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       【摘要】 
       目的建立固肾丸的质量标准。方法采用显微鉴别对药材中具有专属性的粉末特征进行鉴别；以5-羟甲基糠醛、熟地与当归对照药材为对照，采用薄层色谱法对固肾丸中的熟地和当归进行鉴别。结果薄层色谱斑点清晰，重复性好，阴性对照无干扰。结论该方法简便、准确可靠，可用于该制剂的质量控制。
       【关键词】  固肾丸； 质量标准； 显微鉴别； 薄层色谱法
        固肾丸是太和医院根据经验方研制的医院制剂。本品由熟地、当归、制何首乌等多味中药制成，具养血健脾、温肾固本的功效，用于肝肾亏虚所致的四肢无力、腰膝酸软、女子垂体功能障碍、宫冷不孕以及面部黄褐斑等症。固肾丸仅建立了淫羊藿苷成分的含量测定方法［1］。为有效地控制该制剂质量，保证临床疗效，采用显微鉴定对固肾丸中黄芪、熟地、党参、香附等药材进行鉴别，采用薄层色谱法对该制剂中的熟地和当归进行定性鉴别。
       1   仪器与试药
        ZF-501型多功能紫外透射仪（上海顾村电光仪器厂）；硅胶G及硅胶GF254（青岛海洋化工厂）。5-羟甲基糠醛对照品（中国药品生物制品检定所，批号为111626-00503）；熟地对照药材（中国药品生物制品检定所，批号为121196-200702）；当归对照药材（中国药品生物制品检定所，批号为120927-200613）；试剂均为分析纯。固肾丸（太和医院制剂室生产，批号为20071124）。
       2  方法与结果
       2.1  显微鉴别取本品按常规方法制片置显微镜下观察。
       2.1.1  黄芪纤维多成束，细长，壁极厚，非木化，次生壁与初生壁多少分离，表面有较多不规则纵裂纹，断端纵裂成帚状或较平截。
       2.1.2  当归纺锤形韧皮薄壁细胞壁稍厚，表面有极微细的斜向交错的网状纹理，有的具菲薄的横隔。
       2.1.3  熟地薄壁细胞淡棕色，多皱缩，细胞界限不清，含棕色类圆形或长梭形核状物，直径6～14 μm。
       2.1.4  何首乌草酸钙簇晶20～80 μm，有的呈矩圆形，有的与较大的类方形结晶合生。
       2.1.5  川芎草酸钙结晶圆簇状或相互散离，直径5～20 μm，存在于长形皱缩的薄壁细胞中。
       2.1.6  党参有节联结乳汁管直径约至15 μm，侧面由短细胞将乳汁管联结成网状，管内充满颗粒状及油滴状物。木栓石细胞类斜方形或多角形，大多一边或一端尖突，直径26～57 μm，壁较厚，纹孔稀疏。
       2.1.7  香附分泌细胞类圆形，含红棕色或黄棕色分泌物，其周围7～8个薄壁细胞作放射状排列。
       2.1.8  覆盆子非腺毛单细胞，多平直，少数略弯曲或成钩状，完整者长42～190 μm，直径9～18 μm，壁极厚，木化，胞腔线形或稍明显，有的表面可见单或双螺状裂纹。
       2.2  化学鉴别
       2.2.1  氨基酸反应取本品10 g，剪碎，加乙醇40 ml，置水浴中回流30 min，滤过，滤液浓缩至3 ml，备用。取滤液数滴，点于滤纸上，加茚三酮试液（临用新制）2～3滴，于100℃烘数分钟，显紫色斑点。
       2.2.2  黄酮类反应取上述滤液约1 ml，加镁粉少量振摇，再滴加浓盐酸数滴，水浴加热3～4 min，溶液显樱红色。
       2.3  薄层色谱鉴别
       2.3.1  熟地薄层色谱鉴别取本品10.0 g，剪碎，加乙醇30 ml，置水浴中回流30 min，滤过，滤液浓缩至约5 ml，作为供试品溶液。取5-羟甲基糠醛对照品，加乙醇制成每毫升含0.5 mg的溶液；另取熟地对照药材3.0 g，同法制成对照药材溶液。再取去熟地阴性样品，同法制成阴性样品溶液。照薄层色谱法［2］试验，吸取上述3种溶液各10 μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚（60～90℃）-醋酸乙酯（1∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗棕色斑点，而阴性对照品无此斑点（见图1）。
       2.3.2  当归薄层色谱鉴别取本品5.0 g，剪碎，加乙醚20 ml，超声提取30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1 ml使溶解，作为供试品溶液。另取当归对照药材0.25 g，同法制成对照药材溶液。再取去当归阴性样品，同法制成阴性样品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯（4∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的亮蓝色主荧光斑点，而阴性对照品无此荧光斑点（见图2）。
       3   讨论
        处方中熟地黄滋阴补血，益精填髓；当归补血活血，调经止痛，润肠通便。两者均为方中主要药味，故对它们进行薄层色谱鉴别作为该制剂的质量标准。熟地黄炮制后5-羟甲基糠醛(5-HMF)含量有较大的增加，且为有效成分之一，故以其为对照品对熟地进行鉴别［3，4］。实验结果显示，本文所述定性鉴别方法所得结果斑点清晰，分离度好，阴性对照无干扰。并且通过三批样品的实验观察，发现稳定性好，重复性好。
        该制剂为生药原粉入药，故采用了显微鉴别的方法对其中当归、党参、香附等进行鉴别，选取各药味在该制剂中具有专属性的显微特征作为鉴别依据，具有快速、简便、覆盖面大的特点［5］。
        制剂中的枸杞、女贞子、熟地、菟丝子、党参等都含有黄酮类成分和多种氨基酸［6～10］，故制订了氨基酸和黄酮类鉴别方法。但化学鉴别专属性不强，且多种药材都含有同类化学成分，故仅作为辅助鉴别手段，将显微鉴别、化学鉴别和薄层色谱鉴别结合起来建立固肾丸质量控制标准以控制该制剂质量。
       【参考文献】
         　　［1］李元宏，陈吉炎，朱海涛，等. 高效液相色谱法测定固肾丸中淫羊藿苷的含量［J］. 中国实验方剂学杂志，2005，11（5）：22.
       
       ［2］国家药典委员会. 中国药典，Ⅰ部［S］.北京:化学工业出版社，2005：附录31.
       
       ［3］王宏洁，金亚红，李鹏跃，等. 鲜、生、熟地黄药材中3种活性成分含量的比较［J］. 中国中药杂志，2008，33（15）：1923.
       
       ［4］李 恒，高 晔. 对市场三产地的熟地黄有效成分比较研究［J］. 中国现代医生，2009，47（10）：42.
       
       ［5］王宝琹. 中成药质量标准与标准物质［M］. 北京:中国医药科技出版社，1994：10.
       
       ［6］金 华. 中药女贞子化学成分的研究现状［J］. 吉林化工学院学报，2008，25（2）：35.
       
       ［7］阎 超，胡 歌，红买尔旦·马合木提. 菟丝子的化学成分及药理作用研究概况［J］. 中国药物与临床，2005，5（9）：683.
       
       ［8］陈克克. 中药党参的研究概况［J］. 西安文理学院学报（自然科学版），2008，11（2）：33.
       
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       ［10］郑国琦，胡正海. 宁夏枸杞的生物学和化学成分的研究进展［J］. 中草药，2008，39（5）：796.