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       【摘要】 
       蟾酥为我国的传统中药，临床上用于肿瘤的治疗并取得了良好的效果。文章综述了蟾酥抗肿瘤作用及近年来的研究进展。
       【关键词】  蟾酥； 抗肿瘤
            中药蟾酥（Venenum Bufonis）是蟾蜍科动物中华大蟾蜍Bufo bufo gargarizans Cantor或黑眶蟾蜍Bufo melanostictus Schneider的耳后腺或皮肤腺所分泌的白色浆液，多于夏、秋二季捕捉蟾蜍，挤取，干燥，加工而成［1］。其性味甘、辛，温，有毒，具有解毒、止痛、开窍醒神之功能，用于痈疽疔疮、咽喉肿痛、中暑神昏、腹痛吐泻等症。蟾酥临床应用广泛，是喉症丸、六神丸、牛黄消炎片等中成药的主要成分。蟾酥自20世纪80年代投入临床应用以来，在抗肿瘤的治疗中取得一定疗效。现将蟾酥抗肿瘤作用的研究综述如下。
       1  蟾酥的活性成分
        蟾酥的化学成分复杂，目前已确定结构的化合物主要有以下几类：
       
       蟾毒配基类(bufogenins)：为脂溶性成分。蟾酥中含有其中15种成分，其中含量最高的前3种成分：华蟾毒精（CB）(4.1%～5.6% )、脂蟾毒配基(RBG)(1.7%～5.5% )和蟾毒灵(BL)(1.25%～2.4% )［2］。
        蟾蜍毒素类(bufotoxins)：为水溶性成分。该类化合物包括：蟾蜍甾二烯类、强心甾烯蟾毒类、吲哚碱类、醇类及多糖、氨基酸、肽类、肾上腺素等［3］。
       
       蟾毒色胺类(bufotenines)：为水溶性成分。已明确的化合物有5羟色胺、蟾毒色胺、蟾毒季胺、蟾蜍塞宁、脱氢蟾毒色胺、蟾毒色胺氢溴酸盐等［3］。见图1。
       2  蟾酥的抗肿瘤作用及作用机制
        蟾酥对小鼠肉瘤S180、兔BP瘤、子宫颈癌、腹水型肝癌等均有抑制作用。延长患精原细胞癌、腹水癌和肝癌小鼠的生存期，试管中对白血病细胞有抑制作用。蟾酥能不同程度地防治化疗和放疗引起的白细胞下降，对正下降者用蟾酥可回升，且不再下降［4］。
       2.1  肝癌范健等用乳化聚合法制备的华蟾酥精明胶微球选择性地栓塞肝窦前动脉，显示了较好的抗肝癌作用。用华蟾素注射液与蟾蜍注射液治疗原发性肝癌有效率52.1％、治疗肝癌有效率64.4％。复方蟾龙丸治疗原发性肝癌137例，有效率48.2％；复方蟾酥片治疗肝癌120例，有效率达50％［5］。蟾毒灵(BL)对SMMC7721细胞具有显著的细胞毒作用，形态学和DNA片段化检测证实BL诱导的细胞死亡以凋亡为主；抑癌基因p21wafl／cipz在BL诱导下表达上调。初步证实，BL通过上调p21wafl／cipz表达，下调增殖细胞核抗原(PCNA)表达，从而抑制肝癌细胞生长［6］。黄应申等［7］探讨了脂蟾毒配基(RG)诱导人肝癌Bel7402细胞凋亡的作用机制，结果表明，RG可诱导人肝癌细胞Bel7402细胞凋亡，其诱导作用可能是通过线粒体通路实现的。
       2.2  胃癌孟书聪等［8］
       通过观察脂蟾毒配基对体外培养的人胃癌BGC823细胞系细胞的干预，以及与细胞色素C和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶活化的关系，结果表明脂蟾毒配基抑制人胃癌BGC823细胞生长并诱导细胞发生凋亡，其诱导凋亡的作用机制与线粒体通路有关。
       
