文章标题 全文   多个检索词，请用空格间隔。

       【摘要】 
       目的探讨祛淤生新法的代表方剂生化止血饮对药物流产后大鼠子宫蜕膜超微结构的影响。方法40只受孕大鼠随机分为正常孕鼠组、模型组、益母草组、生化止血饮组, 电镜下观察药物流产后大鼠子宫蜕膜超微结构。结果正常孕鼠组均可见体积较大的蜕膜细胞；模型组均可见蜕膜细胞体积减小，细胞核曲度增加；益母草组部分蜕膜细胞开始凋亡，核皱缩；生化止血饮组蜕膜细胞已经凋亡被吞噬，未见蜕膜细胞。结论生化止血饮可明显促进药流后大鼠子宫蜕膜细胞调亡脱落并加速子宫内膜修复。
       【关键词】  祛淤生新； 电镜； 生化止血饮； 子宫蜕膜； 超微结构
        Effect of  Eliminating Blood Stasis to Promote Regeneration of Blood on Ultrastincture of Pregnancy Decidua after Medical Abortion in RatsYU Yan, ZHANG Yunzhu, JIN Furui, BIAN Xiaoyan, WU Xiaoke, HOU Lihui1.Affiliated NO.1 Hospital, Heilongjiang University of Chinese Medicine, Harbin,150040,China; 2.Graduate Student of 2006, Heilongjiang University of Chinese Medicine, Harbin 150040, China; 3.Affiliated Zhongshan Hospital, Dalian University Dalian,116001,ChinaAbstract:ObjectiveTo investigate the effect of Shenghuazhixueyin from Eliminating blood stasis to promote regeneration of blood on ultrastructures of pregnancy decidua after drug-induced abortion.Methods40 rats were divided into normal pregnant group,model group,Yimucao group and Shenghuazhixueyin group,the ultrastructures of pregnancy decidua after drug-induced abortion was observed under electron microscope.ResultsNormal pregnant group had normal decidual cell with big volume; model group had decidual cell with volume reducing and the cell nucleus curvature was inreased; inYimu cao group partial decidual cell began to apoptosis, the nuclear shrinked; in Shenghuazhixueyin group, the pregnancy decidua cell underwent and was swallowed, and the decidual cell was not been observed.ConclusionShenghuazhixue yin from eliminating blood stasis to promote regeneration of blood can promote the pregnancy decidua cell apoptosis obviously and accelerate the endometrium regeneration.
       Key words:Eliminating blood stasis to promote regeneration of blood；Electronic microscope；   Shenghuazhixueyin；Pregnancy decidua；  Ultrastructures
       
       药物流产即抗孕激素药物米非司酮(mifepristone)配伍前列腺醇素终止早孕在全世界范围内得到了广泛的应用,获得了很好的临床效果，有效率达95%。但阴道出血量多和出血时间长是药物流产至今困扰医务工作者的主要弊端，经研究表明出血量多和时间长的主要原因，是蜕膜残留。药物流产属中医“堕胎”范畴,药流后阴道出血属中医的“产后恶露不绝”范畴, 蜕膜残留中医辨证为血淤。《灵枢》云:“有所堕坠,恶血留内”。唐容川《血证论》:“凡系离经之血与荣养周身之血,已暌绝而不合,此血在身,不能加于好血,而反阻新血之化机,淤不去,则血不止,旧血不去,新血不生”。因此只有祛淤而生新才能达到止血的目的［1］。
       
