文章标题 全文   多个检索词，请用空格间隔。

       【摘要】 
       目的研究穿心莲内酯对链脲菌素实验性糖尿病小鼠血糖及抗脂质过氧化作用的影响。方法小鼠腹腔一次性注射链脲菌素120 mg/kg制备糖尿病小鼠模型，治疗组用穿心莲内酯以50，100 mg·kg-1两个剂量浓度灌胃连续14 d,测定血糖、血清和胰腺组织匀浆中的丙二醛（MDA）的含量及超氧化物歧化酶（SOD）的活性。结果穿心莲内酯能显著降低糖尿病小鼠血糖,提高血清和胰腺组织中的SOD活性、降低MDA含量，与模型组比较,具有显著性差异(P<0. 05)。结论穿心莲内酯有降低血糖作用，可能与提高氧化酶活性、清除自由基、减少过氧化脂质生成有关。
       【关键词】  穿心莲内酯 糖尿病 降血糖 脂质过氧化
       糖尿病是以糖代谢紊乱为主的全身性疾病,其与自由基的关系正在引起人们的广泛关注。穿心莲内酯是穿心莲的主要有效成分［1］ 。穿心莲具有抗菌消炎、抗病毒、抗肿瘤、防治心血管疾病、抗肝损伤、增强免疫等多种药理作用［2］ ，但对降血糖的研究报道少见。在我们前期的实验研究发现穿心莲水煎剂对四氧嘧啶所致高血糖小鼠血糖有影响［3］ 。许多研究结果也表明，在血管炎症、辐射损伤、中毒等疾病发病过程中都有氧自由基的参与，而这些氧自由基能损伤细胞大分子的结构，结果导致组织器官病变，引起某些疾病的发生［4］ 。为进一步了解穿心莲降血糖作用的有效成分及可能的机制，本文就穿心莲内酯对链脲菌素实验性小鼠血糖、抗氧化作用的影响进行研究，以探讨穿心莲内酯抗氧化与降血糖作用的关系，为开发穿心莲新的药理作用提供实验理论依据。
       1  材料与仪器
       1.1   试剂 链脲菌素（streptozotocin,STZ）,美国Sigma 公司产品； MDA试剂盒，南京建成生物工程研究所产品，批号20060609；SOD试剂盒，南京建成生物工程研究所产品，批号20060607。
       1.2   药品 穿心莲内酯，购于桂林医药站。盐酸二甲双胍，北京京丰制药有限公司产品，批号050319 。
       1.3  动物 昆明种小鼠，体重（22±2）g，雌雄各半，由桂林医学院动物室提供，各组动物均在同样环境中饮水、摄食。
       1.4  仪器 722分光光度仪, CYC15超级高速离心机, TLG168台式恒温水浴锅，可调微量移液器（10～50 μl ）。
       2  方法
       2.1   穿心莲内酯对STZ致高血糖动物模型的建立与分组取昆明种小鼠60只，适应性饲养3 d，随机留取10只作为正常对照组（简称对照组），其余为实验组。实验组小鼠禁食12 h后，以腹腔一次性注射STZ 120 mg/kg(溶于pH 4.5,0.1 mmol·L-1  枸橼酸盐缓冲液）。对照组注射等容积的枸橼酸盐缓冲液。实验组注射48 h后，剪尾取血，用葡萄糖氧化酶法测血糖，血糖浓度 ＞ 11 mmol·L-1,为合格的糖尿病模型［5］ 。
       
       将成模的42只小鼠再随机分为4组，每组10只（模型组为12只）。即正常对照组、糖尿病模型组（简称模型组）、糖尿病模型+穿心莲内酯大剂量组（100 mg/kg）、糖尿病模型+穿心莲内酯小剂量组（50 mg/kg）及二甲双胍组。对照组和糖尿病组小鼠喂普通饲料，自由饮用水，每天以蒸馏水灌胃［0.2 ml/（10g·d）］1次，连续给药14 d，给药期间标准饲料和饮水不受限制。
       2.2   检测指标于末次给药1 h后，断头取血，分别测定空腹血糖和血清SOD活性 、MDA水平含量；断头取血后剖开腹腔，取胰腺组织，用4℃生理盐水清洗残血，用滤纸吸出残存水分，称质量，置玻璃匀浆器中研磨，加4℃生理盐水制成10%胰腺匀浆，检测MDA和SOD。检测MDA含量采用硫代巴比妥酸反应物（TBA比色）法、检测SOD活性采用黄嘌呤氧化酶法。测定方法按试剂盒说明程序进行。
       2.3    数据处理实验所得数据均用±s表示，数据统计由SPSS10.0软件处理，组间比较用t检验。
       3  结果
       3.1  穿心莲内酯对STZ实验性糖尿病小鼠血糖的影响   与糖尿病模型组比较，穿心莲内酯组血糖明显下降（P < 0.05或P < 0.01）,小鼠的多饮，多食，多尿症状明显改善。结果见表1。
       表1  穿心莲内酯对STZ实验性糖尿病小鼠血糖的影响（略）
       与模型组比较，*P﹤0.05，**P﹤0.01，*** P﹤0.001
       3.2  穿心莲内酯对STZ实验性糖尿病小鼠血清SOD活性、MDA含量的影响造模后的糖尿病小鼠血清MDA含量较对照组小鼠明显升高，SOD的活性明显降低，给予穿心莲内酯后的血清MDA含量明显降低及SOD活性明显升高（P﹤0.05或P﹤0.01）。结果见表2。
       表2  穿心莲内酯对STZ实验性糖尿病小鼠血清SOD活性、MDA含量的影响（略）
       与模型组比较， * P﹤0.05，** P﹤0.01
       3.3  穿心莲内酯对STZ实验性糖尿病小鼠胰腺匀浆中SOD活性 、MDA含量的影响糖尿病小鼠胰腺匀浆中SOD活性低于正常小鼠SOD活性，MDA含量明显高于正常小鼠，给予穿心莲内酯后，胰腺匀浆中的SOD活性明显升高，MDA含量减少（P﹤0.05或P﹤0.01）。结果见表3。
       
