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       【关键词】  痹痛灵；,,正交t值法；,,抗炎
       摘要：目的优选痹痛灵处方。方法运用正交t值法研究痹痛灵抗炎作用来筛选其处方组成。结果G药起主要作用。结论 痹痛灵的处方最佳组合为A，B，C，E，G，H，I药。
       关键词：痹痛灵；  正交t值法；  抗炎
       Experimental Study of Analyzing Bitongling by Orthogonal t Value Design
       LI Guangqing, WANG Yue, XIA Weijun
       (No.1 College of Clinical Medicine of Nanjing University of TCM, Nanjing 210046,China)
       Abstract：ObjectiveTo optimize Bitongling prescription.MethodsTo study Bitongling"s function of resisting inflammation and select prescription by orthogonal t Value Design.ResultsG prepared played a main role.ConclusionThe best prescription of Bitongling is made up of A,B,C,E,G,H and I.
       Key words：Bitongling;  Orthogonal t value design;  Resist inflammation
   
　　痹痛灵是以全国名老中医汪履秋教授治疗类风湿性关节炎的经验为基础和依据，研制出治疗本病的中药复方。应用于临床取得了良好的疗效。为了进一步探讨其处方组成的合理性，我们将9味中药作为处理因素，采用正交t值法［1］对不同中药配伍组合对二甲苯诱发小鼠耳肿胀的结果进行分析，从抗炎作用考虑，进行了初步的处方筛选。
       　　1  器材
       1.1  药物和试剂实验用药购自南京中医药大学中西医结合门诊部，经中药鉴定教研室鉴定为正品。将药物按正交t值表安排（见表1），共12组。各组药物分别以蒸馏水浸泡1 h，煎2 h，并将所得药液用双层纱布过滤，水浴加热蒸发浓缩为2 g/ml，贮于冰箱中备用。实验中小鼠给药剂量以成人每日用量的等效剂量计算。二甲苯，南京化学试剂厂，批号：990305。
       1.2  动物ICR小鼠，由南京中医药大学实验动物中心提供，合格证号：SYXK（苏）2002-0008。
       1.3  仪器电子天平，上海天平仪器厂。
       　　2  方法
       2.1  正交t值法按照表1，将9味中药（A、B、C……I）作为处理因素分别占据9列。每味药取两个水平，即1水平为用药，2水平为不用药。根据表的要求将不同配伍的药物按实验号，用上述方法制备成1~12组浓缩液，分别进行各自的抗炎作用研究，筛选最为有效的抗炎组合。
       2.2  对二甲苯诱发小鼠耳肿胀的影响按文献［2］方法，取（20±2）g ICR小鼠，120只，每组雌雄各半。随机分为12组，即痹痛灵1~12组。各组按20 ml/kg灌胃给药，共给药5 d。末次给药后1 h，于一侧耳壳正反两面均匀涂抹二甲苯，每鼠0.1 ml，1 h后处死动物，沿耳廓基线剪下两耳，于同一部位用打孔器冲下耳片（直径8~9 mm），称重，以两耳片重量之差为肿胀度。数值越小表示抗炎作用越强。
       　　3  结果
       结果见表1。
       表1  正效t值法实验数据及计算分析结果（略）
　　
　　根据表1，G药的P＜0.01，在统计学上有显著性意义，D、F药的M2＜M1，D值为负值，说明不用此药比用此药的抗炎作用好，故本方抗炎作用最佳组合为A1B1C1D2E1F2G1H1I1。抗炎作用显著者（主药）：G药（峰房）。
       　　4  讨论
       类风湿性关节炎属于中医学“痹证”范畴。结合临床实践，我们认为其主要病理变化是寒湿阻络，因此我们确立了祛风除湿，散寒通络的治疗大法，确定了由蜂房、麻黄、制川乌等9味中药组成的复方，临床应用取得了较好的疗效，曾观察本方颗粒剂治疗类风湿性关节炎患者30例的临床疗效及免疫学指标的变化，并与风湿骨痛胶囊组对照，结果治疗组临床总有效率为93.3%，对照组为76.6%，治疗组疗效明显优于对照组［3］。初步实验研究表明：本方颗粒剂能减轻佐剂性关节炎大鼠的关节肿胀度、胸腺、脾重，抑制模型鼠体重减轻。表明其具有抗炎及免疫抑制作用［4］。为进一步研究组方，实验做了正交t值法拆方的分析研究。正交t值法源自正交设计，不含交互作用，在数理上与正交设计F值法等价，而且计算简便，比较适合于4~11味药物复方的最佳组合分析研究［5］。因此，我们选用了正交t值法进行痹痛灵的拆方研究。用正交t值法优选处方，一般分三步进行：主药分析、辅药交互作用分析及剂量分析。本实验完成了第1步，通过筛选研究表明：该方抗炎作用最佳组合为ABCEGHI。抗炎作用显著者是G药（蜂房）。蜂房化学成分复杂，药理作用广泛，是有重要药用价值的虫类中药。本品味甘性平，能祛风、攻毒、杀虫、止痛。一般认为蜂房的化学成分主要含蜂蜡、蜂胶和房油3种物质。现代药理研究表明本品水提物（LEF）能明显抑制巴豆油诱发小鼠耳的炎性水肿，此种作用于切除实验动物两侧肾上腺后仍然出现。说明其抗炎作用可能是通过直接的作用机理，而不是通过垂体-肾上腺系统。LEF对大鼠脚掌皮内注射蛋清诱发的急性炎症水肿，也有明显抑制作用。LEF也具有与氢化可的松相似的作用，能显著抑制大、小鼠皮下埋藏棉球所诱发的肉芽组织增生的慢性炎症［6］。近年来有学者对蜂房抗炎、免疫活性蛋白粗品（NV3）进行分离、纯化，得到酸性多肽NV-PP-1和酸性蛋白NV-PP-4，为蜂房的抗炎作用提供了科学依据［7，8］。
       　　参考文献：
       ［1］  李仪奎.中药药理实验方法学［M］.上海：上海科学技术出版社，1991：299.
       ［2］  陈  奇.中药药理研究方法学［M］.北京：人民卫生出版社，1993：356.
       ［3］  耿元卿，汪  悦.痹痛灵颗粒治疗类风湿性关节炎寒湿阻络证30例临床研究［J］.中国中医药信息杂志，2004，11（2）：111.
       ［4］  汪  悦，郭海英，耿元卿，等.痹痛灵颗粒对佐剂性关节炎大鼠疗效实验研究［J］.中国中医药信息杂志，2004，11（7）：595.
       ［5］  孙为民，孙瑞元.中药方剂研究的正交t值法［J］.中药药理与临床，1992，8（1）：41.
       ［6］  孟海琴.露蜂房的抗炎症作用［J］.中草药，1983，14（9）：21.
       ［7］  李  琳，柳雪枚.露蜂房抗炎蛋白中多肽成分工协作的分离、纯化及性质研究［J］.中国药学杂志，1999，34（4）：233.
       ［8］  徐  伟，肖  宣，柳雪枚.中药露蜂房水溶性蛋白NV-PP-4的分离纯化及部分理化性质鉴定［J］.药学实践杂志，2000，18（5）：284.
       (南京中医药大学第一临床医学院，江苏 南京  210046)