大花紫薇叶醋酸乙酯部位的化学成分研究
作者:詹勤,王燕,李霞, 杨颖博, 陈万生, 孙连娜
作者单位:中国人民解放军第二军医大学 药学院,上海 200433;中国人民解放军第二军医大学长征医院药学部,上海 200003;中国人民解放军第二军医大学 现代中药研究中心,上海 200433
《时珍国医国药》 2009年 第8期
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【摘要】
目的研究大花紫薇叶醋酸乙酯部位的化学成分。方法采用硅胶、Sephadex LH-20、MCI、HP20P柱层析对大花紫薇叶醋酸乙酯部位进行分离纯化,通过ESI-MS、NMR等光谱技术和化学方法鉴定所分离化合物的结构。结果从中分离得到7个化合物,分别为咖啡酸(caffeic acid,1)、咖啡酸乙酯(caffeic acid ethylester,2)、没食子酸乙酯(ethyl gallate,3)、6,7-二羟基香豆素(6,7-dihydroxy coumarin,4)、山萘酚(kaempferol,5)、槲皮素(quercetin,6)、金丝桃苷(hyperin,7)。结论7个化合物均为首次从该植物中获得。
【关键词】 大花紫薇 化学成分 结构鉴定
Studies on the Chemical Constituents of Ethyl Acetate Extract from Lagerstroemia speciosa (Linn.) Pers Leaves
ZHAN Qin, WANG Yan, LI Xia, YANG Yingbo,CHEN Wansheng, SUN Lianna
(Modern Research Center for Traditional Chinese Medicine, Second Military Medical University, Shanghai 200433, China; School of Pharmacology, Second Military Medical University, Shanghai 200433, China;Department of Pharmacology, Changzheng Hospital, Second Military Medical University, Shanghai 200003, China)
Abstract:Objective To study the chemical constituents from ethyl acetate extract from Lagerstroemia speciosa (Linn.) Pers leaves.MethodsThe extract was isolated and purified by chromatograph over silica gel, Sephadex LH-20,MCI,HP20P column. Their chemical structures were elucidated by chemical methods and spectral data(ESI-MS、NMR).ResultsEight compounds were isolated and identified as caffeic acid(1)、caffeic acid ethylester(2),ethyl gallate(3),6,7-dihydroxy coumarin(4),kaempferol(5),quercetin (6),hyperin(7) respectively.ConclusionCompounds 1~7 were separated from the leaves of Lagerstroemia speciosa (Linn.) Pers for the first time.
Key words:Lagerstroemia speciosa (Linn.) Pers; Chemical constituents; Structure identification
大花紫薇Lagerstroemia speciosa (Linn.) Pers为千屈菜科紫薇属植物,又名大叶紫薇、大果紫薇,系一种分布于斯里兰卡、印度、马来西亚、越南及菲律宾等国家的大乔木,在我国广东、广西及福建地区常栽培供观赏[1]。大花紫薇在东南亚各国,俗称banaba。印度用其根作收敛剂;马来西亚用其叶捣敷治疟疾、脚部骨折;菲律宾将其作为一种传统药物预防及治疗糖尿病,口服有效且无毒副作用。近年来大花紫薇已经引起各国学者的关注。为了充分利用大花紫薇这一潜在药用资源,本文对采集福建漳州地区的大花紫薇叶进行了化学成分研究。现报道其中醋酸乙酯部位7个化合物的分离和鉴定结果,其中化合物5,6,7为黄酮类化合物。
