三峡库区马尾松黄酮在不同生长周期含量变化研究
作者：方应权， 全哲山*
作者单位：重庆三峡医药高等专科学校，重庆 404020 ； 延边大学药学院，吉林 延吉 133000
《时珍国医国药》 2009年 第5期
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【摘要】
目的探索松针不同生长周期黄酮含量变化。方法分别采集从1～12月不同月份的松针并测定黄酮的含量。结果9月黄酮含量最高。结论松针黄酮的含量随生长周期变化，整体上呈正态分布，可能与光照时间和强度有关。
【关键词】 松针黄酮 正态分布 生长周期
马尾松P. massoniana垂直分布在长江下游海拔700 m以下,长江中游1 100～1 200 m以下，西部1 500 m以下。近年来我国有专家为心脑血管病患者提供了一种全新的保健方法：用松针煮茶喝。松针的提取物富含天然水溶性生物黄酮浓缩物，是一种强抗氧化剂，能有效清除自由基。我国药典古籍中也有松针保健治病功效的诸多记载，李时珍的《本草纲目》中说松叶“可入药、疗疾”，《神农本草经》中将有助长寿的松针列为“上药”。现在，在美国、法国、西班牙等国，松针及松树的药用更为广泛。黄酮为植物次生性代谢产物，不只存在于花器官，也存于绿叶中，由于黄酮物质积累在叶和茎的表皮层，吸收紫外线,因此避免了细胞受到强烈UV的伤害，黄酮物质允许可见光通过，不影响光合作用进行。而黄酮的含量高低受光合作用影响。本文测定三峡库区马尾松黄酮含量及变化规律，为中药松针的开发利用提供理论依据。
1 材料
755B紫外分光光度计；松针采自长江三峡库区；芸香苷标准品（中国生物制品检验所）；所用试剂均为分析纯。
2 方法
2.1 采样取三峡库区铁峰山资源保护区海拔100～2 000 m松树松针。100，500，1 000，1 500，2 000 m的阳坡和阴坡的固定的五棵松树作为采样点。每月15号进行采样，采样后将10个样点样品混合均匀。
2.2 松针叶中黄酮类物质含量的测定方法黄酮类物质提取和测定方法是参照刘江等［1］过滤法测定松针黄酮的含量，具体方法如下。
2.2.1 标准回归方程的建立精密称取芸香苷一定量，以60％乙醇溶解并稀释成每毫升60 μg的浓度。精密量取0.5～5.0 ml不同量溶液，分别用60％乙醇稀释至5 ml，准确加入0.3 ml 5%NaNO2 溶液, 摇匀，放置6 min 再加Al(NO3)3 0.3 ml摇匀，放置6 min，加入1 mol/L NaOH 4 ml后放置20 min过滤，用水稀释至刻度。在755B型分光光度计415 nm处测定吸收度并建立标准回归方程为Y =-1.77+97.48 X (r=0.989 7)。
2.2.2 含量测定精密称取经烘至恒重松针粉（60目）0.5 g于100 ml的三角瓶中加入5 ml 60％乙醇，将三角瓶和内容物一起称重（称至0.1 g），然后在90 ℃水浴中回流1 h，冷却后再称重，并补充溶剂至原重，经滤纸过滤后，取2.5 ml滤液至试管中，并加入2.5 ml蒸馏水稀释至5 ml。而后按照测定芸香苷标准物方法在755B型分光光度计415 nm处测定吸收度，以同一滤液同样量加水至13 ml为对照，根据标准方程计算出黄酮含量。见表1～2。
表1 不同浓度芸香苷溶液的吸收度（略）
表2 不同月份松针黄酮含量（略）
n=10
3 结果与分析
对三峡库区松针黄酮的测定发现，从1月到9月呈上升趋势，9月到12月呈下降趋势。总体上呈正态分布。主要是由于黄酮为植物次生性代谢产物，黄酮类化合物代谢的关键酶-苯丙氨酸解氨酶是一种光诱导酶，在光的存在下，酶的活性迅速提高，促进苯丙氨酸转化为肉桂酸，而肉桂酸是黄酮和次级代谢物质的前体。苯丙氨酸解氨酶作为次生代谢类物质黄酮合成的关键酶,其活性随光照强度的下降而下降,两者之间相关性显著［2，3］。
三峡库区松针黄酮含量分布趋势于其处于特殊的地理环境有关，三峡库区夏秋两季日照强烈，苯丙氨酸解氨酶活性被迅速提高，有利于松针黄酮的合成。而春冬两季多雾，日照时间短，苯丙氨酸解氨酶活性降低，不利于松针黄酮的生物合成。
4 结论
综上所述，三峡库区松针黄酮的含量与其生长周期有关，可能与光照时间、强度有关。
【参考文献】
［1］ 刘 江，周荣琪.竹叶提取物总黄酮含量测定方法改进［J］.食品科技，2005，78（7）：65.
［2］ 冷平生，苏淑钗.银杏黄酮苷和萜类内酯含量的季节变化 ［J］.植物资源与环境学报，2001，10（3）：15.
［3］ 苏淑钗， 蒋湘宁.光强与光质对银杏光合作用及黄酮苷与萜类内酯含量的影响 ［J］.植物资源与环境学报，2002，11（1）：1.