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       【摘要】 
       目的探讨紫外线的灭菌性能和对活菌耐药性影响，以期达到如何更简单有效地监测紫外灯的灭菌效果的目的。方法利用紫外灯在不同高度、不同时间对各类菌种的抑菌和耐受性，为实际工作应用提供参考。结果紫外灯对各类菌种的抑制均有不同。结论通过不同高度、时间检测，活菌对紫外灯的敏感性和紫外灯对活菌耐药性的影响是各不相同的。
       【关键词】  紫外灯; 杀菌; 监测; 卡片法; 划线法
       紫外线对微生物细胞、病毒、毒素和酶类有明显的灭活作用，波长在265～266 nm灭菌力强而稳定，因而紫外灯消毒杀菌在医药、食品及化工业中被广泛应用。由于微生物种类繁多，紫外灯种类、功率各异，以及实际使用情况各不相同，往往出现紫外灯的使用不当。本实验试图探明紫外线灭菌性能和对活菌耐药性影响，以及如何更简单有效地监测紫外灯的灭菌效果，为实际工作运用提供参考。
       1 材料
       1.1 紫外灯管无臭石英紫外线杀菌灯，30W，沧州市三峰器械有限公司生产。
       指示卡：紫外线强度指示卡，北京四环卫生药械厂生产。
       1.2 培养基营养琼脂、玫瑰红酸钠琼脂、液体硫乙醇酸盐培养基、真菌培养基均由杭州天和微生物试剂有限公司生产。
       1.3 菌种大肠埃希菌[CMCC(B)44102]、金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]、藤黄微球菌[CMCC(B)28001]、沙门菌[CMCC(B)50094]、白色念珠菌[CMCC(F)98001]、短小芽孢杆菌[CMCC(B)63202]、铜绿假单胞菌[CMCC(B)10104]、枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63501]均由中国药品生物制品检定所提供。
       1.4 药品诺氟沙星胶囊，合肥第二制药厂生产，批号081120;琥乙红霉素片，西安制药厂生产，批号081025。
       2 方法及结果
       2.1 活菌对紫外线的敏感性实验按无菌技术要求[1，2]，取各菌种的18 h肉汤培养液(白色念珠菌为真菌培养基培养液)一环，分别按直线法划线于已制备好的平皿上，每一平皿用灭菌滤纸遮盖一半使划线也遮盖一半，分别放置在距紫外灯管0.6，1.2，2.2 m处，照射10，20，40 min后加平皿盖于35℃培养24 h。结果见表1表1 紫外线对活菌生长繁殖的影响
       2.2 两法实验
       2.2.1 卡片法[3]将指示卡置于距紫外灯管1 m的垂直中央处，开灯照射1 min组、5 min组和15 min组，以卡片涂层由白色变为粉紫色为灭菌合格，观测指标。结果见表2。
       2.2.2 划线法按本文“2.1”法，将铜绿假单胞菌划线平皿置于距紫外灯管1m的垂直中央处，开灯照射1 min组、5 min组和15 min组，35℃培养24 h，以照射部分无菌生长，滤纸遮盖部分有典型菌落生长为灭菌合格观测指标。结果见表2。
       2.3 灭菌效果检查
       2.3.1 复活实验 按无菌技术要求，将大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌、沙门菌、铜绿假单胞菌和白色念球菌分别划线平皿中，置于距紫外灯管1 m的垂直中央处，照射15 min后，将划线部分挖出，按无菌检查法检定，各平皿35℃培养48 h白色念球菌培养72 h。其中仅白色念球菌的划线物检出白色念球菌。结果，所有平皿菌未长菌，仅白色念球菌的划线物按无菌检查法检出活菌。见表2　表2 不同方法对紫外灯灭菌性能监测的比较
       2.3.2 诱导试验 按无菌技术要求，取大肠埃希菌及金黄色葡萄球菌划线平皿，在距紫外灯管1 m垂直中央处照射1 min后，挖出划线物置于肉汤培养基35℃培养18 h，分别以2倍稀释法求出其对诺氟沙星胶囊及利君沙片的MIC值，并与其照射前MIC值比较，结果见表3。
       3 讨论
       3.1 紫外灯灭菌性能结果表明，灭菌效果距紫外灯管越近越好，大于2.2 m活菌对紫外线不敏感;在大于10 min条件下，时间长短对灭菌效果无影响;大多数革兰氏阳性菌(枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌)对紫外线不敏感。
       表3 紫外灯对细菌耐药性的影响mg·l-1
       3.2 紫外灯灭菌性能的监测划线法为紫外灯灭菌的直接考察方法，结果准确可靠，但其操作繁琐，实验条件严格，难以适应实际工作需要。而卡片法简单易行，使用效果与划线法一致，值得推广应用。
       3.3 紫外灯灭菌效果检查由复活实验结果表明，紫外灯适宜条件下对革兰氏阴性菌及革兰氏阳性菌各存壮株，均能杀灭，但对真菌(白色念珠菌)仅显抑菌作用。诱导试验结果显示，紫外灯照射能明显诱导大肠埃希菌对琥乙红霉素的耐药性，提高金黄色葡萄球菌对琥乙红霉素的敏感性，两经照射的大肠埃希菌及金黄色葡萄球菌对诺氟沙星显得更敏感。
       我所一直采用紫外线强度指示卡监测紫外灯强度，方法简便、实用，为确保紫外灯的消毒效果，应采取高度0.6～1m,时间30～40min为参数范围内消毒。实际操作中，监测员监测时应注意指示卡的质量，指示卡应在避光、干燥条件下保存;要保持灯管的清洁，至少每周用95%的乙醇擦拭1次;紫外灯的被广泛应用，对自然界微生物耐药性的影响问题，值得进一步研究。
       【参考文献】
         　[1] 国家药典委员会.中国药典，2005，Ⅱ部[S].北京：化学工业出版社，附录XIH,XIJ.
       
       [2] 中国生物制品检定所，中国药品操作规范[S].北京：中国医药科技出版社，2005：313.
       
       [3] 高国菊，王晓坤.不同检测方法对紫外线灯辐射强度检测结果比较[J].中国消毒学杂质，2007，24(2)：167.