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       【摘要】 
       目的探讨恩施地区绿凤藤茶的最佳采收时期及采摘部位。方法采用分光光度法测定不同采收时期及不同部位绿凤藤茶中总黄酮的含量。结果不同采摘时间及不同采摘部位的绿凤藤茶中总黄酮含量具有明显的差别。结论不同时间采摘的藤茶以6月总黄酮含量为最高，不同采摘部位的藤茶总黄酮含量以茎尖为最高。
       【关键词】  绿凤藤茶；不同采收时期；不同部位；总黄酮
       Comparison and Analysis for the Content of Total Flavonoids in Various Parts of Ampelopsis grossedentata cv,lufeng Collected in Different Seasons
       XIANG Dongshan，LIU Xiaopeng，ZHAI Kun, ZHENG Xiaojiang
       1.Key Laboratory of Biological Resources, Protection and Utilization of Hubei Province, Research Institute of Biological Technology of Hubei Institutes for Nationalities, Enshi, Hubei,445000； 2.College of Chemistry and Environment Engineering, Hubei Institute for Nationalities, Enshi, Hubei,45000
       Abstract：ObjectiveTo clarify the best harvest season and harvest part of A.grossedentata cv,lufeng in Enshi areas.MethodsSpectrophotometry was used to determine the content of total flavonoids in different parts of  A.grossedentata cv,lufeng collected in different seasons.ResultsThe content of total flavonoids had significant differences in different seasons and different parts of A.grossedentata cv,lufeng. ConclusionThe content of total flavonoids is the highest in A.grossedentata cv,lufeng collected in June. The content of total flavonoids is the highest collected in the stem tip.
       Key words：A.grossedentata cv,lufeng;   Different seasons; Different parts; Total flavonoids
       
       藤茶Ampelsis为葡萄科（Vitaceae）蛇葡萄属Ampelopsis药食两用的木质藤本植物显齿蛇葡萄A.grossedentata(Hand.-Mazz.)W.T.Wang，富含黄酮（二氢杨梅素）、氨基酸、多糖、多酚、维生素等多种有效成分。现代药理学与生物活性研究表明，藤茶黄酮具有抗氧化、护肝、降血糖、降血脂等多种生物活性［1～5］。绿凤藤茶A.grossedentata CV,lufeng,是郑小江等［6］经过多年选育的无性系，2003-12通过湖北省恩施州农作物品种审(认)定小组审(认)定和湖北省农作物品种审定委员会备案为推广品种，所含总黄酮、总氨基酸、维生素等都极显著高于显齿蛇葡萄［7］，是大量应用于医药、保健、功能性饮食品工业的优质原料。
       
       目前，恩施州绿凤藤茶的种植面积约520 ha，并产生了较好的经济效益。在实际生产过程中，每年对藤茶的采摘至少在3次以上，但对于藤茶的采摘时间及采摘部位，各地区都不一样，没有统一标准。为了弄清绿凤藤茶的最佳采摘时间与采摘部位，笔者对不同采摘时期及不同部位绿凤藤茶的黄酮含量进行检测、分析与比较，为实际生产提供理论依据。
       1 材料与仪器
       1.1 试验材料与试剂
       试验材料采自湖北省恩施州来凤县藤茶生产基地，在4～10月7个月中每月下旬采样一次，采样间隔大约为30 d。主要试剂有无水酒精、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠，均为分析纯；对照品为芦丁，购于中国药品生物制品检定所。
       1.2 仪器
       超声波提取仪；UV-2550型紫外可见分光光度计。
       2 方法
       2.1 样品处理
       所有采摘的样品均置鼓风干燥箱中60℃烘干，粉碎至全部通过60目筛孔，密封于干燥器中备用。
       2.2 样品溶液的制备
       称取样品粉末0.5 g左右，加入10 ml 75%的乙醇作为提取溶剂，置超声波提取仪中，于80℃超声提取30 min，离心，重复提取两次，合并提取液，定容至100 ml的容量瓶中即得样品溶液。
       2.3 对照品溶液的配制
       精密称取经充分干燥的对照品5.0 mg，置25 ml的容量瓶中，用75%的乙醇溶解，然后加75%的乙醇至刻度，摇匀，配制成浓度为0.2 mg/ml的对照品溶液。
       2.4 标准曲线的制作
       参照文献［8］的方法，以吸光度为横坐标，对照品的质量为纵坐标制作标准曲线（如图1），并求得曲线回归方程为Y=0.609 4X+0.005 1，相关系数R2=0.995。
       2.5 样品中总黄酮含量的测定
       取各样品溶液0.2 ml于具塞试管中，补加75%乙醇至2.5 ml，其它步骤同标准曲线的制作，分别测定其吸光度，通过回归方程计算各样品中总黄酮的含量。
       3 结果与分析
       3.1 不同采收时期绿凤藤茶中总黄酮含量的比较与分析
       从4月起至10月止，在每月下旬采样1次，以藤茶叶片为原料，对不同采样时期样品中的总黄酮含量进行检测（见表1）。由表1可知，藤茶各不同部位总黄酮的含量以6月、7月和8月较高，5月及9月次之，4月及10月总黄酮含量较低。表1  不同采收时期绿凤藤茶中总黄酮含量（略）
       3.2 不同采摘部位绿凤藤茶中总黄酮含量的比较与分析
       以5月下旬所采收的各不同部位的藤茶为原料，对各样品中的总黄酮含量进行检测，其结果如表2所示。由表2可知，不同部位的藤茶中总黄酮含量相差较大，其中叶的含量比茎的高，新叶比老叶中的含量高。不同部位藤茶样品中总黄酮含量依次为：茎尖（龙须）>15 d左右的展叶>25 d左右的展叶>35 d左右的展叶>15 d左右的嫩茎。
       3.3 加标回收实验
       按测定方法，对6份藤茶样品溶液分别加入一定量的芦丁对照品溶液，测定吸光度，计算黄酮含量，结果如表3。由表3可知，不同样品的平均回收率为99.94%，相对标准偏差较小，说明本测定方法具有很好的准确度。表2  不同采收部位绿凤藤茶中总黄酮含量（略）表3  回收率实验结果（略）
       4 结论与讨论
          