1 材料与仪器
1.1 药材样品于200609采于福建漳州,经第二军医大学长征医院药学部陈万生教授鉴定为千屈菜科紫薇属植物大花紫薇Lagerstroemia speciosa(Linn.)Pers的叶。
1.2 仪器熔点用日本Yanaco显微熔点测定仪(温度计未校正);质谱用Varian MAT-212型质谱仪测定;核磁共振谱用Bruker-speckospin AC-600P型核磁共振仪测定(600 MHz)。
1.3 试剂与材料柱层析和薄层层析硅胶均为烟台江友硅胶开发有限公司生产; Sephadex LH-20为Pharmacia公司产品;MCI、HP20P为日本三菱公司产品;薄层层析通过碘蒸气和10%硫酸乙醇液显色;所用试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 提取与分离取福建漳州产大花紫薇落叶44.0 kg粉碎,80%乙醇浸泡渗漉,浓缩干燥得浸膏3.45 kg。浸膏用水混悬,依次用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇反复萃取,得到石油醚部位(2.02%)、醋酸乙酯部位(9.96%)、正丁醇部位(28.34%)。
将醋酸乙酯部位69.0g经硅胶柱层析,用氯仿-甲醇梯度洗脱进行粗分,再经多次硅胶柱层析,MCI、HP20P柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析,分离得到化合物1(20 mg),2(130 mg),3(155 mg),4(10 mg),5(0.5 g),6(1 g),7(10 mg)。
2.2 结构鉴定
2.2.1 化合物1淡黄色长针状结晶(甲醇),mp:194~196℃,FeCl3反应显蓝色。ESI-MS m/z:179[M-H]-。1H-NMR(CD3OD,600 MHz,TMS) δ:7.03 (1H,d,J=2.4 Hz,H-2),6.76(1H,d,J=8.4 Hz,H-5),6.90(1H,dd,J=2.4 Hz,8.4 Hz,H-6),7.48(1H,d,J=16 Hz,H-7),6.20(1H,d,J=16 Hz,H-8);13C-NMR(CD3OD,150 MHz,TMS) δ:128.0(C-1),115.0(C-2),146.7(C-3),149.2(C-4),116.5(C-5),122.7(C-6),146.4(C-7),116.4(C-8),171.6 (C-9)。对照文献[2],鉴定为咖啡酸。
2.2.2 化合物2白色针状结晶(石油醚-醋酸乙酯),mp:138~140℃。ESI-MS m/z:207[M-H]-。结合1H-NMR,13C-NMR及DEPT谱推断分子式为C11H12O4。1H-NMR(C5D5N,600 MHz,TMS) δ:1.28(3H,t,CH3),4.20(2H,q,CH2),7.02(1H,d,J=1.8 Hz,H-2),6.76(1H,d,J=8.4 Hz,H-5),6.93(1H,dd,J=8.4,1.8Hz,H-6),7.53(1H,d,J=15.6 Hz,H-7),6.22(1H,d,J=15.6 Hz,H-8);13C-NMR(C5D5N,150 MHz,TMS) δ:14.6(C-1′ ),61.4(C-2′ ),127.8(C-1),115.3(C-2),146.8(C-3),146.7(C-4),116.5(C-5),122.9(C-6),149.5(C-7),115.1(C-8),169.3(酯羰基)。以上数据与文献[3]报道基本一致,鉴定该化合物为咖啡酸乙酯。
2.2.3 化合物3白色针状结晶(氯仿),mp:155~157℃。三氯化铁反应呈阳性。ESI-MS m/z:197[M-H]-。1H-NMR(DMSO-d6,600 MHz,TMS) δ:1.24(3H,t,-CH3),4.18(2H,q,-OCH2-),6.93(2H,s,Ar-H);13C-NMR(DMSO-d6,150 MHz, TMS) δ:14.2 (-CH3),60.0(-OCH2-),119.6(C-1),108.4 (C -2,6),138.3 (C-4),145.5 (C-3,5),165.8(C=O)。以上数据与文献[4]一致,鉴定为没食子酸乙酯。
