文章标题 全文   多个检索词，请用空格间隔。

       【摘要】 
       目的研究威灵仙总皂苷(CCS)对小鼠肿瘤的抑制作用。方法采用肉瘤(S180)、肝癌腹水型(HepA)和白血病腹水型(P388)3种小鼠移植性肿瘤模型进行实验。结果CCS对小鼠移植性肿瘤S180、HepA、 P388均有显著的抑制作用。当剂量为0.3，0.6，1.2g·㎏-1时，对小鼠移植性肿瘤S180抑制率分别为42.78%，52.06%，58.25%(P<0.05或P<0.01)，对移植性肿瘤HepA抑制率分别为37.44%，52.05%和59.36%(P<0.05或P<0.01)，对移植性肿瘤P388抑制率分别为34.50%，46.78%和54.39%(P<0.05或P<0.01);CCS可以使G0～G1期细胞增多，G2～M期细胞减少，癌细胞凋亡率与用药剂量呈正相关趋势。结论CCS对小鼠移植性肿瘤有显著的抑瘤作用，对造血系统和免疫功能无影响。
       【关键词】  威灵仙; 总皂苷; 抗肿瘤作用
       威灵仙为毛茛科植物威灵仙Clematis chinensis Osbeck.，棉团铁线莲Clematis hexapetala Pall.或东北铁线莲Clematis manshurica Rupr.的干燥根及根茎，其中东北铁线莲主产于中国东北、内蒙古及日本[1，2]，根中含有甾醇、糖类、内酯、原白头翁素、白头翁素、皂苷等多种化学成分[3]，具有祛风除湿、通络止痛作用[4]。药理研究表明有降血压、降血糖和抗肿瘤作用[5～7]，临床报道用于食道癌的治疗，癌症患者配合用药可以减轻化、放疗的不良反应[8]。本实验观察了CCS对小鼠移植性肿瘤：肉瘤(S180)、肝癌腹水型(HepA)和白血病腹水型(P388)的抗肿瘤作用，以期为开展威灵仙总皂苷的临床应用提供实验依据。
       1 材料
       昆明种小鼠从解放军农牧大学动物中心购入，合格证号：10-5112，体质量(20±2)g，雌雄兼用;CCS由吉林大学提供;小鼠移植性肿瘤S180，HepA，P388购自中国科学院上海药物研究所。
       2 方法
       2.1 CCS体内抗肿瘤作用[9]取小鼠240只，分为三大组(每组80只)按常规方法分别接种3种瘤株后，将每大组随机分为4组，每组20只。对照组(生理盐水)20 ml·㎏-1灌胃，CCS 0.3，0.6，1.2 g·㎏-1灌胃。接种后24 h给药，1次/d，连续10 d，停药次日称体重，取瘤块并称重，计算抑瘤率。
       2.2 CCS对S180、HepA、P388小鼠存活时间的影响 取小鼠192只，分为三大组(每组64只)按常规方法分别接种3种瘤株后，将每大组随机分为4组，每组16只，停药次日，观察小鼠生存时间并记录，方法同“2.1”项。
       2.3 CCS对小鼠免疫器官和造血系统的影响取脾脏和胸腺称重，然后计算脾指数和胸腺指数;眼眶取血，测定WBC (白细胞)、RBC (红细胞)、HGB (血红蛋白)、PLT (血小板)和Ly% (淋巴细胞含量)，方法同“2.1”项。
       2.4 CCS对小鼠癌细胞增殖周期的影响解剖小鼠后取出瘤块，制成悬液，液洗3次，然后染色并进行FCM分析，计算各时相细胞比率，方法同“2.1”项。
       3 结果
       3.1 CCS对小鼠肿瘤的抑制作用由表1可见，不同CCS剂量与抑瘤作用呈正相关趋势，剂量越大，抑瘤作用越明显。当剂量为0.3，0.6，1.2 g· ㎏-1时，威灵仙总皂苷对小鼠移植性肿瘤S180抑瘤率分别为42.78%(P<0.05)，52.06(P<0.01)和58.25(P<0.01);对移植性肿瘤HepA抑瘤率分别为37.44%(P<0.05)、52.05%(P<0.01)和59.36%(P<0.01);对移植性肿瘤P388抑瘤率分别为34.50%(P<0.05)，46.78%(P<0.05)和54.39%(P<0.01)，抑瘤作用明显。表1 CCS对小鼠肿瘤生长抑制作用
       3.2 CCS对小鼠S180、HepA、P388存活时间的影响由表2可见，CCS对小鼠生命的延长作用与用药剂量有一定的依赖关系，但均无显著性差异。表2 CCS对小鼠180、HepA、P388存活时间的影响
       3.3 CCS对小鼠免疫器官和造血系统的影响由表3～4可见, CCS对小鼠免疫器官重量和小鼠的血象无显著影响，说明CCS发挥抗癌作用时不会抑制免疫功能和造血系统。表3 CCS对小鼠免疫器官的影响表4 CCS对小鼠造血系统的影响
       3.4 CCS对小鼠癌细胞增殖周期的影响 由表5可见, CCS可以使G0～G1期细胞增多，G2～M期细胞减少，癌细胞凋亡率与用药剂量呈正相关趋势。表5 CCS对小鼠S180增殖周期的影响
       4 讨论
       新近发现，威灵仙除对类风湿性关节炎、骨性关节炎、肩周炎、前列腺肥大、高血压、高血糖等有作用外，总皂苷还具有抗肿瘤作用[6，10～16]。张昌浩等[13]用东北铁线莲进行实验,结果表明能明显地抑制S180A肿瘤细胞。邱光清等[14]研究了威灵仙不同部位提取物的抗癌活性，发现其总皂苷(CCS)的抗癌活性较好。CCS能够杀伤体外培养的移植性肿瘤细胞S180A (肉瘤腹水型) 、EAC (艾氏腹水型)和HepA (肝癌腹水型)，且给药浓度越大，杀伤力越强。CCS也不会减轻实验小鼠的体重。临床报道，威灵仙治疗食管癌有效率达88.7%[5，6];介入化疗联合威灵仙外治老年人头颈部癌，可使肿瘤缩小50%以上[12];威灵仙与醋、蜜混匀后用水煎服可以有效防治食道癌, 并对胃癌、肠癌、皮肤癌有一定的疗效[15] 。
       本实验表明，CCS对小鼠S180、HepA、P388移植性肿瘤均表现出明显的抑制作用。用量为0.3，0.6，1.2 g·kg-1时，对S180抑制率为42.78%～58.25%，对HepA抑制率为37.44%～59.36%，对P388抑制率为34.50%～54.39%，发挥抗癌作用时不会抑制免疫功能和造血系统;CCS可以使G0～G1期细胞增多，G2～M期细胞减少，并促使癌细胞凋亡。因此，值得进一步研究CCS抗肿瘤作用及其机制，为开发抗肿瘤新药提供依据。
       【参考文献】
         　　[1] 中国医学科学院药物研究所.中药志[M].北京：人民卫生出版社，1988：202.
       
