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       【摘要】 
       目的探讨枸杞果柄水煎剂对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影响。方法制备四氧嘧啶糖尿病小鼠模型，将其分为降糖灵治疗组、低剂量枸杞果柄治疗组、高剂量枸杞果柄治疗组、模型对照组，另设正常对照组（非糖尿病小鼠）。前3组小鼠分别以25 mg·kg-1·d-1降糖灵水溶液、5.0 g·kg-1·d-1枸杞果柄水煎剂、7.5 g·kg-1·d-1枸杞果柄水煎剂灌胃，后2组小鼠均灌服等量的生理盐水。14 d后测定小鼠空腹血糖。结果给药14 d后降糖灵治疗组、低剂量枸杞果柄治疗组小鼠血糖较治疗前有极显著下降(P<0.01)，高剂量枸杞果柄治疗组小鼠血糖较治疗前有显著下降(P<0.05)；降糖灵治疗组、不同剂量枸杞果柄治疗组血糖降低平均值与模型对照组、正常对照组血糖变化平均值之间均存在极显著差异(P<0.01)。结论一定剂量的枸杞果柄水煎剂对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖有降低作用。
       【关键词】  枸杞果柄； 糖尿病小鼠；降血糖
       Effect of  Fruit Pedicels of Lycium barbarum L. on Blood Glucose in Alloxan Induced Diabetic Mice
       YANG Juan, CHEN Wei, WEI Zhiqing
       1.School of Life Science, Ningxia University, Yinchuan 750021, China; 2.Ningxia Inspection and Quarantine Bureau, Yinchuan 750001, China
       Abstract:ObjectiveTo investigate the effect of fruit pedicels of Lycium barbarum L. decoction on blood glucose in alloxan-induced diabetic mice.MethodsAlloxan-induced diabetes mellitus mice were fed with either 25 mg·kg-1·d-1 Jiangtangling, a clinic medicine for diabetes, or different concentrations of decocta of fruit pedicels of Lycium barbarum L. (low dosage: 5.0 g·kg-1·d-1 or high dosage: 7.5 g·kg-1·d-1. For controls, both Alloxan-induced diabetic mice or normal mice were fed with equal amount of saline. The blood glucose level of all five group mice was measured 14 d after treatment. Mice were fasted before blood samples were obtained. ResultsBoth Jiangtangling and low dose of fruit pedicels of Lycium barbarum L. could significantly decrease mouse blood sugar compared to pretreatment (P<0.01), so did high dose decota of fruit pedicels of Lycium barbarum L. (P<0.05). Both Jiangtangling and different doses of fruit pedicels of Lycium barbarum L. could significantly reduce blood glucose levels as compared to model group or normal group (P<0.01). ConclusionThe decoction of fruit pedicels of Lycium barbarum L. can reduce blood glucose level in alloxan-induced diabetic mice.