       博士研究生导师王秀霞教授以祛淤生新的原则治疗药物流产后出血，经严格筛选组方生化止血饮，用于临床治疗,总有效率达97.33%［2］，起到了药物刮宫的作用，避免了手术器械对子宫的损伤，临床值得推广。本文旨在探讨祛淤生新法代表方剂生化止血饮对药物流产后大鼠子宫蜕膜超微结构的影响。
       1  材料
       1.1  动物采用清洁级Wistar大鼠（长春高新医学动物实验研究中心提供）。雌性大鼠体质量（200±5）g性成熟而未生育，雄性大鼠体重（200±5）g性成熟，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供，动物合格证号SCXK-（吉）2003-0004。均以标准饲料饲养。
       1.2 药品生化止血饮（当归，山楂，王不留行，泽兰，炮姜，炙甘草等）为提纯后的天江中药，用蒸馏水配制成浓度为0.5 g/ml的中药汤剂。益母草颗粒冲剂由广西灵峰药业有限公司生产，用蒸馏水配制成浓度为0.6 g/ml的益母草溶液。米非司酮25 mg/片、米索前列醇200 μg/片，均由北京紫竹药业有限公司生产，分别磨碎于蒸馏水中，药物含量分别为0.674 mg/ml和5.4 μg/ml。
       2  方法
       2.1  孕鼠分组与给药方法雌鼠与雄鼠2∶1合笼，次日晨进行阴道涂片低倍镜检查，以发现精子的当天为妊娠的第1天。将40只妊娠的Wistar大鼠随机分为4组，每组10只，分别是正常孕鼠组、模型组、益母草组、生化止血饮组。除正常孕鼠组外，均于妊娠第7天早晨8：00按体重灌胃，给予米非司酮3.375 mg /kg，1次/d，连续2 d。于妊娠第11天早晨8：00时给予米索前列醇54 μg/kg按体重灌胃1次。另外于妊娠第7天上午10：00分别给正常孕鼠组、模型组等量生理盐水10 ml/kg；益母草组益母草冲剂5 g/kg；生化止血饮组生化止血饮5 g/kg均灌胃给药，1次/d，连续5 d。用药结束后（妊娠第11天中午12：00）处死，解剖,取子宫组织置于4℃条件下，用3%的戊二醛液固定。
       2.2  实验方法切取1 mm各组大鼠子宫组织块，置于4℃条件下，用3%的戊二醛液固定［3］。0.1 mol/L磷酸缓冲液（PBS）冲洗，0.1mol/L锇酸固定，双蒸水连续冲洗，用50%，70%，90%，100%丙酮逐渐脱水，室温下包埋剂浸透过液，包埋修块，半薄切片Humphne染色，定位，超薄切片，电子染色，于透射电镜下进行超微结构观察。透射电镜型号JEM-1220,产地日本。
       2.3  电镜对子宫内膜超微结构的观察
       2.3.1  正常孕鼠组均可见体积较大的蜕膜细胞,细胞排列整齐，间隙紧密。细胞核大而圆、核内以常染色质为主，细胞浆内含丰富的细胞器：线粒体致密、粗面内质网丰富大多为小泡状，并可见高尔基复合体、核糖体等。见图１。
       2.3.2  模型组均可见蜕膜细胞体积减小，细胞间隙明显增大，细胞核曲度增加，异染色质增多且靠近核膜，胞浆致密，可见粗面内质网和少量空泡样变的线粒体。可见次级融酶体。见图２。
          
       2.3.3  益母草组部分蜕膜细胞开始凋亡，细胞界限不清，核膜曲度明显增加，核皱缩出现核分叶，细胞基质电子密度明显增加，线粒体明显减少并萎缩，部分粗面内质网扩张且脱颗粒。见图3。
       2.3.4  生化止血饮组蜕膜细胞已经凋亡被吞噬，未见蜕膜细胞，仅在间质内见蜕膜样细胞，蜕膜样细胞呈多边形，细胞核染色质浓缩成不同形状和大小的块状，细胞核膜曲度增加，细胞膜下陷，粗面内质网扩张明显呈空泡状。见图４。
        
