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       【摘要】 
       目的比较贵州不同产地、不同采收期芭蕉根中总皂苷的含量。 方法用80%乙醇提取，5%香草醛-冰醋酸溶液比色法测定贵州不同产地、不同采收期芭蕉根中总皂苷的含量。结果15批芭蕉根中，同一采收期中天柱远口采集的芭蕉根中总皂苷含量较高；同一产地的5个采收期中，以8，9，10月份采收的芭蕉根中总皂苷含量较高，1月份采收的芭蕉根中总皂苷含量最低。结论不同产地，不同采收期芭蕉根中总皂苷的含量存在明显差异，应注意生长环境和采收季节对芭蕉根药材质量的影响。
       【关键词】  芭蕉根 总皂苷 含量分析
       Determination of the Content of Total Saponins in the Musa basjioo from Different Producing Areas and Different Collection Seasons
       CHEN Xiaolan, WANG Xiangpei*, SUN Yichun, ZHONG Guihen, CHEN Yanli
       (Guiyang College of Traditional Chinese Medicine,Guiyang,Guizhou,550002,China)
       Abstract:Objective To compare the content of total saponins in Musa basjioo.from different producing areas and different collection seasons in Guizhou. Methods80% ethanol was used as extracting dissolvent,oleanolic acid was used as the reference compound and Vanillin-HClO4 was used as the chromogenic reagent.UV-VIS spectrophotometry methods was used to determine the content of the total saponins in Musa basjioo.ResultsIn 15 kinds of Musa basjioo, the Musa basjioo of the same collection seasons,produced in Tianzhu-yuan kou contained  more total saponins. In the same producing area but different collection season,those collected in August, September and October  contained more the total saponins,but fewless in January. ConclusionThe contents of the total saponins from various areas and different collection seasons are different, and attention must be paid to the effects of environment and collection season on the quality of herbs.
       Key words:Musa basjioo;  Total saponins;  Content Analysis
        芭蕉根为芭蕉科植物芭蕉Musa basjoo Sied.et Zucc.的干燥根茎，为贵州省少数民族用药，具有清热解毒、止渴、利尿等功效,用于风热头痛，水肿脚气，血淋，肌肤肿痛，丹毒［1］治疗。以芭蕉根为组成药之一的复方制剂，如肿痛舒喷雾剂、骨康胶囊已广泛用于临床，具有显著的消肿止痛、舒筋通络的作用。但未见关于芭蕉根药材的质量评价的定量检测指标，经预试验，芭蕉根主要含有皂苷类成分。本文首次用分光光度法对不同产地及不同采收期芭蕉根中总皂苷含量进行了比较，为芭蕉根的质量控制提供依据，也为芭蕉根进一步研究和开发奠定基础。
       1  仪器与试药
       1.1  仪器澳大利亚照生紫外分光光度计Cintra20，SK8210HP超声波清洗器（上海科导超声仪器有限公司）;电热数显恒温水浴锅（常州澳华仪器有限公司）；SZ-96AUY220电子天平（万分之一）。
       1.2  药材药材采自贵州贵阳、贵州天柱坌处、贵州天柱远口、贵州锦屏、贵州盘县、贵州赤水等地，均经贵阳中医学院王祥培副教授鉴定为芭蕉科植物芭蕉Musa basjoo Sied.et Zucc.的根茎。
       1.3  试剂齐墩果酸标准品（购于中国药品生物制品检定所，批号：110709-200304），其余试剂均为分析纯。
       2  方法与结果
       2.1  溶液的制备
       2.1.1  对照品溶液的制备精密称取齐墩果酸对照品10.76 mg，加甲醇溶解定容至50 ml ，制成每毫升含齐墩果酸对照品0.215 2 mg的溶液，即得。