       表3  穿心莲内酯对STZ实验性糖尿病小鼠胰腺匀浆中SOD活性，MDA含量的影响（略）
       与模型组比较，*P﹤0.05，**P﹤0.01
       4  讨论
          
       糖尿病引起体内代谢紊乱的原因之一与自由基代谢平衡失调有关［6］。氧自由基为损伤生物的大分子，是参与多种疾病发生发展过程的基础。正常情况下，体内自由基、过氧化脂质和抗氧化成分之间保持着动态平衡。当自由基在体内的产生增加时，由于其特殊的细胞毒性作用，可对机体产生一系列的损害作用，其中对胰岛β细胞的损伤是引发糖尿病的一个重要因素［7］。在所有组织中，胰岛是富含膜结构的组织，膜结构的多不饱和脂肪酸极易受自由基的攻击。因此糖尿病时胰岛对氧化损伤的敏感性增加［8］。
       
       本实验证明，用STZ造模后，小鼠血糖明显升高，血清中超氧化物歧化酶活性降低，丙二醛增高，说明STZ 通过自由基损伤β细胞,使β细胞功能受损,胰岛素合成减少,引发糖尿病［9］ 。
       
       用穿心莲内酯治疗后，空腹血糖下降，具有抗氧化作用SOD活性明显升高，而过氧化脂质MDA含量明显下降，提示穿心莲内酯可以通过升高SOD活性，清除自由基，减少脂质过氧化，与黄振倩［10］报道的穿心莲提取物是一种较强的抗氧化剂,具有清除活性氧等自由基、减缓病理性脂质过氧化反应、抗脂质过氧化损伤作用相似。作为一味传统的中药，穿心莲在临床上利用率很高，本实验用其有效成分——穿心莲内酯，结果表明有降低血糖的作用，推测可能与药物能减少脂质过氧化、减轻氧自由基对胰岛β细胞的损伤作用有关。其确切机制有待于进一步研究。
       【参考文献】
         　　［1］ 顾利红，朱品业.薄层描法测定穿心莲内酯、脱水穿莲内酯的含量［J］. 中草药，2000，3l(4)：260.
       
       ［2］ 郭 蓓. 穿心莲的研究及临床开发 ［J］.药学进展，2004，28（12）：542.
       
       ［3］ 杨 苹 ，韦 昊，秦慧勤，等. 穿心莲对正常小鼠和高血糖小鼠血糖影响的实验研究［J］.时珍国医国药，2007，18(1)：87.
       
       ［4］ Spiteller G.Lipid peroxidation in aging and age-dependent diseases［J］.Exp Geronto,2001,36(9):1425.
       
       ［5］ 徐叔云,卞如濂,陈 修,等.药理实验方法学［M］.北京:人民卫生出版社,1982：524.
       
       ［6］ 卫综玲，石渊渊，任艳彩. 地骨皮的降血糖机制研究［J］. 中草药，2005，6（7）：1050.
       
       ［7］ 段有金．氧自由基与糖尿病［J］．日本医学介绍，1999，20(7)：331.
       
       ［8］ 陈 香，田浩明．糖尿病胰岛B细胞调亡病因学机制［J］．中国糖尿病杂志，2002，10：175.
       
       ［9］ 张均田. 现代药理学实验方法［M］. 北京:北京医科大学中国协和医科大学联合出版社, 1998：981.
       
       ［10］ 黄振倩，张瑶珍，张东华，等.穿心莲提取物F0134抗红细胞膜氧化损伤的实验研究［J］.同济医科大学学报，1999，28（4）：332.