文章标题 全文   多个检索词，请用空格间隔。

       【关键词】  抗血栓药材；,,筛选实验
       摘要：目的观察抗血栓药材水提物的活血化淤作用。方法采用小鼠脑偏瘫、血小板聚集、玻璃毛细管法、高脂血症模型、急性血淤症模型等实验方法，测定药物对小鼠脑血栓的保护率，血小板聚集的电阻率、凝血时间、血脂水平及血液粘度的影响。结果山楂叶、山栀子、苦丁茶、两面针、山绿茶对小鼠脑血栓模型有一定保护作用；苦丁茶、山楂叶、田七叶等对血小板聚集有一定抑制作用；山绿茶、肉桂皮、绞股蓝、苦丁茶、两面针、田七叶、山栀子等具有抗凝作用；苦丁茶、两面针、山楂叶、山绿茶、绞股蓝、田七叶等具有降脂作用；苦丁茶、山绿茶、田七叶、山楂叶、山栀子等可改善急性“血淤”证大鼠血液流变学指标。结论初筛结果为开发利用抗血栓药材提供了科学依据。
       关键词：抗血栓药材；  筛选实验
       The Screening Studies on the Water Extracts of Antithrombus Crude Drugs
       ZHONG Zhengxian,  LI Kaishuang, LI Cuihong, CHEN Xuefen, CHEN Xiaojun, ZHOU Guifen, LI Yanjing, CHEN Jingmin, LI Youdi
       (Guangxi Institute of TCM, Nanning 530022, China)
       Abstract：ObjectiveTo study the effect of promoting blood circulation and removing blood stasis. Methods The protecting rate of drug on cerebral thrombus in mice, the resistivity of aggregation, blood coagulation time, blood lipid levels and blood viscosity were determined by the experimental methods of cerebral hemiplegia, platele aggregation, glasscapillary, hyperlipidemia model and acute blood stasis model. Results Cratagusscabrifolia, Cardenia jasminoides, Folium ilicis kluaingchae immatrei, Zanthoxylum nitidum, Ilexhainanensis Merr on cerebral thrombus have definite protecting effect; Folium ilicis kudingchae immaruri, Cratagation cabrifolia, Panax notoginseng on platele aggregation have definite inhibition; Ilex hainanensis, Cinnamonum cassia, Gynostemma pentaphyllum, Folium ilicis kuaingchae immaturi, Zanthoxylum nitidum, Panax notaginseng, Gardenia jasminoides have anti-coagulation; Folium ilicis kudingchae immaturi, Zanthoxylum nitidum, Cratagusscabrifolia, Ilex hainanensis Merr, Gynostemma pentapgynum, Panax notoginseng have lipidlowering actions; Folium ilics kudingchae immaturi, Ilex hainanensis, Panax notoginseng, Cratagusscabrifolia, Gardeniz jasminiaes can improve the indexes of blood Rheology in acute blood stasis syndrome in rat. ConclusionThe results provids scientific basis for developing and using antithrombus crude drugs.
