、TG、LDL C水平和动脉粥样硬化指数（AI）明显降低（P＜0.05~0.01），血清 MDA含量显著降低（P＜0.01），且呈剂量依赖性；大剂量组可明显升高 HDL C含量（P＜0.05）；复方苦豆子颗粒各剂量组肝组织 TC无显著性差异（P＜0.05），中剂量可明显降低肝组织 MDA水平（P＜0.05），小剂量组和大剂量组无显著性差异（P＞0.05）。结论复方苦豆子颗粒具有明显的调血脂、抑制脂质过氧化物MDA形成的作用。
关键词：复方苦豆子颗粒； 高脂血症； 血脂； 丙二醛
Effect of Complex Prescription Kudouzi Granule on Blood Lipid and LPO of Hyperlipidemia Rats
CAO Ya jun, MA Jian hui, CHEN Hong*, LI Li yan
(Key Laboratory of Phytomedicine Resources ＆ Modernization of TCM, Xinjiang Building Army, Shi hezi, Xinjinag 832002,China)
Abstract:ObjectiveTo observe the influence on the serum lipid level and anti lipid perxidation effect of compound prescription Kudouzi granule on blood lipid metabolic disorder in hyperlipidemia rats.MethodsAdopting the hyperlipidemia rats fed with the high lipid diet and dividing randomly into guoups .After 10 weeks, the serum lipid, atherosclerosis index(AI), serum MDA, hepatic TC,and hepatic MDA were tested.ResultsCompared with the high lipid model group,Kudouzi granule compound prescription could obviously decrease the serum level of TC,TG,LDL C,MDA and atheroslerosis index (AI)(P＜0.05~0.01)and elevate the HDL C level obviously(P＜0.05)in high dose group ,also indicated the dosage dependence .Hepatic TC of different dose groups did not have the significance difference(P＞0.05).Hepatic MDA level was obviously reduced(P＜0.05)in middle dose group,but did not have the significance difference(P＞0.05)in low and high dose groups.ConclusionThe compound prescription Kudouzi granule has prominent effect on regulating the serum lipid level and decreasing the MDA level.
Key words:Complex prescription Kudouzi granule; Hyperlipidemia; Blood lipid; Malondialdehyde
