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心复康口服液对心梗后心衰大鼠心肌三磷酸腺苷含量的影响
作者:胡元会, 吴华芹,马铁民,陈双厚,刘瑞华,张百舜,程慧平,褚瑜光, 房玉涛,石洁,何建成,曹雪滨    
作者单位:中国中医科学院广安门医院,北京 100053; 北京大学医学部基础医学院,北京 100029;上海中医药大学基础医学院,上海 201203; 中国人民解放军二五二医院,河北 保定 071000

《时珍国医国药》 2009年 第5期

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       【摘要】 
       目的观察心复康口服液对心梗后心衰大鼠梗塞周围心肌中三磷酸腺苷(ATP)含量的影响。方法采用结扎SD大鼠左冠状动脉前降支致心梗后心衰大鼠模型,用心复康口服液于术后24 h灌胃给药,以卡托普利作为阳性对照药。给药2,4,6,8周,观察大鼠梗死周围心肌ATP含量。结果与模型组比较,心复康口服液和卡托普利组皆明显增加梗死周围心肌中ATP含量(P<0.01)。结论心复康口服液可升高梗死周围心肌组织中ATP含量从而改善心梗后心衰大鼠心肌能量代谢。
       【关键词】  心复康口服液 高能磷酸化合物 心力衰竭 大鼠
       Effect of XinFuKang Oral Liquid on the Content of ATP in Cardiac Tissue of Heart Failure Rats after  Myocardial  Infarction
       HU Yuanhui,WU Huaqin,MA Tiemin,CHEN Shuanghou,LIU Ruihua,ZHANG Baishun,CHENG Huiping,CHU Yuguang,FANG Yutao,SHI Jie,HE Jiancheng,CAO Xuebin
       (Guang"an"men Hospital ,China Academy of Chinese Medical Sciences,Beijing 100053, China;Department of Pathophysiology, School of Basic Medical Sciences, Beijing University,Beijing 100029, China;Academy of Basic Medical Sciences, Shanghai University of TCM,Shanghai 201203, China;Department of Cardiology 252 Hospital of PLA,Baoding, 071000, China)
       Abstract:ObjectiveTo observe the effect of Xinfukang(XFK) Oral Liquid on the content of ATP in cardiac tissue of heart failure myocardial infarction.MethodsThe AMI model was established by ligating left anterial descending coronary artery . 24 h later, the rats were fed XFK Oral Liquid by oral garage. Captopril served as control. After 2,4,6,8 weeks treatment, the content of ATP was determined. ResultsCompared with model group, the content of  ATP was obviously increased in XFK Oral Liquid group and captopril group(P<0.01).ConclusionXFK Oral Liquid can inhibit the obstacle of energy metabolism by increasing the content of ATP.
       Key words:XFK Oral Liquid;   Energy-rich phosphate;  Heart failure;  Rats
       
