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       【摘要】 
       目的研究复方续断总皂苷镇痛、抗炎及预防骨质疏松,证明其配方的协同增效的作用。方法采用分别扭体法观察复方续断总皂苷的镇痛作用，用二甲苯致小鼠耳廓肿胀评价其抗炎活性和用双侧摘卵巢法建立骨质疏松病理模型，研究其对骨质疏松症的防治效果。结果复方续断总皂苷可以显著的降低由冰醋酸造成大鼠扭体反应的次数。此外，复方续断总皂苷对二甲苯致小鼠耳廓肿胀有显著的抑制作用。通过对骨密度和骨生物力学的测定，复方续断总皂苷对去势造成的骨质疏松症有明显的防治作用，且效果好于两种成分单独给药。结论复方续断总皂苷可以起到镇痛、抗炎和预防骨质疏松效果，且此配方具有协同增效的作用。
       【关键词】  续断; 三七; 镇痛; 抗炎; 骨质疏松
       续断为川续断科植物川续断Dipsacus asperoides C. Y. Cheng et T. M. Ai的干燥根，是一味传统的伤科良药，苦、甘、辛、微温，归肝、肾经。《本草经疏》云:“入足厥阴少阴，为治胎产、续绝伤、补不足、疗金创、理腰肾之要药也”。《别录》云：“金创血内漏，生肌肉，及腕伤恶血腰痛，关节缓急”。功能补肝肾，行血脉，续筋骨。其不仅可以用于促进骨折愈合，也常常用来防治骨质疏松症[1， 2]，现代研究表明续断补肾壮骨活性成分为皂苷类成分。而三七为五加科植物三七Panax notoginseng (Burk.) F.H.Chen的根，三七总皂苷是三七的主要成分，具有抗炎[3]，镇痛[4]，抗凝血[5]效应，其药理作用的研究已有许多报道，另外三七也是骨伤科最为常用的药物之一。因此，我们将续断总皂苷与三七总皂苷按照一定的比例混合，希望能够达到的协同增效的作用。本实验采用现代药理学实验动物模型，观察复方续断总皂苷的调脂、镇痛，抗炎及预防骨质疏松症的作用，为复方续断总皂苷新的应用提供实验依据。
       1 材料与仪器
       1.1 动物昆明种小鼠，雌雄各半，体质量(22.0±2.0)g，由江苏南京安立默科技有限公司提供;雌性SD 大鼠，6月龄，体质量(300±20) g，上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供, 动物合格证号：SCXK(沪) 2003-0002。
       1.2 药物与试剂A药(续断总皂苷，自制);B药(三七总皂苷，购自昆明制药集团股份有限公司);复方[续断总皂苷∶三七总皂苷(2∶1)];仙灵骨葆(购自贵州同济堂制药股份有限公司，批号：071120);阿司匹林(购自南京白敬宇制药厂产品，批号20081004);生理盐水，南京小营制药有限公司，批号2007021604。
       1.3 仪器DPX-L型双能X线骨密度仪(美国LUNAR公司);INSTRON-5543型电子万能材料试验机(美国英斯特朗公司);电子天平(北京中仪远大科技有限公司)。
       2 方法
       2.1 对冰醋酸所致小鼠扭体反应的影响取小鼠60只，体质量(22.0±2.0)g，雌雄各半，随机分为模型组，A药组(续断总皂苷，0.08 mg/g)，B药组(三七总皂苷，0.04 mg/g)，复方组(续断和三七总皂苷按2∶1混合物，0.12 mg/g)，阳性药组(阿司匹林，0.1 mg/g)，每组各10只。按组别分别灌胃给药，定时给药1次/d，连续给药3 d(空白对照组、模型组分别给等量的生理盐水)。于末次灌胃给药1h后，小鼠腹腔内注射0.8%冰醋酸0. 1 ml/10g，记录20 min 内小鼠的扭体次数，并计算扭体反应的次数及抑制率。
       2.2 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响取小鼠50只，体质量(22.0±2.0)g，雌雄各半，随机分为空白对照组，模型组，A药组(0.08 mg/g)，B药组(0.04 mg/g)，复方组(0.12 mg/g)，阳性药组(阿司匹林，0.1 mg/g)，每组各10只。按组别分别灌胃给药0.1 ml/10 g，定时灌胃给药1次/d，连续给药3 d(空白对照组、模型组分别给等量的生理盐水)，于末次给药30 min 后，乙醚麻醉，将0.02 ml 二甲苯均匀涂于小鼠左耳廓两面致炎,右耳不涂为对照，空白对照组左耳廓涂生理盐水。致炎1 h后脱颈处死动物，用直径6 mm 的打孔器分别在同一部位将每鼠左右两耳打下圆耳片，电子天平称量，耳廓肿胀度(mg) = 左耳片质量-右耳片质量。