       2.1.2  供试品溶液的制备取芭蕉根粉末1.0 g，精密称定，置锥形瓶中，精密吸取80%乙醇25 ml，超声3次，30 min/次，过滤，合并滤液，水浴蒸干后加水20 ml溶解。以石油醚40 ml，脱脂两次，合并石油醚液，并用10 ml水洗涤，弃去醚层，将洗液与水合并，用水饱和正丁醇萃取3次，30 ml/次。合并萃取液，水浴挥去正丁醇后用甲醇溶解并定容至25 ml容量瓶中，摇匀，备用。
       2.2  测定波长的选择精密吸取齐墩果酸标准品溶液（0.215 2 mg/ml）2 ml和供试品溶液4 ml，置于试管中，80℃水浴挥干溶剂，取出，冷至室温，精密加入新配制的5%香草醛-冰醋酸溶液0.2 ml，高氯酸0.8 ml，摇匀，密塞，80℃水浴下加热20 min，立即取出用流水冷却5    min，再加入5 ml冰醋酸。以不加标准品的样品管为空白，在400～700 nm范围内进行光谱扫描，结果对照品溶液与供试品溶液均在546 nm波长处有最大吸收，故确定测定波长为546 nm。紫外扫描光谱见图1。
       2.3  显色稳定性实验精密吸取芭蕉根供试品溶液、甲醇各0.2 ml，置10 ml具塞试管中，按“2.2”项下方法显色后。以相应试剂为空白，在546 nm波长处，在2 h内每隔10 min测定吸光度，共13次，RSD为2.01%。结果表明在显色后1h内吸光度相对较稳定，1 h后吸光度开始明显下降，因此显色后需在1 h内测定吸光度。
       2.4  标准曲线的测定精密吸取齐墩果酸标准品溶液1.5，2.0，2.5，3.0， 3.5 ml置于10 ml具塞试管中，按“2.2” 项下的香草醛-高氯酸法显色后测定吸光值。以吸光度（Y）为纵坐标，进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程Y=12.703 75X-0.247 67(r=0.999 7)。结果表明，齐墩果酸在0.024～0.056 mg范围内线性关系良好。
       
       2.5  精密度实验精密吸取同一份供试品溶液3.0 ml,置10 ml具塞试管中,按“2.2”项下方法显色后,在同一条件下连续测定吸光度6次,结果以吸光度值计算RSD为0.19%。
       2.6  稳定性实验精密称取芭蕉根样品，分别于提取后1，3，6，12，18，24，36，48 h精密吸取供试品溶液、甲醇各0.2 ml，置10 ml具塞试管中，按“2.2”项下方法显色后，测定吸光度。得稳定性实验RSD为1.40%，结果表明供试品溶液在48 h内总皂苷的含量稳定。
       2.7  重复性实验取同一样品粉末6份，每份1.5 g，精密称定，照“2.1.2”项下的方法依法制备，精密吸取供试品溶液、甲醇各0.2 ml，置10 ml试管中，按“2.2”项下方法显色后，在同一条件下分别测定吸光度，RSD为1.08%，表明本法重复性良好。
       2.8  回收率实验取已知含量的样品粉末6 份，每份0.75 g，精密称定，每3份为一组，每组分别精密加入齐墩果酸标准品2.7，3.3，4 mg,照“2.1.2”项下的方法依法制备，精密吸取供试品溶液、甲醇各0.2 ml，置10 ml试管中，按“2.2”项下方法显色后，在同一条件下分别测定吸光度，结果平均回收率为99.13%，RSD为1.84%。
       2.9  样品含量的测定取芭蕉根粉末约1.5 g，精密称定，按“2.1.1”项下方法处理11批样品，制备供试品溶液。精密吸取供试品溶液、甲醇各0.2 ml, 按“2.2”项下方法显色后，测定其吸光度。根据标准曲线计算原药材中总皂苷的含量(质量浓度) ,结果见表1。表1  贵州不同产地、不同采收期芭蕉根中总皂苷含量测定结果（略）
       3  讨论
        前期研究曾考察了直接回流法、索氏提取法、超声法等不同提取方法，通过含量测定结果得知，超声法提取较完全，且具有省时省料，操作简单，不需加热的优点。故选择超声法提取。用3种显色剂浓硫酸∶甲醇（4∶1）、5%香草醛-冰乙酸∶高氯酸∶醋酸乙酯（2∶8∶10）、5％香草醛-冰乙酸∶高氯酸∶冰乙酸（2∶8∶10）分别对供试品溶液进行显色，在400～700 nm波长范围内测定吸收光谱。结果5％香草醛-冰乙酸∶高氯酸∶冰乙酸为显色剂重现性好，显色后样品溶液稳定。由于目前国内尚无芭蕉根中总皂苷类成分的法定对照品，在可见光区对供试品溶液和齐墩果酸标准品溶液显色并进行光谱扫描，结果两者吸收图谱基本一致，最大吸收波长为546 nm，因此选用齐墩果酸为对照品。
        根据收集到的15批不同产地、不同采收期芭蕉根中总皂苷的含量测定结果得知，相同采收期的样品中，天柱远口芭蕉根中总皂苷的含量较高，而盘县、锦屏的芭蕉根中总皂苷的含量较低，这可能受该地的气候条件所影响；通过比较1月份、4月份、8月份、9月份和10月份5个不同采收期的天柱坌处产芭蕉根中总皂苷的含量，其中以8，9，10月份采收的芭蕉根中总皂苷的含量较1月份和4月份高，可提示《贵州省中药材、民族药材质量标准》2003版中芭蕉根全年均可采收［1］的说法有待商榷；同时比较了芭蕉主根和侧根中总皂苷的含量，主根的含量比侧根高很多，说明芭蕉根以主根为药用部位是合理的。上述结果提示我们在用药时应注意产地、采收季节与药材质量的关系，在进行芭蕉根的有关研究时，应注意生长环境、采收季节以及药用部位对药材质量的影响。
       【参考文献】
         　　［1］贵州省药品监督管理局.贵州省中药材、民族药材质量标准［S］.贵阳：贵州科技出版社，2003： 196.