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       【关键词】  超声技术
          　摘要：目的：从新疆狭叶红景天中提取黄酮，并测定其含量。方法：运用超声技术提取红景天总黄酮，用比色法测定黄酮含量。结果：测得红景天中黄酮含量21.15%，平均回收率为98.2%，RSD=1.33%(n=5)。结论：首次运用超声技术从新疆红景天中提取出黄酮与常规法比较，反应速度加快，实验结果令人满意。
       关键词：超声技术；  红景天；  黄酮；  提取；  含量测定
       Ultrasonic Extraction and Determination of Chromoco in  Rhodila kirilowii Rgl.ex Maxim.
       PENG Xi
       (The First Affiliated Hospital of Shihezi Medical College，Shihezi, Xinjiang  832000, China)
       Abstract:Objective:To extract and determine chromoco of Rhodiola kirilowii Rgl.ex Maxim.Methods:Ultrasonic technology applied to chromoco of Rhodiola kirilowii Rgl.ex Maxim.were obtained，content determination with colorimetry.Results:The chromoco content of Rhodiola kirilowii Rgl.ex  Maxim.is 21.15%，recovery rate is 98.2%.Conclusion:Ultrasonic technology applied to the chromoco of Rhodiola kirilowi iRgl.ex Maxim. has been obtained for the first time.
       Key words:Ultrasonic Technology；  Rhodiola kiriJowii Rgl.ex Maxim.；  Chromoco；  Extraction；  Content determination
   
　　新疆狭叶红景天Rhodiolakirilowii Rgl.exMaxim.为多年生草本，主要分布于天山海拔1 600～5 600 m  的区域，新疆有多种红景天，其中狭叶红景天为主要品种，维吾尔译音为：克孜马热力［1］。近年来的药理研究表明，狭叶红景天黄酮具有抗血栓素形成、抗病毒、抗肿瘤、降血糖等作用［2］。为提高药材利用率，节约药材资源，我们运用超声技术从狭叶红景天中提取黄酮，并测定其含量［3］，反应速度加快，实验结果令人满意。
       　1  仪器、试剂及样品
       1.1  仪器岛津UV2401PC紫外可见分光光度计，DL360超声波仪(35kHz，浙江象山县石浦海天电子仪器厂)，TG328B分析天平，DZKWC电子恒温水浴(北京光明医疗仪器厂)，R201旋转蒸发器(上海申胜生物技术有限公司)，索氏提取器。
       1.2  材料与试剂
       对照品芦丁购自中国药品生物制品检定所。其余试剂均为分析纯新疆狭叶红景天：采自天山北坡新疆乌鲁木齐南山海拔2 500～3 500 m的深山里，经石河子大学生物学院何敬琨教授鉴定为Rhodiola kirilowii Rgl.exMaxim.。春季挖取，去杂质，切片晒干，破碎后备用。
       2  方法与结果
       2.1  黄酮测定
       2.1.1  标准曲线制备以芦丁为对照品测定狭叶红景天中总黄酮含量，加入铝离子试剂，同时控制适宜pH值，使黄酮化合物与铝盐形成络合物在可见区能获得稳定的特征吸收峰。精密称取120℃干燥恒重的芦丁标准品10 mg，加85%乙醇溶解，定容至50 ml容量瓶中，摇匀，制成浓度为0.2 mg/ml的标准品溶液。分别取标准品溶液0，0.2，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0 ml于10 ml容量瓶中，加5%亚硝酸钠0.4 ml，放置6 min后，加10%硝酸铝0.4 ml，放置6 min，再加4%的氢氧化钠4 ml，加水至刻度，摇匀，放置15 min，进行全波长扫描，在510 nm处均有最大吸收。以测定结果计算得直线方程C=79.22A-0.466，r=0.997 8。在40～800 μm/ml的范围内，浓度与吸收度有良好的线性关系。
       2.1.2  供试品溶液制备狭叫红景天经粉碎后过65目筛，细粉于烘箱中60℃干燥4 h待用。精密称取样粉1 g于烧瓶中，加入85%乙醇60 ml，将此烧瓶放入DL360超声波仪中，分别超声提取1,2,3次，每次20,30，40 min。将提取液转移到100 ml容量瓶中，用85%乙醇定容，作为供试品溶液。
       2.1.3  样品含量测定精密吸取供试品溶液2.0 ml，置10 ml容量瓶中，按与标准曲线相同的方法显色测定。在510 nm处测吸收度以提取2次，30 min/次，吸收度最大。通过标准曲线，计算出样品黄酮含量。分别为20.78%,20.96%,21.14%，21.33%,21.56%平均含量为21.15%.