       2.3 对绝经后骨质疏松的防治作用取SD大鼠48只，随机分为6组，每组8只，雌雄各半：即假手术组，模型组，A药组(续断总皂苷，54 mg/kg)，B药组(三七总皂苷，27 mg/kg)、复方组(续断和三七总皂苷混合物，81 mg/kg)，阳性药组(仙灵骨葆，270 mg/kg)。实验前用戊巴比妥钠(30 mg/kg)腹腔注射麻醉，背侧切口作双卵巢摘除，假手术组背部切口不摘除双侧卵巢，仅切除卵巢周围少量脂肪组织。于手术后第2天开始定时灌胃给药1次/d，连续给药3个月(空白对照组，模型组分别给等量的生理盐水)。3个月后，大鼠颈动脉放血处死，截取一侧大腿股骨(右)与第1～5腰椎。在DPX-L型双能X线骨密度仪作大鼠股骨扫描，结果以g/cm2表示。取新鲜股骨(左)与第3腰椎，标本剔除肌肉后分别在电子万能材料试验机的三点弯曲装置(跨度18 mm;速率10.0 mm/min;温度23℃;湿度60%～70%)与压缩装置上测试三点弯曲与压缩最大载荷，结果以牛顿力(N)表示。
       2.4 统计学处理实验数据应用SPSS 13.0软件建立数据文件，所有数据均以 ±s形式表示，采用t 检验进行统计学分析。
       3 结果
       3.1 复方续断总皂苷对冰醋酸所致小鼠扭体反应的影响 与模型组相比，各给药组均能抑制冰醋酸所致小鼠扭体反应，其中A药组，复方组，阳性药组差异极显著(P<0.01)，且复方组的抑制率高于A药组与B药组(表1)。说明复方组的镇痛效果略优于单方给药组。表1 复方续断总皂苷对冰醋酸所致小鼠扭体反应的影响
       3.2 复方续断总皂苷对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响与空白组相比，模型组左耳减去右耳重量显著增加(P< 0.001，P< 0.01)。与模型组相比，复方给药组能显著减轻二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀(P<0.05)，且与阳性药组无显著差异(表2)。说明复方组具有一定的抗炎作用表2 复方续断总皂苷对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响
       3.3 复方续断总皂苷对绝经后骨质疏松的防治作用
       3.3.1 复方续断总皂苷对骨质疏松大鼠股骨和腰椎骨密度的影响3个月后，与假手术组相比，模型组股骨，腰椎的骨密度明显降低(P<0.001,P<0.01);与模型组相比，A药组，复方组股骨，腰椎的骨密度明显升高(P<0.01，P<0.001)，且与阳性药相比无显著性差异;B药组股骨，腰椎的骨密度呈现出增加的趋势，但与模型组相比无统计学意义(表3)。结果表明，A药与复方药均能增加骨质疏松大鼠的骨密度，且复方药相比单方增加更为明显。表3 复方续断总皂苷对骨质疏松大鼠股骨和腰椎骨密度的影响　　3.3.2 复方续断总皂苷骨质疏松大鼠股骨、腰椎骨生物力学的影响经过3个月后，与假手术组相比，模型组股骨，腰椎的骨生物力学明显降低(P<0.05或P<0.01);与模型组相比，A药组，B药组提高明显腰椎的骨生物力学(P<0.05)，复方药组大鼠的股骨，腰椎的骨生物力学明显提高(P<0.05或P<0.01)，且与阳性药相比无显著性差异;A药组，B药组股骨的骨生物力学呈现出增加的趋势，但与模型组相比无统计学意义(表4)。结果表明，复方药可以明显的提高骨质疏松大鼠的骨生物力学，且复方药相比单方增加更为明显。
       4 讨论
       本研究结果表明，复方续断总皂苷对冰醋酸致痛和二甲苯致炎小鼠具有明显的镇痛和抗炎作用，通过对骨密度和骨生物力学的测定，显示该复方对双侧摘卵巢造成大鼠骨质疏松症具有一定的逆转作用，其效果均好于续断总皂苷与三七总皂苷单独使用，提示二药的有效部位合用具有协同增效的作用。三七长于散瘀消肿定痛，二药合用，特别是二药的有效部位合用，具活血化瘀、消肿止痛、补骨壮骨之功效。表4 药物对骨质疏松大鼠股骨和腰椎骨生物力学的影响
       本品在传统中医理论基础上，将续断和三七的活性部位续断总皂苷和三七总皂苷经过合理配比组成的促骨折愈合的中药复方，续断长于补肾壮骨，现代医学发现续断能够增加成骨细胞的增殖和分化，从而增加骨形成[6，7]，其已经用于骨质疏松症防治[8]。最近研究发现续断补肾壮骨活性成分为皂苷类成分，其具有促进骨折愈合，增加骨密度，骨强度等;三七长于活血祛瘀止痛，现代研究表明其有效成分三七总皂苷，具有抑制血小板聚集，改善血液流变，消肿止痛的等活血化瘀作用[9]。另外研究表明三七总苷对成骨细胞的增值具有一定的作用[10，11]。因此二药合用，特别是采用现代科技提取各药的皂苷类有效成分合用，可同时从补肾壮骨和活血止痛两方面防治骨质疏松，功效协同互补，这不仅体现了传统中医药理论的整体观，同时赋予传统中医药理论现代科学的内涵。
       【参考文献】
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