       Key words：Antithtombus crude drug;  Screening test
   
　　临床上血栓形成与脂质代谢紊乱所致的高脂血症，血粘度增高、血小板功能异常等引起的血液理化特性异常有密切关系，可导致冠心病、脑卒中、动脉粥样硬化等心脑血管疾病的发生。因此，血栓性疾病是严重危害人类健康的疾病，抗血栓药物则是治疗血栓性疾病比较有效的方法，从中草药中筛选研究纯天然的抗血栓药物是目前研制新型抗血栓药物的有效途径之一。广西中草药资源丰富，许多医疗机构和群众喜欢用中草药治疗心脑血管病。因此，本文对8种具有广西特色的常用中药材水提物进行抗血栓作用筛选性实验研究。现将实验结果报道如下。
       　　1  器材
       1.1  药物苦丁茶（Folium Ilicis Kudingchae Immaturi）、两面针（Zanthoxylum nitidum）、山绿茶（Ilex hainanensis Merr.）、肉桂（Cinnamonum cassia）、大果山楂叶（Cratagusscabrifolia）、田七叶（Panax notoginseng ）、绞股蓝（Gynostemma pentaphyllum）、山栀子（Gardenia jasminoides）的水提物由广西中医药研究所化学室提供。复方丹参注射液，江苏康恬制药有限公司生产，批号020115。复方丹参片为广州白云中药厂产品，批号为0303426；阿司匹林肠溶片为桂林南药股份有限公司产品，批号030401。盐酸肾上腺素注射液为广州明兴制药厂产品，批号MB3001。血脂康胶囊为北京大维信生物科技有限公司产品，批号20000534。
       1.2  试剂胶原蛋白为Worthington biochemical corporation 产品；腺苷二磷酸钠盐（ADP），中国医药集团上海化学试剂公司产品，批号20010510。血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）测定试剂盒均为四川迈克科技有限责任公司产品。
       1.3  动物昆明种小鼠，体重18~22 g；Wistar大鼠，体重200~250 g，雌雄各半，均为SPF级动物，由广西医科大学实验动物中心提供，许可证号：SCXK桂20030003。
       1.4  仪器QX200型全血血小板聚集仪，上海第一医学院仪器厂生产。722型光栅分光光度计，上海分析仪器三厂产品。MDK3200型全自动血流变测试分析仪，重庆麦迪克科技开发有限公司产品。
       　　2  方法
       2.1  抗脑血栓实验［1］取小鼠100只，随机分为生理盐水组，阿司匹林（80 mg/kg）组和各药材水提物组，每组10只。各药物组灌胃给药1次/d，生理盐水组给予等体积的生理盐水，连续5 d。于末次给药后1 h，小鼠尾静脉注射胶原蛋白及肾上腺素联合诱导剂（胶原蛋白90 μg/只，肾上腺素9 μg/只）。注射后观察15 min内小鼠偏瘫的未恢复数，计算药物对小鼠脑血栓的保护率。
       2.2  对体外大鼠全血血小板聚集的影响［1］取体重200~250 g大鼠，用3%戌巴比妥钠（0.1 ml/100 g）腹腔注射麻醉后，从腹主动脉取血，注入盛有3.8%枸椽酸钠溶液的试管中（血与抗凝剂之比为9∶1），轻轻摇匀后，用微量加样器吸取抗凝血0.5 ml置平底玻璃试管中，再加入0.5 ml台氏液作1∶1稀释，混匀，放入小磁棒，将试管置于全血血小板聚集仪的预温孔内，5~6 min后进行测试，测试时把电铂电板插入试管中，开启“搅拌”、按下“测量键”调零，按下“幅度”键调幅度。给药管将20 μl药液加入抗凝管中混匀调零（对照管加入20 μl生理盐水），再加入ADP 10 μl，记录5 min的电阻值（欧姆）。
       2.3  对小鼠凝血时间的影响［2］取小鼠100只，随机分为对照组，复方丹参片组，各药材水提物组，每组10只。连续灌胃给药7 d，末次给药后40 min，用内径为1 mm的玻璃毛细管插入小鼠眼眶静脉丛中取血，至毛细玻璃管血柱5 cm为止，每隔30 s折断毛细玻璃管一小段，同时用肉眼观察血柱是否移动，检查有无凝血丝出现，以毛细管采血到凝血丝出现的时间为凝血时间，计算各组的均数及方差，并进行组间t检验。