       Key words:Fruit pedicels of Lycium barbarum L.;  Diabetic Mice;  Hypoglycemic
       
       宁夏枸杞Lycium barbarum L.是一种常用的补益类中药。现代医学研究证明，枸杞具有抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、抗脂肪肝、降血脂、增强机体免疫作用等多种功能［1］。枸杞药用部位主要包括枸杞果实（即枸杞子，通常简称枸杞）、枸杞根皮（地骨皮）、枸杞果柄（带宿萼的果梗）、枸杞叶等部分。
        田丽梅等［2］研究报道，中药枸杞能明显降低糖尿病小鼠的血糖(P<0.01)，对血清胰岛素水平有提高的趋势。王玲等［3］研究表明枸杞多糖（LBP-D）对糖尿病小鼠的胰岛β细胞可能有保护作用，并对四氧嘧啶糖尿病小鼠有治疗效应。地骨皮为常用中药，具有凉血、除热、清肺降火的功效。现代药理研究表明，地骨皮提取物有解热、降压、降血糖及抗微生物等作用。方志伟等［4］研究证实，地骨皮可显著降低四氧嘧啶所致糖尿病大鼠血糖值，对正常大鼠的血糖也有一定的降低作用。地骨皮还可提高糖尿病大鼠的血清胰岛素及肝脏糖元的含量，表明地骨皮具有改善胰岛功能、促进肝糖元合成的作用，对糖尿病及其并发症防治有益。
        枸杞叶俗称天精草,是一味重要的中药材,具有补虚益精、清热止渴、养肝明目之功效。有学者关于枸杞叶活性成分、营养成分和常微量元素的含量明显优于枸杞果实的报道［5］,一直未能引起人们的关注。枸杞果柄所含的营养成分和氨基酸含量与枸杞叶相当，而枸杞果柄的相关研究则更少。有关枸杞叶降血糖的研究，国内仅见的报道认为枸杞叶蛋白具有降血糖作用［6］。枸杞果柄在内蒙古自治区等地被作为糖尿病人的保健品使用，但未见相关研究报道。
        因此进一步开展枸杞果柄降血糖作用及其有效成分的研究，对于宁夏枸杞传统非药用部位的开发利用具有重要的理论及实践意义。
       1  材料与仪器
       1.1  药物与试剂
       四氧嘧啶（Alloxan，ALX），美国sigma公司产品。枸杞果柄，采自内蒙古自治区乌拉特前旗白彦花镇。将烘干的枸杞果柄50 g加水1 000 ml煎煮1h，过滤；药渣再加水500 ml煎煮0.5 h，过滤。合并滤液，用旋转蒸发仪减压浓缩至100 ml，使枸杞果柄生药浓度为0.5 g/ml。制得的枸杞果柄水煎剂置于冰箱中备用。苯乙双胍（phenformin），又名降糖灵，南通制药厂出品，批号070107。将苯乙双胍片研碎，以煮沸过的蒸馏水溶解，配制成5 mg/ml的水溶液置于冰箱中备用。
       1.2 动物
       昆明种雄性小鼠及饲料均由宁夏医学院实验动物中心提供，在实验室暂养1周后开始实验。小鼠初始体重为（22±5）g。
       1.3 仪器
       血糖仪及血糖试条，均为北京怡成生物电子技术有限公司产品。
       2 方法
       2.1 四氧嘧啶糖尿病小鼠模型的建立小鼠禁食（不禁水）12 h后，尾静脉注射新配制的5％四氧嘧啶溶液(80 mg/kg)，恢复进食；于48 h后再禁食（不禁水）12 h，断尾取血，用血糖仪测定血糖值。测定结果大于11.1 mmol/L的小鼠为合格的四氧嘧啶糖尿病小鼠模型。动物出现明显的多饮、多食、多尿症状为标准，确认模型，未达标动物不纳入实验。将糖尿病小鼠按空腹血糖水平高低进行随机分组，同时兼顾各组动物体重均值尽量接近。另设1组体重相近的非糖尿病小鼠，作为以上各组糖尿病小鼠的对照组（正常对照组），同时测定其血糖值。
       2.2 分组及处理方法选取合格的四氧嘧啶糖尿病小鼠分为4组，分别以生理盐水、降糖灵水溶液〔25 mg/（kg·d)〕、枸杞果柄水煎剂〔5.0 g/(kg·d)和7.5 g/(kg·d)〕灌胃，正常对照组以等量生理盐水灌胃。5组小鼠每日上午8点到10点灌胃1次。每天观察小鼠进食、饮水、活动行为等变化，并记录死亡情况，每周测量1次体重。连续灌胃14 d，在末次给药后禁食12 h，断尾取血，用血糖仪测定血糖。
       2.3 统计分析实验数据用 ±s表示，给药前后各组间血糖值比较采用t检验，P<0.05为差异显著，P<0.01为差异极显著。给药后各组间血糖降低值采用多重比较用最小显著差数法（LSD法）进行方差分析，同一列数字右侧小写字母相同者表示差异不显著(P>0.05),不同者表示差异显著(P<0.05)；同一列数字右侧大写字母相同者表示差异达不到极显著(P>0.01),不同者表示差异极显著(P<0.01)。
