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       【摘要】 
       目的优选解毒利尿颗粒的最佳水提取工艺。方法以干膏量、甘草酸提取量为评价指标，选择加水量、提取时间、提取次数为考察因素，利用L9(34)正交实验确定解毒利尿颗粒的水提取工艺。结果最佳提取工艺为加水10倍量，提取3次，2 h/次。结论优选出的提取工艺简单、可行，可作为该制剂合理开发的依据。
       【关键词】  解毒利尿颗粒;提取工艺;正交实验
       解毒利尿颗粒由生甘草、白茅根、赤芍、紫苏叶、生姜、猪苓等6味药材组成，具有清热解毒、利尿等功效。临床上主要用于不明原因的中毒。因本品具有减轻中毒症状的作用，可为临床诊断确定中毒原因提供时间。根据处方中药材的主要有效成分的性质、处方的功能主治、临床用药经验、预实验结果、工厂生产实际和参考有关文献[1~3]，本实验采用正交实验设计对方中甘草等药材的水煎煮工艺，进行了考察，以甘草中甘草酸的含量和出膏量为指标，优选提取工艺。
       1仪器与试药
       1.1仪器Waters1525高效液相色谱仪(配Waters2487紫外可见检测器);MeLLennium32色谱工作站;METTER Toledo AG135 1/10万电子分析天平(瑞士METTER公司);KQ-250DB数控型超声波清洗器(昆山市超声仪器公司);电热恒温水浴锅(北京市长风仪器仪表公司);98-1-B型电子调温电热套(天津市泰斯特仪器有限公司);101A-3E型电热鼓风干燥箱(上海实验仪器厂有限公司)。
       1.2试药与试剂甘草酸铵对照品(中国药品生物制品检定所，批号为：110731-200511);所用药材购于同仁堂药店，经鉴定[4]甘草为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch的干燥根，白茅根为禾本科植物白茅Imperata cylindrica Beauv.var.major(Nees)C.E.Hubb.的干燥根茎，赤芍为毛茛科植物芍药Paeonia Iactiflora Pall.的干燥根，紫苏叶为唇形科植物紫苏Perilla frutescens(L.)Britt.的干燥叶，生姜为姜科植物姜Zingiber officinale Rosc.的新鲜根茎，猪苓为多孔菌科真菌猪苓Polyporus umbellatus(Pers.)Fries的干燥根;甲醇为色谱纯，水为纯净水，其他试剂均为分析纯。
       2方法与结果
       2.1 正交实验设计经过预试验，多方考察影响水煎煮的因素，选择加水量、提取时间、提取次数为影响水煎煮的主因素，以甘草酸含量及出膏量为评价指标，用L9(34)正交表安排实验，因素水平表与正交实验设计见表1~2。
       2.2提取液的制备称取生甘草、白茅根、赤芍、紫苏叶、生姜、猪苓共9份，加入水，按表2进行实验，得水提取液，分别浓缩并定容至100 ml，摇匀，即得。表1因素水平表2正交实验表
       2.3甘草酸的含量测定[4]色谱条件：色谱柱为Diamonsil C18 (250 mm×4.6 mm ，5 μm);流动相为甲醇-0.2 mol·L-1醋酸铵水溶液-冰醋酸(67∶33∶1);检测波长250 nm;柱温30℃;流速1.0 ml·min-1;理论板数按甘草酸峰计算应不低于2 000。对照品溶液的制备：取甘草酸铵对照品适量，精密称定，加流动相制成每毫升含0.2 mg(折合甘草酸为0.1959 mg)的溶液。供试品溶液的制备：精密吸取提取液10 ml，转移至100 ml量瓶内，加乙醇稀释至刻度，超声处理(功率：250 W，频率：40 kHz)30 min，静置，取上清液，滤过，取续滤液，即得。测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
       2.4出膏量的测定精密吸取50 ml提取液并转移至已称重的干燥蒸发皿中，水浴蒸至近干，置70℃的烘箱进行减压干燥至恒重，计算出膏量。
       2.5数据分析对表2数据进行直观分析，以甘草酸含量及出膏量为评价指标，均可得出影响水煎煮因素的主次顺序为C、A、B，最佳提取工艺为C3A3B2。对二者的方差分析结果见表3~4，因素A、C对出膏量均有极显著影响，因素B对出膏量有显著影响，因素C对甘草酸提取量有极显著影响。根据以上结果，得出最佳提取工艺为C3A3B2，即加水煎煮3次，10倍量，提取2 h。表3甘草酸方差分析表4出膏量方差分析
       2.6验证实验与结果称取生甘草、白茅根、赤芍、紫苏叶、生姜、猪苓等6味药共3份，按上述制备工艺进行验证，结果与正交实验结果相符，说明本提取工艺稳定可行。结果见表5。
       3讨论
       3.1 煎煮方法的确定方中生甘草、白茅根、赤芍、紫苏叶、生姜、猪苓等药材在临床上以汤剂应用。预试验结果表明，采用水煎煮法可使所含成分得到较完全提取，从而保证制剂的疗效。表5验证实验结果
       3.2 评价指标的选择甘草为本品方中的君药，甘草酸是甘草的主要有效成分，具有抗炎、解毒、保肝和增强免疫等作用[5]，这与本颗粒剂的功能主治一致;而浸膏得率是评价水提取效率的传统手段，故评价指标确定为上述两项亦是合理可行的。
       3.3 最佳工艺的确定根据以上结果，结合临床用药与生产实际，确定本品药材的最佳提取工艺为：水煎煮3次，每次加水10倍量，提取2 h/次。
       【参考文献】
         　[1]张娟，杨中林，李萍.甘草中甘草酸的制备工艺研究[J].中成药，2007，29(5)：686.
       
       [2]周斌，高文远，张铁军.甘草配方颗粒制备工艺和质量标准研究[J].中成药，2007，29(9)：1405.
       
       [3]王艳平，夏新华，王杰英.正交试验法优选紫蒲颗粒提取工艺的研究[J].中成药，2009，31(1)：133.
       
       [4]国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部[S].北京：化学工业出版社，2005：59.
       
       [5]谢松梅，崔慧斐.甘草酸的研究进展[J].食品与药品，2006，8(3)：1.