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       【摘要】 
       目的考察参环毛蚓对土壤含水量、pH值二因子的选择性，建立其生活所需要的土壤含水量、pH值单因子数学模型。方法在养殖槽内设置不同土壤含水量、pH值区域，由参环毛蚓选择适宜的生活区域。结果参环毛蚓生活适宜的土壤含水量为18.2%～24.6%， pH值为3.7～5.5。结论参环毛蚓选择在湿度适中，偏酸性的土壤中生活；高湿及较干燥，强酸性和碱性的土壤不适宜其生活。
       【关键词】  参环毛蚓 含水量 pH值
       Reseach on the Selection of Pheretima aspergillum for Water Content and pH Value
       YU Liangwen, QIU Jianshe, LI Wei, LAI Xiaoping, HE Peiyong
       1. Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510405, China; 2.Guangdong Boluo Pioneer Pharmaceutical Group Ltd, Boluo 516100, China
       Abstract：ObjectiveTo explore the optimum reproductive condition and artificial breeding method for Pheretima aspergillum.MethodsPheretima aspergillum was set as the experimental animal,and the selection of different water content, acidity or alkalinity gradients was performed in the present study. ResultsThe results indicated that the appropriate conditions for Pheretima aspergillum was water content 18.2%～24.6 %, pH value 3.7～5.5.ConclusionPheretima aspergillum is suitable to the acidic soil habitat, high water content and dry soil are unsuitable for their lives.
       Key words：Pheretima aspergillum;  Water content;  Acidity or alkalinity gradients
       参环毛蚓Pheretima aspergillum （E. Perrier）属钜蚓科动物，药材习称“广地龙”，为《中国药典》收载的地龙药材4个来源中的优质种，也是著名的广东道地药材。广地龙药材来源目前主要依靠野生资源，野生的广地龙重金属易超标，药材质量难以控制，且药材资源日益短缺，价格节节攀升。对参环毛蚓开展生物学特性和规范化人工养殖研究对保证药材质量和供应具有重要意义。本研究考察参环毛蚓生活对土壤含水量、pH值单因子的选择性，建立参环毛蚓生活所需要的土壤含水量、pH值单因子数学模型，为规范化人工养殖奠定研究基础。
       1  材料与仪器
       1.1  动物参环毛蚓采自广东省从化市太平镇屈洞村，经广州中医药大学李薇教授鉴定为钜蚓科动物参环毛蚓Pheretima aspergillum （E. Perrier） 。选取成体，体形健壮、活力较强，具明显生殖带痕的参环毛蚓作为实验样本。
       1.2 试药与仪器蒸馏水，实验室制备，经测定pH值为6.55；KOH，HCl，KCl，CaCl2均为分析纯；细沙壤土，采自实验所用参环毛蚓的原生长地，经测定，含水量为15.4%，pH值为4.40。
       养殖槽，为自制木槽，长1 m，宽1 m，高0.3 m；雷磁PHS-25 pH计，上海精密科学仪器有限公司产品；202B-0型电热恒温烘箱，萧山永发电器有限公司产品。
       2 方法与结果
       2.1 实验装置养殖槽：分成等大的9个区域，每个区域间用木板隔开，木板可以自由抽出。在各区域设置土壤含水量、pH值梯度，考察参环毛蚓对含水量、pH值单因子的选择性。
       2.2 实验方法每个区域放6 kg土壤，设定pH值和含水量梯度。每个区域放入8条参环毛蚓，在钻入土壤后抽开木板，让其自由选择适宜的土壤条件。保持室内的空气流通。48 h后，计算各区域参环毛蚓条数。各组做3次平行实验。
       
       pH值测定参照国家林业局《森林土壤pH值的测定》（LY/T1239-1999），含水量测定参照国家林业局《森林土壤含水量的测定》（LY/T1213-1999）。
       2.3 数据分析采用SPSS13.0软件进行统计分析。
       2.4 实验结果
       2.4.1  参环毛蚓对土壤含水量的选择研究加入蒸馏水调节土壤含水量，设7个含水量梯度。含水量取3次实验的平均值，各区域参环毛蚓数量取3次平行实验条数之和。因实验模拟自然条件养殖，故未对养殖槽密闭，部分参环毛蚓爬出槽逃逸。结果见表1。表1  参环毛蚓对土壤含水量的选择研究（略）
       对表1数据进行曲线回归分析，得到回归方程①：Y=-171.360＋18.206X－0.425 X2，F=12.196，P=0.019，R2=0.859。方程曲线见图1。
       