随着人们生活水平的提高，我国动脉粥样硬化和冠心病的发病率呈逐年升高趋势，而血脂及脂质代向异常是此类疾病发生的始动因素［1］。大量流行病学、动物实验证实，高脂饮食对高脂血症的形成有重要作用。目前临床上用于降脂的西药虽然疗效确切，但毒副作用较大，不宜长期服用。因此，寻找、开发无毒而有效的降脂中药具有重要的实际意义。复方苦豆子颗粒是名老中医经验方，此方含山楂、苦豆子、菜菔子、黄芪等多味中药，具有清热解毒、消食除胀、活血化淤、补中益气等作用，临床上多年来用于治疗高脂血症疗效好、毒性低。本研究为阐明其药理作用，探讨其作用机理，观察了复方苦豆子颗粒对高脂血症大鼠脂质代谢紊乱的预防作用，为临床治疗高脂血症、预防动脉粥样硬化提供药理学实验依据。
1 仪器与材料
1.1 动物雄性 Wistar大鼠，体重（200±20）g，由新疆科学实验动物中心提供，在本实验室适应性喂养1周后用于实验。
1.2 药物与试剂复方苦豆子颗粒制备：苦豆子、山楂、白术、菜菔子、黄芪等多味药材购自新疆石河子市医药公司，根据其有效成分，分别用水或乙醇提取、沉淀除杂，后将提取液混合浓缩，加入辅料制成颗粒。胆固醇：BR，北京市海淀区微生物培养基制品厂生产，批号020313；胆酸钠：美国进口；猪油，市售；总胆固醇（TC）、甘油三酯（TC）、低密度脂蛋白（LDL C）、高密度脂蛋白（LDL C）酶法测定试剂盒均由浙江东瓯生物工程有限公司提供；蛋白定量（双缩脲法）测试盒、丙二醛（MDA）测定试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供，批号为020927。其余所用试剂均为分析纯。
1.3 仪器751 GW分光光度计（上海分析仪器厂生产），TDL 5000 B冷冻离心机（上海安亭科学仪器厂生产），Puffer Hubbard超低温冰箱（美国进口），XW 80A旋涡混合器，TN型托盘式扭力天平（上海第二天平仪器厂生产）。
2 方法
2.1 动物分组、高脂模型建立及给药方法雄性 Wistar 大鼠50只，实验前喂普通饲料7 d后，按体重随机分为正常对照组（正常组）、高脂模型组（高脂组）、复方苦豆子颗粒小剂量、中剂量和大剂量组，每组各10只，分笼饲养，自由摄食饮水。正常对照组喂养普通饲料，其余四组给与高脂饲料。高脂饲料配方：普通饲料90%，胆固醇2%，胆酸钠0.5%，猪油7.5%。给药组喂养高脂饲料，同时灌服不同剂量的复方苦豆子颗粒，按生药计分别给予4.5，9.0和13.5 g・kg-1・d-1。
2.2 测定指标及方法
2.2.1 血脂及肝组织 TC含量的测定实验过程中，分别在实验前及实验第5周末空腹断尾取血。实验第10周末，动物禁食（不禁水）12 h后，断头取血，每次取血后，立即于4℃、3 000/min离心15 min，分离血清，测定血脂水平。血清 TC、TG、LDL C、LDL C含量均按照试剂盒测定方法直接测定。动脉粥样硬化指数（AI）计算公式如下：AI=（TC HDL C）/HDL C。实验结束时，断头取血后摘取动物肝脏，用生理盐水冲洗，并用滤纸吸干，立即称重。取动物肝脏左叶0.5 g，用玻璃匀浆器制成10%的匀浆，用氯仿 甲醇混合液（1∶1 v/v）抽提脂质，离心取上清液测定肝组织中 TC的含量。
2.2.2 血清及肝组织 MDA含量的测定另取动物肝左叶0.5 g，按1∶9加入4℃重蒸水，用玻璃匀浆器研磨制成10%的肝匀浆。血清及肝组织 MDA的含量用丙二醛（MDA）测定试剂盒测定，蛋白定量用双缩脲法。
2.3 统计学处理采用 SPSS10.0软件处理，实验数据以±s表示，统计方法用方差分析，组间比较用 t检验。
3 结果
3.1 复方苦豆子颗粒对高脂血症大鼠血脂及动脉样硬化指数（AI）的影响结果见表1~2。表1结果显示，实验5周末时，与高脂模型组相比，复方苦豆子颗粒中、大剂量组大鼠血清 TC、TG、LDL C的含量与动脉粥样硬化指数（AI）明显降低（P＜0.05或P＜0.01），大剂量组 HDL C含量明显升高（P＜0.01）。表2结果显示，实验结束（10周末）时，复方苦豆子颗粒的小、中、大剂量组大鼠血清 TC、TG、LDL C的含量与动脉粥样硬化指数（AI）均明显下降（P＜0.01），大剂量组 HDL C含量明显升高（P＜0.05）。