       心肌缺血时,心肌细胞氧供与氧耗失衡,产生心肌能量代谢障碍,是心力衰竭进展的一个重要因素,优化心肌能量代谢重塑成为目前治疗心力衰竭的新策略[1]。心复康口服液是我们临床治疗心力衰竭的经验方,临床和实验研究均证实该药可保护缺血心肌,改善心脏功能[2,3]。本实验旨在观察心复康口服液对心肌组织高能磷酸化合物的影响,以进一步探讨中药抗心衰的机制。
       1  仪器与材料
       1.1  仪器TA1003型精密电子天平(上海天平仪器厂);采用岛津LC-10A型高效液相仪,包括CBM-10主机、SPD-10A UV-VIS双波长分光光度计、LC-10AD双泵、DGU脱气机。
       1.2  试剂与药物心复康口服液(xinfukang oral liquid,XFK)成分主要由黄芪、人参、丹参、灵芝、红花等组成。Captopril(中美上海施贵宝制药有限公司,批号:0304033)。ATP标准品(Sigma公司)。
       1.3  动物正常雄性SD大鼠,体重230~260 g,60只,北京维通利华实验动物中心提供。
       2  方法
       2.1  动物模型复制SD大鼠以2.0%戊巴比妥液(40 mg/kg)腹腔内注射麻醉,仰卧位固定于大鼠台上,胸部手术视野区常规备皮、消毒,于心尖搏动最强处稍上(第4、5肋间)与胸骨平行处作长约2cm的切口,钝性分离胸大肌,左手持钝头无齿弯钳紧靠胸骨左缘插入肋间肌,在扩大胸腔切口的同时,左手配合挤压胸部,将心脏挤出胸腔外,迅速以左手拇、食指固定心尖,剪开心包膜,在LAD起始点下约2~3 mm处结扎左冠状动脉前降支,以标准肢体导联2(纸速50 mm/s)心电图ST段弓背抬高为AMI形成。然后将心脏恢复到胸腔,挤出胸腔内空气,缝合皮肤,局部消毒。
       2.2  实验动物分组动物喂养标准合成饲料,适应性喂养3 d,禁食12 h后,体重均衡,随机分为两组。假手术组(Sham)12只和造模组48只;造模组大鼠按动物模型复制方法所述方法造模,造模成功大鼠复苏后24 h,再随机分为模型组 (Model)、Captopril组(Captopril)、XFK大剂量组、XFK小剂量组共4组。Sham组按动物模型复制方法所述方法手术,但仅在相同部位穿线并不结扎,余步骤与手术组相同。各组大鼠术后24 h开始灌胃给药。
       2.3  实验动物给药方法①Sham组、Model组:生理盐水4.0 ml·kg-1灌胃,1次/d;②Captopril组:Captopril 100 mg·kg-1灌胃,1次/d;③XFK大剂量组: XFK 5.4 g·kg-1灌胃,1次/d。③XFK小剂量组: XFK 2.7 g·kg-1灌胃,1次/d。各组大鼠于给药后2,4,6,8周末取材。
       2.4  高效液相方法测定心肌组织ATP方法
       2.4.1  样品制备灌胃2,4,6,8周末,每只大鼠取心肌组织100 mg,电子天平准确称量100 mg心肌组织,加入0.42 mol/L高氯酸600 μl匀浆,3 000 r/min低温(4℃)离心5 min,取上清液200 μl加入0.1    mol/L KOH,调pH为6.24,混匀器混匀,低温(4℃)离心15 min,取上清液100 μl待测。
       2.4.2  色谱条件色谱柱:Shim-Pack CLC-ODS No.61519959B;流动相:220 mmol/L磷酸钾盐缓冲液,内含10%甲醇,用四丁基氢氧化胺调pH至6.5,所有样品和标准样品在进样前均用0.45 μm孔径的滤膜过滤后进样20 μl。检测流速0.8 ml/min,检测波长254 nm。
       2.5  统计学处理实验数据用±s表示,采用SPSS10.0分析软件。
       3  结果
       
   
       XFK对CHF大鼠左室心肌ATP含量的影响:与假手术组比较,模型组大鼠左心室心肌ATP水平降低,在2,4,6,8周末,统计学有极显著性意义(P<0.01);与假手术组比较,Captopril组、XFK大剂量组大鼠左心室心肌ATP水平降低,在第2,4周末,统计学有极显著性意义(P<0.01),在第6周末,统计学有显著性意义(P<0.05),在第8周末,统计学无显著性意义(P>0.05);与假手术组比较,XFK小剂量组大鼠左心室心肌ATP水平降低,在第2,4,6周末,统计学有极显著性意义(P<0.01);在第8周末,统计学有显著性意义(P<0.05)。与模型组比较,Captopril组、XFK大、小剂量组大鼠大鼠左心室心肌ATP水平提高,在第2周末,统计学有显著性意义(P<0.05),在第4,6,8周末,统计学有极显著性意义(P<0.01)。与Captopril组比较,XFK大、小剂量大鼠左心室心肌ATP水平变化,在第2,4,6,8周末,统计学均无显著性差异(P>0.05) 。XFK大、小剂量组之间比较,大鼠左心室心肌ATP水平变化,在第2,4,6,8周末,亦均无统计学意义 (P>0.05) 。结果见表1。
       表1  XFK对CHF心衰大鼠左室心肌ATP含量的影响(略)
       与假手术组比较,*P<0.05,**P<0.01; 与模型组比较,△P<0.05,△△P<0.01;n=12
       4  讨论
       