       3  讨论
        生化止血饮可明显促进药流后大鼠子宫蜕膜细胞凋亡脱落并加速子宫内膜修复。
        正常孕鼠组均可见体积较大的蜕膜细胞,细胞排列整齐，间隙紧密。细胞核大而圆、核内以常染色质为主;胞浆内含丰富的细胞器［4］，这是妊娠大鼠的子宫蜕膜的正常发育状态。模型组给予药物流产药物，米非司酮和米索，米非司酮是孕激素拮抗剂的一种,作用于早孕的子宫蜕膜,与孕激素竞争受体,使蜕膜细胞蛋白合成功能受到抑制［5］，线粒体减少并空泡样变，可见次级溶酶体［6］，蜕膜细胞皱缩，蜕膜细胞的生长受到抑制，但是大部分没有凋亡脱落。益母草组在给予米非司酮和米索的同时还给予中药益母草，电镜观察部分蜕膜细胞开始凋亡，细胞器受损严重将要被吞噬消失。生化止血饮组在米非司酮和米索的基础上还给予祛淤生新法的代表方剂生化止血饮，电镜下观察蜕膜细胞已经凋亡被吞噬，未见蜕膜细胞，仅在间质内见蜕膜样细胞，蜕膜样细胞同样呈现皱缩凋亡状态，此外就是呈现正常子宫内膜形态，子宫内膜细胞未见明显的细胞器损伤，此时的子宫内膜已经开始修复。
        药物流产后阴道出血时间长，中医认为是气虚、血淤，冲任受损,血不归经淋漓不止。祛淤生新法代表方剂生化止血饮方由当归、泽兰、山楂、炮姜、王不留行、炙甘草等组成，当归补血活血，祛淤生新，其气轻而辛,又能行血,补中有动,行中有补［7］;泽兰为活血化淤之品,活血养血,祛淤生新［8］；生山楂入血分散淤血消肿，兴奋子宫增强收缩;王不留行活血止痛；炮姜色黑入营,温经止血,助当归、炙甘草以生新,佐泽兰、王不留行而化淤;炙甘草助当归补中生气血，共奏益气活血、祛淤生新之功。从临床效果来看, 生化止血饮不但能够补血扶正,而且往往可以使宫内残留物排出,增强子宫收缩力,促进子宫复旧。方中甘草尚有抗炎作用［9］，可避免子宫内膜修复增生过程中发生炎性改变，减少宫腔感染机会。起到了“淤血自去,新血渐生”之功效。
        生化止血饮经过十多年的临床应用，由于无副作用且价格经济，疗效确切，为广大女性患者避免了药物后再刮宫的创伤，值得推广应用。生化止血饮的应用为妇产科中西医结合终止早孕,开拓了新的前景。
       【参考文献】
         1］王海燕,邱幸凡,张六通,等.“祛瘀生新”内涵及机理探讨［J］.中医药学刊，2006,24(8):1494.
       
       ［2］于燕,吴宁,王秀霞.生化止血饮对药物流产后的临床观察［J］.中医药学报，2003,31(4):44.
       
       ［3］孙敬霞,邹恩昌,韩燕燕,等.米非司酮药物流产时绒毛膜及蜕膜组织的超微结构的改变［J］.中国实用妇科与产科杂志，2001,17(5):293.
       
       ［4］胡志英,方马荣,王伊萍.米非司酮联合清热祛瘀汤抗早孕孕妇蜕膜和绒毛超微结构变化［J］.湖南医学，2000,17(4):256.
       
       ［5］王兰银,王蕊,张毅光,等.电子显微镜观察B超对早孕绒毛超微结构的影响［J］.中国妇幼保健，2008,23:1917.
       
       
       ［6］金明.米非司酮配伍抗早孕的绒毛蜕膜超徽结构和临床观察［J］.广西医科大学学报，1994,11(4)：411.
       
       ［7］张焕,王一涛,严 灿,等.当归与川芎药理作用研究进展与比较［J］.时珍国医国药，2008,19(2):293.
       
       ［8］刘君.泽兰的化学成分及药理研究进展［J］.辽宁中医药大学学报，2008,10(1):23.
       
       ［9］Inhibition of inducible nitric oxide synthase and cyclooxygenase Ⅱ by platycadon grandiflorum saponinsvia suppression of nuclear factor-kappa B activation in RAW 264.7 cells［J］. Life Sciences, 2005,76(20):2315.