表1 实验5周末各组大鼠血脂及动粥指数测定结果比较（略）
与正常组比较，1）P＜0.05，2）P＜0.01；与高脂组比较，3）P＜0.05，4）P＜0.01，n=9
表2 实验10周末各组大鼠血脂及动粥指数(AI)测定结果比较（略）
与正常组比较，1）P＜0.05，2）P＜0.01；与高脂组比较，3）P＜0.05，4）P＜0.01，n=9
3.2 复方苦豆子颗粒对高脂血症大鼠血清 MDA及肝组织 TC、MDA的影响：结果见表3。表3结果显示，与正常对照组相比，高脂模型组及复方苦豆子颗粒组肝组织中 TC含量均明显升高（P＜0.01）；与高脂模型组相比，复方苦豆子颗粒组肝组织中 TC含量无显著性差异（P＞0.05）。
表3 实验10周末各组大鼠肝组织 TC、MDA及血清 MDA测定结果比较（略）
与正常组比较，1）P＜0.05，2）P＜0.01；与高脂组比较， 3）P＜0.05，4）P＜0.01，n=9 与正常对照组相比，高脂模型组血清 MDA含量在实验结束（10周末）时明显升高（P＜0.01），复方苦豆子颗粒组血清 MDA含量无明显差异（P＞0.05）；与高脂模型相比，复方苦豆子颗粒组血清 MDA含量明显降低（P＜0.01）。
4 讨论
脂质代谢紊乱特别是血浆胆固醇浓度升高可导致并加速动脉粥样硬化的进展,使冠心病和血栓形成性疾病容易发生。血浆 TC水平增高,冠心病危险性增高,而且现已证明 LDL C水平与冠心病发病率呈正相关［2，3］。降低血脂特别是降低 LDL C水平或升长高 LDL C水平，能延迟冠脉损害，延缓或减轻动脉粥样硬化的发生和发展，对预防脑血管疾病有重大临床意义。复方苦豆子颗粒是名老中医按中医理论组方，方中山楂、苦豆子、莱菔子、黄芪等多味中药具有消食除胀，健脾益气，祛痰降浊，活血化淤之功效。本实验结果显示，高脂模型组的血清 TC，TG，LDL C，AI和肝脏 TC均明显升高，说明高脂血症模型复制成功。复方苦豆子颗粒可明显降低高脂血症大鼠血清 TC、TG、LDL C、AI水平并能升高 LDL C含量，且用药10周末作用明显强于第5周末，提示本品能改善实验性高脂血症大鼠脂质代谢紊乱，对动脉粥样硬化有预防作用，且与剂量及用药时间相关。高脂血症、动脉粥样硬化的发生发展与机体的脂质过氧化损伤有关［4］。当机体的氧化系统和抗氧化系统失衡时，就会产生大量的自由基，最终形成脂质过氧化物（LPO），LPO通过氧化修饰 LDL C，促使血管内皮细胞损伤，导致动脉粥样硬化形成［5］。MDA是自由基介导的不饱和脂肪酸发生脂质过氧化作用的中间产物，它进一步与蛋白质反应生成 LPO，故其含量可间接反映自由基的产生情况和机体组织的脂质过氧化程度［6］。血和肝脏是形成 LPO的重要部位，因此我们通过检测高脂血症大鼠血清及肝脏 MDA的含量作为评价复方苦豆子颗粒抗氧化作用的指标。本实验中复方苦豆子颗粒能明显降低血清及肝脏 MDA的含量，说明其具有抗脂质过氧化作用，与预防脂质代谢紊乱和动脉粥样硬化的发生密切相关。现代药理学研究表明，方中山楂所含的黄酮能抑制3 羟基 3 甲基戊二酰辅酶 A（HMG CoA）还原酶的活性，从而抑制内源性胆固醇的合成，并能升高 HDL C，降低 LDL C水平［7］。苦豆子生物碱能显著降低血浆 TC，升高 HDL C水平，降低血液黏度［8］。推测复方苦豆子颗粒调脂机制可能是通过竞争性抑制机体合成 TC的限速酶 HMG CoA还原酶，减少 TC的内源性合成，同时还可能通过抑制外源性脂质吸收而发挥降脂作用。本研究结果表明复方苦豆子颗粒通过降低血脂水平，调节脂质代谢，抑制过氧化脂质的形成，对实验性高脂血症及动脉硬化的形成可产生明显的预防作用。有关复方苦豆子颗粒的调血脂及抗氧化作用机制还有待于进一步深入研究。
参考文献：
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(新疆兵团植物药资源与中药现代化重点实验室，新疆 石河子 832002)