       蟾毒灵（BL）与低分化胃癌细胞系MGc803作用48 h，即可显著抑制细胞生长，IC50约为0.1 mol/L。BL抑制MGc803生长的机制是细胞核染色质凝集碎裂、DNA损伤、胞浆RNA含量下降，导致细胞死亡。经流式细胞技术等证实，凋亡主要发生在G1/G0期，细胞凋亡率随药物浓度和作用时间的增加而增高［9］。
       2.3  结肠癌
       蟾酥注射液对小鼠S180有抑制作用，而对人结肠癌HT29裸鼠移植性肿瘤作用不明显［10］。蟾蜍灵能够诱导结肠癌细胞凋亡，在细胞凋亡过程中，胞内Ca2+明显升高，说明Ca2+ 在蟾蜍灵诱导结肠癌细胞凋亡过程中起重要作用［11］ 。
       2.4  膀胱癌
       李墨林等［12］将BTT739肿瘤细胞接种T739小鼠，随机分组，分别注射生理盐水、蟾酥注射液和丝裂霉素（C），测定蟾酥对荷瘤小鼠的抑瘤率，荷瘤生存时间，腹腔巨噬细胞活性。蟾酥组小鼠的抑瘤率为50.5%，荷瘤生存时间为31.3 d，小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率为36%。结果表明，蟾酥可以直接抑制小鼠膀胱肿瘤生长，延长小鼠荷瘤生存时间，提高小鼠免疫力可能是蟾酥抗小鼠肿瘤生长的重要机制。
       2.5  白血病蟾酥注射液对指数生长期的白血病HL60细胞24，48，72 h的作用研究发现，HL60细胞凋亡指数高于阴性对照组；显示蟾酥注射液能抑制白血病HL60细胞增殖及诱导其凋亡，并具有时间和剂量依赖性［13］。蟾蜍灵在0.100 0～0.500 0 μmol/L浓度之间作用于白血病K562细胞，可明显诱导其向单核/巨噬细胞分化。蟾蜍灵对K562细胞有极强的生长抑制和诱导凋亡作用即可明显诱导白血病细胞的凋亡，凋亡率呈剂量和时间依赖性［13］。蟾酥制剂诱导白血病细胞U937和ML1细胞凋亡的报道较少。
         
       由此可见，蟾酥及其有效成分能诱导白血病HL60、K562、U937、ML1等细胞凋亡。
       2.6  骨肉瘤对蟾酥水提取物的研究，发现其对骨肉瘤U2OS细胞株有明显的生长抑制作用，且其作用有时间、剂量依赖性。细胞增殖活力显示不同蟾酥水提取物对U2OS细胞株，呈明显的时间—效应关系及浓度—效应关系，在作用72 h后，其IC50值为(97.96±8.23) μg/ml。FCM分析显示其具有促进U2OS凋亡的作用，并随着浓度的增加而增加。细胞周期分析发现蟾酥水提取物主要阻滞U2OS于G0/G1期，阻滞其向S期进程［14］。
       2.7  淋巴瘤杨琳等［15］进行了蟾酥脂溶性提取物对贴壁的Hela细胞和T淋巴瘤细胞的生长抑制作用实验。结果显示，各实验药物对体外培养的Hela细胞及T淋巴瘤细胞均有一定杀伤作用，其损伤作用的强弱同实验药物的浓度和作用时间成正相关；即随药物浓度的增加及培养时间的延长，其抑瘤作用呈现增强趋势；蟾酥脂溶性提取物抑制生长T淋巴瘤细胞，在浓度0.001 5g/L 即可显著抑制，半数抑制质量浓度(IC50)约为0.001 2 g/L。抑制Hela细胞，在质量浓度0.003 0 g/L 即可显著抑制，半数抑制质量浓度(IC50)约为0.002 4 g/L。
       3  蟾酥的临床应用现状及不良反应
       目前，蟾酥在临床上主要应用于乙型病毒性肝炎、肿瘤、感染性疾病的治疗，均取得了很好的治疗效果。同时，蟾蜍的鲜品或制成品对哮喘病、小儿疳证、硬皮病等疑难杂症亦具有较好的治疗效果。
       
       但是，蟾酥的毒性较大，过量服用蟾酥可出现舌头发麻、恶心呕吐、胸部不适、心中烦躁不安、心律不齐并伴有抽搐等症状；临床应用不当可导致急性肾衰、心律失常、休克；其分泌液误入眼中易造成角膜损伤。
       4  前景展望
        综上所述，蟾酥的抗肿瘤作用已为试验研究和临床研究所证实，分离、纯化蟾酥中抗肿瘤有效成分，开发出新型活性显著、毒副作用小、质量可控的抗肿瘤新药，能够为肿瘤的治疗带来新的曙光。
       【参考文献】
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       ［5］高艳荣，张 莉，张 磊.蟾酥及其有效成分的药理作用及机制研究进展［J］.武警医学院学报，2003，12(5): 406.
       
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       ［7］黄应申，肖军军，孟书聪，等.脂蟾毒配基通过线粒体途径诱导人肝癌Bel7402细胞凋亡的研究［J］.中国肿瘤临床，2006，33(20):1141.
       
       ［8］孟书聪，董晓敏，肖军军，等.脂蟾毒配基对人胃癌BGC823细胞系细胞生长的干预效应［J］.中国临床康复，2006，10 (43):138.
       
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       ［12］李墨林，舒晓宏，刘用楫，等. 蟾酥对小鼠膀胱癌的抗癌作用研究［J］.中医药学刊，2004，22(4):651.
       
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       ［14］尹军强，沈靖南.蟾酥水提取物抗骨肉瘤作用的体外研究［J］.中国骨肿瘤骨病，2004，3(5):303.
       
       ［15］杨 琳，段鹏飞，王 琼，等.蟾酥脂溶性提取物的分离分析及其镇痛抗肿瘤作用的研究［J］.氨基酸和生物资源，2006，29(1):64.