2.2.4 化合物4淡黄色粉末(甲醇),ESI-MS m/z:177[M-H]-,根据1H-NMR,13C-NMR及DEPT谱推断分子式为C9H6O4。1H-NMR(C5D5N,600 MHz,TMS) δ:6.23(1H,d,J=9.6Hz,H-3),7.60(1H,d,J=9.6 Hz,H-4),7.18(1H,s,H-5),7.12(1H,s,H-8);13C-NMR(C5D5N,150 MHz,TMS) δ:161.6(C-2),113.0(C-3),144.8(C-4),111.6(C-5),150.5(C-6),144.1(C-7),103.7(C-8),152.4(C-9),112.2(C-10)。通过与文献[5]比较,确定该化合物结构为6,7-二羟基香豆素。
2.2.5 化合物5黄色粉末(甲醇),mp:274~275 ℃,1H-NMR(DMSO-d6,600 MHz,TMS) δ:6.91(2H,d,J=8.6 Hz,H-3′ and 5 ′),8.02(2H,d,J=8.6 Hz,H-2′ and 6′ ),10.75(1H,s,3-OH),9.35(1H,s,4-OH),12.46 (1H,s,5-OH),6.18(1H,d,J=1.8 Hz,H-6),6.42(1H,d,J=1.8 Hz,H-8),10.08(1H,s,7-OH);13C-NMR(DMSO-d6,150 MHz,TMS) δ:146.8 (C-2),135.6(C-3),175.9(C-4),156.2(C-5),98.2(C-6),163.9(C-7),93.5(C-8),160.7 (C-9),103.0(C-10),121.7(C-1′),115.4(2C,C-3′ and 5′ ),129.5(2C,C-2′ and 6 ′),159.2(C-4′)。上述数据与文献[6]报道的山萘酚基本一致,故鉴定化合物5为山萘酚。
2.2.6 化合物6黄色粉末(甲醇-水),mp:312~314℃,盐酸-镁粉反应呈阳性, ESI-MS m/z:301[M-H]-,1H-NMR(DMSO-d6,600 MHz,TMS) δ:6.17(1H,d,J=2.4 Hz,H-6),6.37(1H,d,J=2.4 Hz,H-8),6.86(1H,d,J=8.4 Hz,H-5"),7.61(1H,dd,J=8.4 Hz,1.8 Hz,H-6"),7.72(1H,d,J=1.8 Hz,H-2");13C-NMR上15个碳信号与山萘酚类似。各种数据与文献[7]一致,故此化合物鉴定为槲皮素。
2.2.7 化合物7黄色针晶(甲醇),mp:233~235℃,Molish反应出现棕色环,HCl-Mg粉反应呈玫瑰红色,FeCl3反应呈墨绿色。ESI-MS m/z:465[M+H]+,1H-NMR(DMSO-d6,600 MHz,TMS) δ:3.16~3.64(6H,m,H-gal2~6),5.34 (1H,d,J=7.8 Hz,H-gal1),6.16(1H,s,H-6),6.37(1H,s,H-8),6.80(1H,d,J=8.4 Hz,H-5′ ),7.65(1H,dd,J=1.8 Hz,8.4 Hz,H-6′ ),7.52(1H,d,J=1.8 Hz, H-2′ ),12.60(1H,s,5-OH);13C-NMR(DMSO-d6,150 MHz,TMS) δ:156.4(C-2),133.4(C-3),177.3(C-4),161.2(C-5),98.9(C-6),163.9(C-7),93.6(C-8),156.1(C-9),103.5 (C-10),121.9(C-1′),115.9(C-2′),144.9(C-3′),148.6(C-4′),115.2(C-5′),121.0(C-6′),101.9(gal-C-1),71.2(gal-C-2),73.2(gal-C-3),67.9(gal-C-4),75.8(gal-C-5),60.1(gal-C-6)。以上数据与文献[8]报道一致,故鉴定化合物7为金丝桃苷。
3 讨论
大花紫薇叶醋酸乙酯部位经硅胶、Sephadex LH-20、MCI CHP20P柱层析,分离得到7个化合物,通过理化性质,波谱解析,文献检索等方法确定其结构,且这7个化合物均为首次从该植物中分得。本研究为进一步开发利用大花紫薇提供了理论依据。
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