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       【摘要】 
       目的检测伏牛山区青翘与老翘药材质量。方法《中国药典》方法测定青翘与老翘药材的水分、灰分、水浸出物、醇浸出物，分光光度法测定总黄酮含量，高效液相色谱（HPLC）法测定连翘苷含量。结果伏牛山区青翘与老翘药材的水分、灰分、水浸出物、醇浸出物含量均达到《中国药典》标准，老翘中连翘苷含量低于《中国药典》标准。结论伏牛山区青翘与老翘药材的质量不同。
       【关键词】  青翘 老翘 质量 检测
       连翘为木樨科连翘属植物连翘Forsythia suspensa (Thunb.)Vahl的干燥果实，主产于河南、山西、陕西。连翘作为一种传统常用清热解毒中药，味苦, 性微寒, 归肺、心、小肠经，具有清热解毒、散结消肿, 利尿排石等功能。现代药理研究证明, 连翘具有抗菌、抗炎、解热、镇吐、利尿强心、抗肝损、镇痛、抗内毒素、抗病毒、降血压等作用。连翘根据其采收期不同，可分为青翘和老翘两种。果实初熟尚带绿色时采收,用沸水煮片刻或蒸熟后晒干,习称“青翘”；果实熟透时采收晒干，习称“老翘”。传统经验一直认为老翘好于青翘。近来又有研究表明，以连翘苷为指标比较青翘与老翘的质量，青翘质量优于老翘。为了更好地比较两者孰优孰劣，本实验以河南伏牛山区产的连翘药材为研究对象，对两者质量进行检测。现报道如下。
       1  仪器与材料
       1.1  仪器电恒温水浴锅（巩义市英峪予华仪器厂）；SHZ-C型循环水使用多功能真空泵（巩义市英峪豫华仪器厂）；TP300型超声机（天鹏电子新技术有限公司）Waters600-2487；高效液相色谱仪（waters公司）；7521紫外-可见分光光度计（上海精密仪器厂）。
       1.2  试剂连翘苷对照品（购于中国药品生物制品检定所，批号：110821-200609）；芦丁对照品，自制，纯度达98%以上；甲醇色谱纯（天津克密欧）；乙腈色谱纯（天津克密欧）；其他试剂均为分析纯。
       1.3  药材采自栾川伏牛山区，经本教研室鉴定为连翘Forsythia suspena (Thunb．)Vahl的干燥果实。
       2  方法与结果
       2.1  水分、灰分、酸不溶灰分及浸出物含量测定［1］结果见表1。
       表1  连翘药材水分、总灰分及浸出物含量测定结果（略）
       2.2  总黄酮含量的测定［2］
       2.2.1  对照品溶液的制备精密称取芦丁对照品10.200 0 mg，以甲醇溶解并定容于100 ml容量瓶中，配制成0.102 mg/ml的对照品溶液。
       2.2.2  供试品溶液的制备精密称取连翘药材粉末（过2号筛）适量，置于150 ml锥形瓶中，加20倍量甲醇，称重，在超声仪中超声提取30 min，称重，补足重量。离心，取上清液作供试品。
       2.2.3  显色剂的制备称取三氯化铝9 g置于烧杯中，加入适量甲醇，用玻璃棒不断搅拌，使之溶解，然后转移至100 ml容量瓶中，以甲醇定容至刻度，摇匀，即为5%三氯化铝甲醇溶液。
       2.2.4  标准曲线的绘制分别精密吸取该溶液0.5，1.0，1.5，2.0，2.5 ml，置10 ml容量瓶中，加入5%的三氯化铝甲醇溶液1 ml显色，定容。以甲醇为空白对照，于425 nm处测其吸光度。以A值为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，即C=0.046A-0.000 9，r=0.999 3，表明芦丁标准品在0.005 8～0.029 mg/ml浓度内呈现良好线性关系。
       2.2.5  含量测定  吸取供试品溶液适量，按“2.2.4”项下方法测定吸光度值，用标准曲线法求含量。结果见表2。
       表2  青翘和老翘的总黄酮含量（略）
       2.3  连翘苷含量测定
       2.3.1  色谱条件色谱柱：sunfire C18(150  mm×4.6 mm,5 μm)；流动相乙腈∶水∶醋酸=25∶75∶0.04；流速1.0 ml/min；检测波长277 nm；柱温：室温；外标峰面积法定量。
       2.3.2  对照品溶液的制备精密称取连翘苷对照品适量，加甲醇配制成0.086 mg/ml的溶液。
       2.3.3  供试品溶液的制备精密称取连翘适量(同时另取样按《中国药典》I部附录Ⅸ H第2法测定水分)，置于索氏提取器中，加20倍量甲醇，提取1 h，过滤，回收溶剂至干，残渣用甲醇定容，过0.45μm滤膜，作供试品溶液。
       2.3.4  标准曲线的绘制精密吸取对照品溶液，稀释成系列浓度的溶液，按“2.3.1”色谱条件，进样20 μl，测定峰面积，平行3次，以峰面积平均值对进样量进行线性拟合，得连翘苷的回归方程为Y = 1E+07X + 204 88，r=0.999   4。表明连翘苷进样量在0.43～3.44 μg时，线性关系良好。
       2.3.5  精密度实验取对照品溶液，连续进样5次，测定连翘苷峰面积RSD=1.09%。
       2.3.6  重现性实验分别精密称取5份样品，按“2.3.3”处理得样品溶液，进样分析，测得连翘苷峰面积的RSD=0.66%。
       2.3.7  稳定性实验取同一供试品溶液，分别在0.5，1，2，3 h测定，计算连翘苷峰面积RSD=0.68%，结果表明连翘苷峰面积在3 h内稳定。
       2.3.8  加样回收率实验取已知含量样品，精密称取5份，分别加入不同量的对照品，按“2.3.3”项制备样品溶液，测定含量，计算回收率，结果平均回收率98.04%，RSD=1.49%。
       2.3.9  含量测定吸取供试品溶液，进样20 μl，测定样品中连翘苷峰面积，外标法计算含量。结果见表3。
       表3  伏牛山青翘与老翘中连翘苷的含量测定（略）
       3  讨论
          
       由表1可知，青翘与老翘的水分符合《中国药典》（2005年版）不得过10.0%的规定；总灰分检测结果均不超过4.0%为合格，说明没有其他无机物污染和掺杂；酸不溶性灰分检测结果均未超过1.0%符合《中国药典》标准。
       
       总黄酮、连翘苷含量测定结果表明，青翘中总黄酮、连翘苷含量都高于老翘，且老翘中连翘苷含量低于《中国药典》标准。因此青翘和老翘应该进行区别使用。关于青翘与老翘的药效差异，有待通过药理进一步研究。
       
       通过本实验表明青翘与老翘水分、总灰分、酸不溶性灰分虽然都符合药典标准，但两者又有明显不同。从其主要成分总黄酮和连翘苷来看，青翘质量优于老翘，可能与连翘的采收时间和初加工有关，本实验为连翘的最佳采收期提供了参考。
       【参考文献】
         　　［1］ 国家药典委员会．中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2005：127.
       
       ［2］ 张 果，李发荣，段 飞，等.不同采收期连翘叶中连翘苷、连翘酯苷和芦丁的含量测定［J］.天然产物研究与开发，2005，17（6）：790.