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沿海滩涂甘紫菜挥发油成分分析及抗菌活性研究
作者:刘兴宽    
作者单位:江苏省滩涂生物资源与环境保护重点建设实验室,江苏盐城师范学院·生命科学与技术学院,江苏 盐城 224002

《时珍国医国药》 2009年 第7期

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       【摘要】 
       目的研究沿海滩涂甘紫菜挥发油成分及抗菌活性。方法采用水蒸气蒸馏法提取挥发油成分,用气相色谱-质谱联用仪进行分离和分析,用HP-586/66XM数据处理机库检索,用气相色谱峰面积归一化法测定各成分相对含量。结果从沿海滩涂甘紫菜挥发油中分离出43种成分,鉴定出28种,鉴定率为65.12%;抗菌活性研究表明,沿海滩涂甘紫菜挥发油对绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌均有明显抑制作用。结论从沿海滩涂甘紫菜挥发油中分离出43种成分,鉴定出28种,鉴定率为65.12%,主要成分是对甲氧基肉桂酸乙酯,含量为40.96%;其次是肉桂酸乙酯,含量为23.68%;挥发油对绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌均有明显抑制作用,对枯草杆菌和大肠杆菌无抑制作用。
       【关键词】  沿海滩涂甘紫菜;挥发油;气相色谱-质谱;抗菌活性
       紫菜含有丰富的蛋白质、碳水化合物、不饱和脂肪酸、维生素和矿物质,具有很高的营养价值。近年来的研究表明紫菜具有抗衰老、降血脂、抗肿瘤等多方面的生物活性。探讨紫菜的药用价值,从紫菜中开发出具有独特活性的海洋药物和保健食品,将是紫菜研究利用的新方向[1]。甘紫菜Porphyra tenera Kjellm.属红藻门红毛菜科,生于海湾中潮带岩石上,分布于渤海至东海,有大量栽培。主要供食用,入药有软坚散结、化痰利尿和降血脂作用[2]。为了寻找沿海滩涂甘紫菜活性成分,进一步开发利用沿海滩涂甘紫菜的药用价值,我们对沿海滩涂甘紫菜的挥发油成分及抗菌活性进行了研究,旨在为沿海滩涂甘紫菜的进一步研究与开发应用提供一定的科学依据。
       1  材料
        2007-08采自盐城射阳一紫菜种植户,经盐城师范学院生命科学与技术学院于延球教授鉴定为红藻门红毛菜科沿海滩涂甘紫菜Porphyra tenera Kjellm.。将新鲜藻体于日光下晒干,粉碎,称取0.5 kg于挥发油提取器中进行水蒸气蒸馏3 h,得淡黄色挥发油0.25 ml,得率为0.05%。
       2 方法
        精油不经任何处理,直接进行GC分析,气质分析采用HP6890GC,5973MS联用仪,GC/MS接口温度280℃,检索谱库为HP-586/66XM数据处理机库。
       2.1 GC条件色谱柱:HP-5MS(Crosslinked 5% Phenyl Methyl siloxane,30 m×0.25 mm×0.25 μm Film Thickness),柱温50~280℃;50~90℃,程序升温:4℃/min;90~280℃,程序升温:3℃/min。进样口温度:250℃;载气为氦气(纯度:99.999%),柱前压60 kPa,分流比40∶1,进样量1 μl,用峰面积归一化法计算各化合物的相对百分含量,同时应用分峰拟合技术(using Acq Method),确定未分离峰的化合物。
       2.2 MS条件EI离子源,电子能量70 eV,扫描范围10~550 amμ,四极杆温度150℃,离子源温度230℃,EM:1 388,质谱分辨率0.1 amμ,扫描速度1 s/dec,柱后压60 kPa。
       
       利用气质联用仪,所得的质谱数据进入HP-586/66XM数据处理机库(美国国家标准库Nbblibrary),用INCOS数据系统进行检索和质谱解析并与文献核对,对拟合指标和质谱数据进一步加以确认,鉴定了挥发油中28种化学成分,用峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量。
       2.3 滩涂甘紫菜挥发油的抗菌活性测试将沿海滩涂甘紫菜挥发油分别配成0.01%,0.1%,1%的无水乙醇溶液,以无水乙醇作对照,选择大肠杆菌、枯草杆菌、沙门氏菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌5种菌株为对象,作抗菌活性测试[3]。抑菌实验表明,沿海滩涂甘紫菜挥发油在实验提供的浓度范围内,对绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌均有明显抑制作用,0.1%,1%的浓度对沙门氏菌有明显抑制作用,对枯草杆菌和大肠杆菌无抑制作用。
       2.4 沿海滩涂甘紫菜成分分析鉴定对沿海滩涂甘紫菜挥发油的化学成分及各组分的相对百分含量研究。其分析鉴定结果见表1。表1  沿海滩涂甘紫菜挥发油化学成分及各成分相对百分含量(略)
       3 结论
        采用色谱和质谱分析方法,从沿海滩涂甘紫菜挥发油中鉴定出28种成分,已鉴定的成分含量占挥发油总成分的65.12%。含量最多的成分是对甲氧基肉桂酸乙酯,含量为40.96%;其次是肉桂酸乙酯,含量为23.68%。抗菌活性研究表明,沿海滩涂甘紫菜的干燥藻体挥发油对绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌均有明显抑制作用,对枯草杆菌和大肠杆菌无抑制作用。
       【参考文献】
           [1]张全斌,赵婷婷,綦慧敏,等.紫菜的营养价值研究概况[J].海洋科学,2005,29(2):69.
       
       [2]郑汉臣.药用植物学[M].北京:人民卫生出版社,1999:120.
       
       [3]周邦靖.常用中药的抗菌作用及其测定方法[M].重庆:科学技术文献出版社重庆分社,1987:289.

经典中医古籍

中药学教材(附图片)

穴位数据库(附图片)