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       【关键词】  小叶锦鸡儿；,,醋酸乙酯提取物；,,镇痛
       摘要：目的探讨小叶锦鸡儿醋酸乙酯提取物的镇痛作用。方法将小鼠随机分为5组后采用扭体法、热板法、电刺激法3种方法观察小叶锦鸡儿醋酸乙酯提取物的镇痛作用。结果小叶锦鸡儿能明显延长小鼠扭体和舔足潜伏期，减少扭体和舔足次数，提高电刺激痛阈。结论小叶锦鸡儿醋酸乙酯提取物对小鼠有明显镇痛作用。
       关键词：小叶锦鸡儿；  醋酸乙酯提取物；  镇痛
       The Analgesic Effects of the Ethyl Acetate Extraction of Caragana microphylla Lam
       LI  Yingjun， PIAO Huishun， JIANG Haiying
       （College of  Basic Medicine, Yanbian University, Yanji 133000，China; College of  Pharmacy，Yanbian University， Yanji133000， China）
       Abstract：ObjectiveTo study the analgesic effects of the ethyl acetate extraction of Caragana microphylla Lam.MethodsAfter the mice were randomly divided into 5 groups, studied the analgesic effects of the ethy1 acetate extraction of Caragana microphylla Lam with writhing test, hotplate test and electric stimulation test. ResultsThis drug obviously prolonged the incubation period of torsion body and licking feet, decreased the times of torsion body and licking feet, increased the pain threshold of electric stimulation in mice.ConclusionThe analgesic effects of the ethy1 acetate extraction of Caragana microphylla Lam has obvious analgesic effects on mice.
       Key words：Caragana microphylla Lam；  Ethylacetate extraction；  Analgesic
   
　　小叶锦鸡儿Caragana microphylla Lam为豆科锦鸡儿属植物，药用部位为根，具有祛风除湿、活血通络、镇静消炎等功效［1］。中华本草中记载，小叶锦鸡儿具有“清热利炎的功能，主治咽喉肿痛”［2］。此属植物世界上约有100余种，分布于亚洲和欧洲的干旱、半干旱地区。我国产62种［3］，也可以栽培。朝医称小叶锦鸡儿为骨草（治疗骨髓炎的药）朝鲜族民间作为治疗骨髓炎、风湿性关节炎的常用药材。近来研究表明，该属植物具有抗炎、降压作用［4，5］，还具有较强的抗癌及抗病毒活性［6，7］。一般来说，药物的抗炎作用与镇痛作用往往具有一定的联系，本实验正是通过给予小鼠不同剂量的小叶锦鸡儿醋酸乙酯提取物来验证其是否具有镇痛作用，旨在为深入开发小叶锦鸡儿的药用价值提供理论依据。
       　　1  器材
       1.1  药品与试剂小叶锦鸡儿采集于珲春蜜江，冰醋酸，消炎痛，乙醇，其它试剂均用分析纯。
       1.2  仪器 BL420S型生物机能实验系统：成都泰盟公司，HHW型恒温水浴箱：金坛市恒丰仪器厂，小鼠固定器，计时器。
       1.3  动物昆明种小鼠，体重（20±20）g，由延边大学医学部实验动物科提供。
       1.4  统计学处理实验数据以±s表示，采用SPSS11.0统计软件进行方差分析。
       　　2  方法与结果
       2.1  醋酸乙酯提取物的制备取小叶锦鸡儿干燥根的粗粉3 kg，用95%食用乙醇在50℃提取3次，提取液趁热过滤，合并滤液，减压回收乙醇得浸膏（367.4 g）。在浸膏中加适量蒸馏水成混悬液，依次用石油醚、醋酸乙酯萃取，减压回收溶剂，得醋酸乙酯提取物（12.54 g），备用。
