丁香普通粉与超微粉中丁香酚体外溶出度的比较
作者：刘莉， 刘强，吴伟健
作者单位：南方医科大学中医药学院，广东 广州 510515
《时珍国医国药》 2010年 第5期
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【摘要】
目的研究超微粉碎对丁香中丁香酚体外溶出度的影响。方法采用不同pH值的释放介质，模拟胃肠道各段的pH条件；按溶出度转篮法，采用高效液相色谱法测定丁香普通粉与超微粉中丁香酚的体外溶出度。结果丁香超微粉最大累积溶出度为72.17%，粗粉最大累积溶出度为52.42%。结论超微粉碎能促进丁香药材中丁香酚的体外溶出, 超微粉碎技术应用于丁香具有可行性和必要性。
【关键词】 丁香； 高效液相色谱法； 超微粉； 溶出度
Comparison of External Dissolution Rate of Eugenic Acid from Common Powder and Superfine Powder of Flos Caryophylli
LIU Li, LIU Qiang, WU Weijian
College of Traditional Chinese Medicine, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China
Abstract:ObjectiveTo study the effect of ultramicro smash technology on external dissolution rate of eugenic acid from common powder and superfine powder of Flos Caryophylli. MethodsThe different segments of gastro-intestine were simulated by dissolution medium with different pH value, and the external dissolution rate of eugenic acid from common powder and superfine powder of flos Caryophylli was determined by blasket stirring method and HPLC.ResultsThe largest cumulative dissolution of Superfine powder was 72.17% percent, the largest cumulative dissolution of common powder was 52.42% .ConclusionUltramicro smash technology can promote the dissolution of eugenic acid in Flos Caryophylli, and application of ultramicro smash technology to Flos Caryophylli is feasible and necessary.
Key words:Flos Caryophylli； HPLC； Superfine Powder； Dissolution
丁香为桃金娘科植物丁香Eugenia caryophllata Thunb.的干燥花蕾。功能温中降逆，补肾助阳，用于治疗脾胃虚寒，呃逆呕吐，食少吐泻，心腹冷痛，肾虚阳痿。丁香富含挥发油，其药材普通粉进入体内后，药材粉末须通过细胞壁浸润、溶胀和在浓缩梯度的作用下缓慢释放，又因挥发油水溶性差，严重影响药物在体内的吸收。采用超微粉碎技术，细胞破壁，药材中的水性成分和油性成分直接暴露出来，形成“固体乳化”的结构，从而提高有效成分的释放速度和释放量［1,2］。近年来对超微粉碎药材的溶出研究较多［3,4］，但针对含挥发油类的中药尚未见报道，实验对丁香超微粉与普通粉中丁香酚的体外溶出度进行了比较，结果将为超微粉碎对含挥发油类药材的影响提供理论依据。
1 仪器与试药
1.1 仪器挥发油测定器（符合《中国药典》Ⅰ部附录XD挥发油测定法［5］标准）；FW型高速万能粉碎机（武汉理科光电技术有限公司）；BMF-6型倍力微粉机（济南倍力粉技术工程有限公司）；JL9200激光粒度分析仪(济南微纳颗粒技术有限公司)；PHS-2C型精密pH计（上海金鹏分析仪器有限公司）；RCZ-8A 智能药物溶出仪（天津大学精密仪器厂）；Angilent HP1100高效液相色谱仪（美国Angilent公司）。