       [2] 吉林省中医中药研究所.长白山植物药志[M].长春：吉林人民出版社，1982：389.
       
       [3] 何 明，张静华，胡昌奇.威灵仙化学成分的研究[J].药学学报，2001，36(4)：278.
       
       [4] The New Jiangsu Medical College. Dictionary of Chinese Traditional Drags[M].Shanghai :Science and Technology Publishing House，1986:32.
       
       [5] 安徽省人民医院.中草药治疗食道癌300例[J].中草药通讯，1972，2：14.
       
       [6] 胡 烈.威灵仙临床新用[J].中国临床医生，2001，29(1)：49.
       
       [7] 王淑华.大剂量威灵仙临床应用概况[J].实用中医药杂志，2003，19(2)：112.
       
       [8] 常政毅.抗癌良方[M].长沙：湖南科技出版社，1993：80.
       
       [9] 李仪奎.中药药理实验方法学[M].上海：上海科学技术出版社，1991：512.
       
       [10] 梅全喜.毕焕新.现代中药药理手册[M].北京：中国中医药出版社，1998：379.
       
       [11] 高学敏.中药学[M].北京：人民卫生出版社，2000：654.
       
       [12] 柯颂远.介入化疗联合威灵仙外治老年人头颈部癌的临床研究 [J].中国老年学杂志，2003，23(4)：256.
       
       [13] 张昌浩，金光洙，郑 艳.东北铁线莲对小鼠肿瘤的抑制作用[J].延边大学医学学报，2006，29(2)：95.
       
       [14] 邱光清，张 敏，扬燕军.威灵仙总皂苷的抗肿瘤作用[J].中药材，1999，22(7)：351.
       
       [15] 王 亚，陈 彦，孙玉军.中药威灵仙研究概况[J].中药材，2006，29(5)：513.
       
       [16] 赵燕强，杨立新，张宪民，等. 威灵仙的成分、药理活性和临床应用的研究进展[J].中药材 ，2008，31(3)：465.