       2.1.4  定性分析
       2.1.4.1  还原反应，将样品溶于乙醇，加入少量镁粉振摇，滴加几滴浓盐酸，静置l～2 min，显红紫色。
       2.1.4.2  络合反应，样品加入1%三氯化铝溶液中，生成络合物为黄色(λmax-415 nm)，并有荧光。
       2.1.5  回收率实验取已知总黄酮含量的供试品溶液l ml于10 ml容量瓶中，再加入0.2 mg/ml的标准品溶液0.4 ml，依法测定，结果平均回收率为98.2%，RSD=1.33%(n=5)。
       2.1.6  精密度精密吸取供试品溶液1.0 ml共5份，分别置l0 ml容量瓶中，按标准曲线的制定项下相同的方法显色测定(每隔5 min测 1次，连续5次)。通过标准曲线，计算出样品黄酮的含量。分别为20.79%，20.98%，21.14%，21.23%，21.46%。平均值为21.12%，RSD=1.48%，精密度良好。
       2.1.7  重复性称取天山大黄样品5份，分别按2.1.3项下操作，依法测定，其含量结果为21.15%，RSD=1.33%。
       2.1.8  稳定性实验取同一供试液在6，12，24，36，48 h不同时间测定吸光度。结果表明，RSD=2.34%(n=5)吸光度值在48 h内基本保持不变。
       2.2  常规法提取狭叶红景天经粉碎后过65目筛，细粉于烘箱中60℃干燥4 h待用。精密称取样粉1 g于烧瓶中，加入85%乙醇60 ml，将此烧瓶放入索氏提取罪中，提取时间12，24，36 h。将提取液转移到100 ml容量瓶中，用85%乙醇定容，作为供试品溶液。精密吸取供试品溶液2.0 ml，置10 ml容量瓶中，按与标准曲线相同的方法显色测定。在510 nm处测吸收度。通过标准曲线，计算出样品黄酮平均含量为17.53%。
       　　3  讨论
       超声技术已经广泛应用于总黄酮的提取［3］，可以大幅度地提高总黄酮的提出率，极大地缩短提取时间，节省溶剂。超声提取一般在常温条件下进行，避免了黄酮的分解。超声波破碎过程是一个物理过程，浸提过程中无化学反应，被浸提的生物活性物质在一定时间内保持不变，所提黄酮为常规法的1.2倍。因此，采用超声法提取红景天黄酮，可避免因结构改变而使后续的结构分析及药理活性研究产生错误的结论。超声法所用仪器简单，操作方便，且自动化程度高，便于大规模工业生产。
       　　参考文献：
       ［1］刘勇民.维吾尔药志［M］.乌鲁木齐：新疆科技卫生出版杜，1999:604610.
       ［2］王家明，阎继平.红景天的药理作用研究进展［J］.中医药学报，2003，30（4）：5759.
       ［3］赵兵，王玉存，欧阳藩，等.超声波在植物提取中的应用［J］.中草药,1999，30（9）:附13.
　　
　　作者简介：彭  曦(1970)，男(汉族)，新疆人，现任石河子大学医学院第一附属医院主管药师，主要从事药学工作.
       (石河子大学医学院第一附属医院，新疆 石河子  832000)
       收稿日期：20050308