       不同采摘时间及不同采摘部位藤茶中总黄酮含量具有明显的差别，不同采摘时间以6月总黄酮含量为最高，不同采摘部位以茎尖（龙须）为最高。
       
       根据恩施地区的气候特点，结合不同采摘时间藤茶中总黄酮的含量来看，本地区藤茶全年可采摘3次。第1次采摘时间应在5月的中旬或下旬，此时藤茶各个部位中总黄酮含量都较高且产量高，若在4月采摘，藤茶中总黄酮含量低且产量低，若在6月采摘，虽然产量较高但老叶较多，老叶中总黄酮含量偏低，品质较差，且在6月采摘对后两次的采摘不利。第2次采摘时间应在7月的上旬或中旬，与第1次采摘的时间间隔大约50 d左右，因为这段时间气温适宜，藤茶生产较快，这样既可保证较高的产量，又可采摘到较多的新叶，保证其质量。第3次采摘时间应在9月的上旬或中旬，若采摘时间太晚，藤茶中总黄酮含量偏低，对其品质影响较大。
        根据藤茶的生长特性，结合不同采摘部位藤茶中总黄酮含量来看，在进行采摘时，最好只采摘生长40 d以下的叶片和15 d以下的嫩茎。这一是因为老叶中总黄酮含量较低，品质较差，二是因为要留一部分的老叶进行光合作用，为藤茶的生长提供必要能量。
       【参考文献】
         　　［1］唐瑛,罗祖友,严奉伟，等.藤茶总黄酮对小鼠的体内外抗氧化作用研究［J］.中国医院药学杂志,2006,26(12):1449.
       
       ［2］钟正贤,覃洁萍.广西藤茶总黄酮保肝的实验研究［J］.广西科学,2002,9(1):57.
       
       ［3］钟正贤,覃洁萍.广西藤茶总黄酮降血糖的实验研究［J］.中国中药杂志,2002,27(9):687.
       
       ［4］刘翠娥,王海玉,王亚东,等.藤茶辅助降血脂作用的研究［J］.食品科学,2005,26(11):237.
       
       ［5］陈玉琼,向班贵,倪德江,等.恩施富硒藤茶降血脂作用研究［J］.营养学报,2006,28(5):448.
       
       ［6］郑小江,刘美安,刘金龙,等.优质高产藤茶新品种——绿凤的选育［J］.作物杂志,2005,4:62.
       
       ［7］郑小江,向东山,刘金龙,等.绿凤藤茶成分分析［J］.食品科学,2007,28(9):453.
       
       ［8］邓素兰,余继宏,管 林.杜仲不同部位总黄酮含量的测定［J］.生物质化学工程,2007,41(3):37.