       3  结果
       3.1  实验小鼠的行为变化
       小鼠尾静脉注射四氧嘧啶后，由于体内代谢紊乱，致使部分小鼠死亡（见表1）。给药后降糖灵治疗组、枸杞果柄治疗组小鼠死亡数低于模型对照组，说明降糖灵、枸杞果柄在降血糖的同时提高了动物的生存率。实验期除正常对照组小鼠外，其余各组小鼠均出现明显的多饮、多食、多尿、消瘦，即“三多一少”的症状，活动减少、精神萎靡等症状。到实验末，除模型对照组外，降糖灵治疗组和两个枸杞果柄治疗组糖尿病小鼠症状明显好转，个别小鼠上述症状消失。表1   实验小鼠死亡数与降糖率统计（略）
       3.2 枸杞果柄对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影响
       由表2可知，给药前各四氧嘧啶糖尿病小鼠模型的血糖均大于11.1 mmol/L，为合格的糖尿病小鼠模型，给药前各组糖尿病小鼠间的血糖差异不显著，但与正常对照组相比差异极显著(P<0.01)。给药后，低、高剂量枸杞果柄治疗组除与降糖灵治疗组血糖降低值之间无显著差异外，与模型对照组、正常对照组血糖变化值之间达到极显著差异。可见低、高剂量枸杞果柄均有降低四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的作用，且与降糖灵有相同的降糖效果。表2  枸杞果柄对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影响（略）
        经t检验，给药前各组糖尿病小鼠间的血糖差异不显著，但与正常对照组相比差异极显著(P<0.01)；“*”代表给药前后的血糖达到显著水平（P<0.05），“**”代表给药前后的血糖达到极显著水平(P<0.01)
       4 讨论
       
       本实验结果来看，低剂量枸杞果柄治疗组和降糖灵治疗组小鼠给药前后血糖值有极显著差异（P<0.01），高剂量枸杞果柄治疗组给药前后有显著差(P<0.05)。血糖降低率分别为55.5%，53.32%，45.77%,可见一定剂量枸杞果柄水煎剂有明显降低四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的作用。而两组枸杞果柄治疗组与降糖灵治疗组小鼠血糖降低值比较无显著差异（P>0.05），说明一定剂量枸杞果柄水煎剂降低血糖作用与降糖灵的降糖效果相似。
       
       目前发现的植物天然降血糖成分主要包括黄酮、生物碱、皂苷、鞣质、多糖、萜、蛋白质与氨基酸、不饱和脂肪酸、硫键化合物、苯丙素酚和其它化合物等十一大类［7］，但这些成分在不同植物体内有着不同的种类。现有较多的研究已经认为枸杞子、地骨皮可以降血糖，枸杞子降血糖的有效成分主要有枸杞多糖等［2］。周晶等［8］研究表明地骨皮降低实验性小鼠血糖的有效部位是水溶性小分子。李康等［9］以实验为基础，认为地骨皮降血糖的有效组分是酸性组分。杨涓等［10，11］测定了枸杞子、地骨皮均含有牛磺酸，已有大量研究证明牛磺酸可以降血糖［12］，但牛磺酸是不是枸杞子、地骨皮降血糖的有效成分之一至今未见报道。本实验结果表明枸杞果柄水煎剂的降糖效果已经达到了目前临床治疗糖尿病所使用的降糖西药降糖灵的降糖效果。就枸杞果柄中已有测定成分来看［6］，有生物碱、类脂及香豆精、酚类、有机酸、黄酮、蛋白质及氨基酸等，可见枸杞果柄并不含有已知的枸杞降血糖的有效成分。枸杞果柄作为枸杞叶和根向果实输送营养物质以及果实中合成的物质向植物体运输的通道，推测枸杞果柄中可能也含有牛磺酸，那么牛磺酸就可能是枸杞果柄降血糖成分之一。
       
       黄酮类主要影响胰岛β细胞功能，作用缓慢而持久。有报道从芥菜中分离得到黄酮类化合物异鼠李素二葡萄糖苷，其降血糖机制与异鼠李素二葡萄糖苷的体内抗氧化活性有关［13］。 荞麦种子［14］ 、广西藤茶［15］、桑叶［16］中的总黄酮都对高血糖小鼠也有明显的降血糖作用。宁夏枸杞叶黄酮类化合物含量高于其果实［17］，推测黄酮类化合物可能是枸杞叶、果柄降血糖的有效成分之一。
        对几乎作为废弃物的枸杞果柄资源的开发研究具有深刻的意义。本实验仅证实一定剂量枸杞果柄具有降血糖的作用，但枸杞果柄降血糖作用的最佳浓度范围、降血糖的有效成分及其作用机制还有待于进一步研究。
       【参考文献】
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