       2.4  对高脂血症小鼠血脂的影响［3］动物高脂血症模型制备：取1~2 d新鲜鸡蛋，去除蛋清，加生理盐水搅拌均匀配成75%蛋黄乳液，于末次用药后2 h除对照组外，每只小鼠ip 0.5 ml。取小鼠110只，随机分为空白对照组、高脂模型组、血脂康组，以及各药材水提物组，每组10只。各用药组灌胃组药1次/d，对照组和模型组给予等体积的蒸馏水，连续10 d。于末次给药后2 h，除对照组外，其余各组小鼠均腹腔注射75%蛋黄乳液0.5 ml/只造成实验性高血脂症。腹腔注射蛋黄乳液后禁食18~20 h，摘除小鼠眼球取血，按试剂盒方法检测TC，TG的含量。
       2.5  对大鼠血液流变学指标的影响［4］取大鼠110只，随机分为空白对照组、血淤模型组、复方丹参片组和各药材水提物组，每组10只。各用药组每天灌胃给药1次，对照组和血淤模型组给予等体积蒸馏水，连续7 d。于第7天除空白对照外，各药物组大鼠均皮下注射盐酸肾上腺素（Adr）0.08 ml/100 g，共两次，每次间隔4 h，在两次注射Adr之间（前后各间隔2 h）将大鼠浸入0℃冰水内5 min。处置后停食，次晨取全血测定血液流变学指标。
       　　3  结果
       3.1  抗脑血栓作用结果见表1。结果表明，山楂叶、山栀子水提物对小鼠偏瘫恢复率在40%，苦丁茶、两面针、山绿茶等在30%恢复率，而肉桂和田七叶仅有20%恢复率。提示这些水提物对小鼠脑血栓具有一定的保护作用。
       表1  药材水提物抗脑血栓作用（略）
       与生理盐水组比较,*P＜0.05,n=10
       3.2  对大鼠全血血小板聚集的影响结果见表2。结果表明，苦丁茶、山楂叶、田七叶水提物大剂量对大鼠全血血小板聚集有一定的抑制作用，其它药材作用不太明显。
       表2  药材水提物对大鼠全血血小板聚集的影响（略）
       与对照组比较, *P＜0.05
       3.3  对小鼠凝血时间的影响结果见表3。结果表明，山绿茶、肉桂皮、绞股蓝水提物能明显延长凝血时间，其次是苦丁茶、两面针、田七叶、山栀子，提示这些水提物具有一定的抗凝作用。
       表3  药材水提物对小鼠凝血时间的影响（略）
       与对照组比较，P*＜0.05，**P＜0.01,n=10
       3.4  对蛋黄乳液引起小鼠高脂血症的影响结果见表4。结果表明，苦丁茶、两面针、山绿茶、山楂叶、绞股蓝、田七叶水提物均能降低血清中TC或TG值，提示具有降血脂作用。
       3.5  药材水提物对大鼠血液流变学指标的影响结果见表5。结果表明，苦丁茶、山绿茶、田七叶水提物和复方丹参片组能降低急性“血淤”证大鼠的全血黏度和血浆黏度以及红细胞压积，具有一定的活血化淤作用。
       表4  药材水提物对小鼠高脂血症的影响（略）
       与对照组比较，△△△P＜0.01；与模型组比较*P＜0.05
       表5  药材水提物对大鼠血液流变学指标的影响（略）
       与正常对照组比较，△△P＜0.01；与血瘀模型组比较，*P＜0.05
       　　4  讨论
       本文采用多种动物模型及实验方法，对具有活血化淤作用的广西常用中药材水提物进行了抗血栓作用的筛选研究，试图寻找能防治血栓病的治疗药物。实验结果表明，山楂叶、山栀子、苦丁茶、两面针、山绿茶对小鼠脑血栓模型有一定保护作用；苦丁茶、山楂叶、田七叶等对血小板聚集有一定抑制作用；山绿茶、肉桂皮、绞股蓝、苦丁茶、两面针、田七叶、山栀子等具有抗凝作用；苦丁茶、两面针、山绿茶、山楂叶、绞股蓝、田七叶等具有降低血脂作用；苦丁茶、山绿茶、田七叶、山楂叶、山栀子等可改善急性“血淤”证大鼠血液流变学指标。初筛证实这些药材水提物具有一定的抗血栓作用，为今后开发利用这些植物药提供了科学依据。我们将继续对其有效药材进一步分离、纯化并提取活性部位，可望获得抗血栓活性更强的中药抗血栓药物。
       　　参考文献：
       ［1］  陆兔林，叶定江，毛春芹，等.三棱总黄酮抗血小板聚集及抗血栓作用研究［J］.中草药，1999，30（6）：439.
       ［2］  李欣燕，韩国柱，张书文，等.乌苏里藜芦碱对血小板聚集及凝血与出血时间的影响［J］.中草药，2004，35（11）：1269.
       ［3］  凌树森，张  菊，孙维林，等.小鼠高胆固醇血症快速造型法的研究［J］.药学通报，1985，70（1）：15.
       ［4］  陈  奇.中药药理研究方法学［M］.北京：人民卫生出版社，1993：485.
       基金项目：国家科技部西部开发科技行动项目（No.2002BA901A14）
       广西科技厅科技攻关项目（No.0235022-IC）
       (广西中医药研究所，广西 南宁  530022)