       参环毛蚓生活的最佳土壤含水量为21.1%（图1曲线峰值），设曲线峰值处参环毛蚓条数的80%（取整数为19条）所对应的含水量区域为适宜参环毛蚓生活的含水量区域，则由回归方程①得该区域土壤含水量为18.2%～24.6 %，即图1虚线所对应的含水量区域。
       2.4.2 参环毛蚓对土壤pH值的选择研究用稀KOH溶液和稀HCl溶液调节土壤酸碱度，设6个pH梯度。pH值取3次实验的平均值，各区域参环毛蚓数量取3次平行实验条数之和。同“2.4.1”项，部分参环毛蚓爬出槽逃逸。结果见表2。表2 参环毛蚓对土壤pH的选择研究（略）
       3组平行实验养殖槽内参环毛蚓逃逸共19条；n=3
       对表2数据进行曲线回归分析，得到回归方程②：Y=－350.003＋214.770X－37.304 X2＋1.998 X3，F=17.665，P=0.054，R2=0.964。方程曲线见图2。
       
       参环毛蚓生活的最佳土壤pH值为4.5（图2曲线峰值），设曲线峰值处参环毛蚓条数的80%（取整数为35条）所对应的pH值区域为适宜参环毛蚓生活的pH值区域，则由回归方程②得该区域土壤pH值为3.7～5.5，即图2虚线所对应的pH值区域。
       3 讨论
       参环毛蚓适宜的土壤含水量为18.2%～24.6%，趋向于生活在偏潮湿的土壤中。含水量对参环毛蚓活动的影响并不是直线型的，较少参环毛蚓选择在干燥或过于潮湿的土壤中生活。实验所测得适宜的土壤含水量与文献所述的含水量35%～40%不一致［1］。这可能与土壤的质地有关，参考文献中并没提及所测含水量土壤的质地。而不同质地土壤对水的吸附性差异较大，沙土在含水量为20 %时，已呈糊状，壤土在含水量30 %时也能握之成团，揉之即散。本实验所用土壤为采自参环毛蚓原生长地的细沙壤土，在含水量为20 %左右时，能握之成团，揉之即散。
       参环毛蚓对土壤pH值的高低较敏感，但pH值对参环毛蚓活动的影响也并不是直线型的。在预实验中发现，强酸性土壤（pH≤2.0）和碱性土壤（pH≥8.6）对参环毛蚓的伤害较大。强酸性和碱性两组中参环毛蚓均出现了死亡，死亡率：强酸性组＞碱性组。本实验所采集的参环毛蚓适宜的pH值在3.7～5.5之间，与文献报道的地龙适宜的pH值区间为6.0～8.0不一致［2，3］，这可能与蝗蚓的种属差异有关。同样，实验所用的参环毛蚓对原来土壤的适应性，即参环毛蚓种内区域差异性，也可能存在。不同地区的参环毛蚓生长对pH值的要求是否存在差异性，有待于进一步研究。
       土壤含水量、pH值是重要的环境因子，对参环毛蚓的生长、繁殖有重要影响。就单因子而言，极端的含水量、pH值对参环毛蚓都是有害的。
       本研究采用参环毛蚓自主选择适合土壤生活的方法，与常用的通过重量差异法考察环境因素对动物生长的影响相比，有以下优点：①由于重量差异与个体差异同时存在，加之参环毛蚓称重时个体自身常附带泥土，均会影响研究结果的准确性；自主选择环境的方法更能反映动物对环境需求的真实情况，研究结果误差小。②重量差异法由于动物生长周期较长，一般研究时间也较长；自主选择环境的实验方法操作简单，周期短。本研究方法对其它动物的研究也具有一定的借鉴意义。
       【参考文献】
         　　［1］陆善旦．参环毛蚓养殖方法［J］．农家之友，2004，7：42.
       
       ［2］于智勇，魏万红，薛庆於，等．环境因素对秉氏环毛蚓繁殖的影响［J］．南京师大学报，2007，30(3)：107.
       
       ［3］王光亮．药用动物养殖技术［M］.北京：中国中医药出版社，2006：59.