1.2 试药丁香（广州广弘药材有限公司，经南方医科大学中医药学院药用植物与鉴定教研室讲师陈兴兴鉴定为为桃金娘科植物丁香Eugenia caryophyllata Thunb.的花蕾），丁香酚对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110725-200209）。高效液相色谱用甲醇为色谱纯，水为高纯水，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 粉体制备丁香普通粉（平均粒径160 μm，采用FW型高速万能粉碎机制备）,丁香超微粉（平均粒径9.25 μm，采用BMF-6型倍力微粉机制备）。
2.2 含量测定方法
2.2.1 色谱条件Angilent Hypersil ODS2柱（4.6 mm×250 mm×5 μm）；流动相：甲醇-水（60∶40）；柱温：30℃；流速：1.0 ml/min；检测波长：280 nm；进样量：10 μl。
2.2.2 对照品溶液制备取丁香酚对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 ml含1 mg的溶液，做为丁香酚对照品贮备液。
2.2.3 标准曲线的制备分别精密吸取对照品贮备液0.2，0.4，0.8，1.6，2.4，3.2 ml至10 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。各精密吸取10 μl注入液相色谱仪中，测定，测得峰面积，以对照品浓度为横坐标，峰面积为纵坐标做标准曲线，得回归方程Y=8 140.9X+23.132，r=0.999 9，丁香酚在0.02～0.32 mg·ml-1范围内线性关系良好。
2.2.4 供试品溶液的制备精密吸取溶出介质5 ml，置10 ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.45 μm微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。
2.2.5 精密度实验精密吸取对照品溶液，连续进样6次，测定峰面积，RSD=0.86%，表明仪器精密度良好。
2.2.6 稳定性实验取供试品溶液，每隔2 h进样测定1次，共进样6次，测定峰面积，RSD＝1.28%。表明样品溶液在10 h内测定稳定。
2.3 溶出实验
2.3.1 溶出介质制备模拟人体胃肠道中pH的变化情况，制备Ⅰ～Ⅳ 4种溶出介质。结果见表1。表1 不同pH溶出介质的组成（略）
2.3.2 不同pH条件下丁香酚溶出度的测定分别取丁香普通粉、超微粉各3 g，分别置于900 mlⅠ号溶液中，采用转篮法［5］，转速120 r/min，温度（37±0.5）℃，定时取样5 ml，并迅速补充相同温度的Ⅱ～ Ⅳ号溶出介质5 ml，取出的样品按“2.2.4”项下操作，测定出各时段溶出介质中丁香酚的浓度，计算累积溶出百分率。结果见表2及图1。表2 丁香普通粉和超微粉在不同pH溶出介质中的累积溶出百分率（略）
3 小结
3.1 溶出介质的选择为更好地模拟药物在胃肠道中的转运情况，实验参照文献［6］，配制了不同pH值的缓冲液做为溶出介质，设定依据为：药物在胃内停留时间约2 h，小肠停留约4 h。以期使药物更接近在体内的真实溶出状况,准确评估药物的溶出特性。
3.2 实验结果讨论从表2的结果看出，丁香超微粉在模拟人体胃肠道溶出介质中的最高累积溶出百分率（72.17%）较丁香粗粉（52.42%）提高了20%，证明超微粉碎的确可以大大提高丁香中丁香酚的的体外溶出度，这可能与丁香超微粉碎后形成的固体乳化结构有关。其原理和体内的溶出情况在下一步实验中进一步探讨。
从图1可以看出，丁香中丁香酚在溶出的起始阶段（15～60 min）有一个很快的释放过程，随后丁香的溶出渐渐平稳，丁香超微粉在2 h后处于平稳阶段，丁香粗粉则在3 h后处于平稳阶段，4 h后溶液中的丁香酚浓度均有所下降。这与文献报道［7］相一致，提示丁香在肠中会有部分破坏，因此宜在胃中快速溶出为好。
【参考文献】
［1］杨永美.超微粉碎技术在中药领域的应用［J］.中国药业,2006,15(12):58.
［2］刘 莉, 徐新刚, 代 龙.川芎不同入药形式的体外溶出与药效学比较［J］.中成药,2002,24(4):246.
［3］司 南,杨 健,边宝林.不同粒度麻杏石甘汤配方药材超微粉中麻黄碱及伪麻黄碱的溶出率比较［J］.中国中药杂志，2006,31(11):884.
［4］李巧燕,李春华,林 强.超微三七饮片中皂苷的溶出动力学研究［J］.现代食品与药品杂志,2007,17(2):27.
［5］国家药典委员会.中国药典，Ⅱ部［S］.北京：化学工业出版社，2005：附录X D,XC.
［6］古丽萍，张福琴，盛 杰，等.不同pH条件下4种布洛芬制剂体外释放度研究［J］.解放军药学学报，1999,15(5):48.
［7］张纯，赵 阳，郭 澄，等.两种含丁香油制剂的体外溶出度测定［J］.北京针灸骨伤学院学报，2001,8(1):14.