       
  中药心复康口服液为治疗气虚血瘀型心衰的经验方,临床研究提示本方具有改善患者临床症状和心功能、提高病人生活质量的作用[3~5]。
       
       ATP是心肌细胞可直接利用的能源物质,是维持心肌正常功能和结构完整性的重要保障。心肌细胞持续、节律性收缩和舒张,必须有源源不断的ATP为其活动提供能量。在心力衰竭发生时,由于心肌缺血缺氧,心肌细胞迅速从有氧代谢转为无氧糖酵解,而后者产生ATP的能力只有前者的1/18,ATP不能及时合成,最终导致ATP含量减少或耗竭,能量供应的减少,势必影响心肌舒缩功能。本项研究结果提示心梗后心衰大鼠模型心肌组织ATP含量明显降低,与既往报道研究结果一致[6,7] 。 Captopril组心衰大鼠心肌组织ATP含量降低有所减轻,说明Captopril在改善心梗后心衰大鼠心功能的同时,可有效改善心肌能量代谢,这与既往报道一致[8]。有研究提示益气活血中药心复康口服液可改善心衰大鼠线粒体膜通透性,提高心衰大鼠心肌细胞线粒体琥珀酸脱氢酶的含量,改善心肌细胞线粒体能量代谢[9,10]。本研究结果显示,益气活血中药心复康口服液大、小剂量组均可提高心梗后心衰大鼠心肌ATP含量,有效保护心肌磷酸化过程,改善心梗后心衰心肌能量代谢。
       【参考文献】
           [1] 宋 涛,李臣文,赵文秀,等.心肌缺血的能量代谢及代谢药物治疗[J].实用心脑肺血管病杂志,2006,14(10):766.
       
       [2] 曹雪滨,李培建,黄河玲,等.心复康口服液对大鼠实验性心肌缺血的保护作用[J].中国药科大学学报,1998,29(增刊):196.
       
       [3] 胡元会,曹雪滨,曹贵民,等.中药心复康治疗气虚血瘀型充血性心力衰竭33例疗效观察[J].浙江中医学院学报,2000,24(4):40.
       
       [4] 曹雪滨,沐贤友,陈德玲,等.心复康口服液治疗充血性心力衰竭31例[J].浙江中医杂志,1998,33(7):332.
       
       [5] 曹雪滨,沐贤友,陈德玲,等.心复康口服液治疗充血性心力衰竭的临床研究[J].临床荟萃,1998,13(14):7980.
       
       [6] 李耀平,柳延春,尹新华,等.IGF-I对ISP损伤大鼠心肌ATP、ADP、AMP变化影响的实验研究[J].中国地方病杂志,2000,19(1):32.
       
       [7] 单 飞、蔡振杰、张卫达,等.应用31P磁共振波谱对心肌梗死后能量代谢变化的评价[J].中国急救医学,2002,22(11):636.
       
       [8] 苏晓华,姜晓姝,王孝铭,等.Captopril 对缺血再灌注心肌线粒体电子质子耦联和氧化磷酸化的影响[J].中国病理生理杂志,1996,12(3):316.
       
       [9] 胡元会,曹雪滨,车维新,等. 心复康口服液对大鼠实验心衰模型心肌细胞Ca2+-ATPase及琥珀酸脱氢酶活性的影响[J].中国医药学报,2000,2(15):31.
       
       [10] 胡元会,曹雪滨,曹贵民,等. 心复康口服液对实验心衰模型大鼠心肌细胞自由基代谢和膜通透性的影响[J].中国中医基础医学杂志,2000,2(6):16.

经典中医古籍

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穴位数据库(附图片)