       2.2  小叶锦鸡儿醋酸乙酯提取物对腹腔注射冰醋酸所致疼痛的影响［8］取50只小鼠 雌雄各半，随机分为5组。大、中、小剂量组、阳性对照组、空白组，分别给予200，100 ，50 mg/kg的小叶锦鸡儿醋酸乙酯提取物、5 mg/kg的消炎痛、和同等容量的生理盐水，续灌胃给药4 d，于末次给药1 h后腹腔注射0.6%冰醋酸（0.1 ml/10 g），观察扭体的潜伏期及15 min内扭体次数，计算抑痛率。抑痛率（%）=空白组扭体次数-药物组扭体次数     空白组扭体次数×100%由表1可见，与空白组比较小叶锦儿大、中、小剂量组扭体的潜伏期和次数有统计学意义（P<0.05或P<0.01），抑痛率分别为61.9%，77.1%，68.4%。
       表1  小叶锦鸡儿乙酸乙酯提取物对腹腔注射冰醋酸所致疼痛的影响(略)
       与空白组比较， *P<0.05,** P<0.01，n=10
       2.3  小叶锦鸡儿醋酸乙酯提取物对热板所致疼痛的影响［8］将一自制铁槽（26×19×30）放入恒温浴箱内，待水浴箱内温度稳定在(55±0.5)℃时，将小鼠放入铁槽内，筛选出第1次舔后足时间在5~30 s的50只雌性小鼠 然后进行分组给药，方法同上，于末次给药1 h后将小鼠再放入铁槽内（温度同上），观察小鼠舔后足的潜伏期及1 min内的舔后足的次数，间隔5 min后再记录1次，取平均值，计算抑痛率。抑痛率（%）=空白组扭体次数-药物组扭体次数     药物组扭体次数×100%由表2可见，与空白组比较小叶锦鸡儿大、中、小剂量组舔足的潜伏期和次数有统计学意义（P<0.05或P<0.01），其抑痛率别为44.0%，37.4%，42.9%。
       2.4  小叶锦鸡儿醋酸乙酯提取物对电刺激所致疼痛的影响［8］取50小鼠 雌雄各半，分组及给药方法同上，末次给药1 h后将小鼠放入小鼠固定器中，在小鼠尾根部用75%乙醇进行脱酯并涂上导电膏，将刺激输出线的正负电极置于小鼠尾根部1 cm处并连接到BL420S型生物机能实验系统的刺激输出端，设置电流的初始刺激强度为0.1 mA，波宽为50 ms开始进行电刺激，程序控制每次递增0.05 mA，记录小鼠因疼痛而产生嘶叫时的电流强度作为小鼠痛阈。间隔5 min后再记录1次，取两次平均值。由表3可见，与空白组比较小叶锦鸡儿大、中、小剂量组的痛阈有统计学意义(P <0.05)。
       表2  小叶锦鸡儿醋酸乙酯提取物对热板致疼痛的影响(略)
       与空白组比较， *P<0.05,** P<0.01，n=10
       表3  小叶锦鸡儿醋酸乙酯提取物电刺激所致疼痛的影响(略)
       与空白组比较， * P<0.05,n=10
       　　3  讨论
       本实验采用扭体法、热板法、电刺激法研究了小叶锦鸡儿醋酸乙酯提取物的镇痛效果。上述实验结果表明，小叶锦鸡儿醋酸乙酯提取能明显延长腹腔注射冰醋酸和热板所致疼痛的潜伏期，减少因疼痛而产生扭体和舔足的次数，提高电刺激致痛的痛阈，从而证实小叶锦鸡儿有明显的镇痛效果；同时表明，各剂量组之间镇痛效果不存在明显差异，因而不具有量效关系。此外，其镇痛作用的有效成分、作用原理及作用部位尚需进一步研究。
       　　参考文献：
       ［1］  《延边中草药》编写组. 延边中草药［M］.延吉：延边人民出版社，1977：569.
       ［2］  国家中医药管理局《中华本草》编委会. 《中华本草》［M］.上海：上海科学技术出版社，1999：392.
       ［3］  刘红霞，林文翰，杨峻山.锦鸡儿属植物化学成分及药理作用研究进展［J］.中国药学杂志2004，39（5）：327.
       ［4］  金景姬，方文龙，金正男，等.小叶锦鸡儿的抗炎作用［J］.中国中药杂志，1993，18（5）：306.
       ［5］  屈松柏，张晓星.锦鸡儿治疗高血压的临床研究［J］.实用中西医结合杂志，1989，2（2）：10.
       ［6］  盛  智，田春艳，王羽雄，等.锦鸡丙素对两株入肺癌细胞株蛋白激酶和同工酶活性的影响［J］.上海医科大学报，1996，26（3）：395.
       ［7］  Woo ER，Kim HJ，Kwak JH，et al. Inhibition of gp120CD4 imter-action by Various Plant exeracts ［J］.phytomedicine，1997，4（1）：53.
       ［8］  陈  奇.中药药理研究方法学，第1版［M］.北京：人民卫生出版社，1993：356.
       （延边大学基础医学院，吉林 延吉  133000；  延边大学药学院，吉林 延吉  133000）