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       【关键词】  丁香
       摘要：目的丁香酚凝胶剂的制备工艺与初步质量评价。方法用卡波姆－940作基质，三乙醇胺为中和剂，加入丁香酚制成凝胶剂；采用紫外分光光度法以及气相色谱法直接测定凝胶剂中丁香酚的含量。结果制备的凝胶剂，细腻、光洁透明、稳定性好、释放药物快，且含量测定简单易行。结论该凝胶剂配方合理，符合《中国药典》2000版的规定，适宜于痤疮的治疗。
       关键词：丁香酚；凝胶剂；痤疮；处方设计；质量评价
       The Prescription and Quality Assessment of Eugenol Acne Gelata
       ZHANG Zhen, CHEN Jun, CHEN Jian, WU Yanmei
       (1.School of Biology and Invironment Engineering, Jiangsu University, Zhenjiang, Jiangsu Province 212013, China; 2.Zhenjiang No.1 Peoples Hospital, Zhenjiang, Jiangsu 212002, China)
       Abstract:ObjectiveTo study the prescription and quality assessment of Eugenol Acne Gelata.MethodsCarbopol－940 was used as base,and trithanolamine as neutralizer, Eugenol was added into the hydrogel;UV spectrophotometry and gas chromatography was used to measure the drug content of hydrogel.ResultsThe gelata was homogenous,transparent and stable.The drug released quickly,and the determination of content was simple and rapid.ConclusionThe formulation of the gelata is reasonable and coincident with the requirement of Chinese Pharmacopoeia 2000.The gelata is suitable for remedy of acne.
       Key words:Eugenol; Gelata acne;  Prescription;  Quality;Assessment
       痤疮是青年人常见的皮肤病。其原因除内原性因素外，与痤疮棒状杆菌、厌氧菌及部分革兰阳性杆菌的感染有关。痤疮外用治疗剂型有软膏剂、霜剂、洗剂、擦剂等，这些剂型用于痤疮的治疗有一定的不足［1］。凝胶剂作为一种新型的外用剂型，其特点是涂展性好，无油腻感，易于清洗，透皮吸收好，适宜痤疮的外用治疗［2］。
       章明美等［3］通过筛选的多种古方中对痤疮有效的中药成分，选择出了其中最优的有效成分丁香酚。
       丁香酚，一种油状的有香味的化合物，是很多药草如肉桂和丁香中的化学有效成分。它有抗惊厥活性和冬眠剂的作用，也可以作为抗氧剂使用，而且还能够用在神经细胞的人工培养中以避免毒性物质的干扰，丁香酚也在口腔科学中被广泛地用作止痛剂［4］。丁香酚的结构如图1所示。
       丁香酚研制的凝胶剂，性质稳定，释药快速。现将其制备工艺与质量评价报道如下。
       　　1 实验器材
       丁香酚(化学纯，上海飞祥化工厂)；卡波末940(上海人民制药厂)；月桂氮酮(简称氮酮，扬州市化工设计研究所研制，批号：030615)，三乙醇胺(分析纯，中国振亚化工厂，批号：20020318)；甘油(分析纯，中国医药上海化学试剂公司，批号：F20020414)；无水甲醇(分析纯，上海振兴化工一厂，批号：200306204)；无水乙醇(分析纯，上海振兴化工一厂，批号：200211367)；氯化钠(分析纯，中国医药上海化学试剂公司，批号：F20030423)；无水硫酸钠(中国上海金山化工厂)；SD大鼠(体重200 g左右，雌性，江苏大学动物中心提供)等。
梅特勒－托利多AE240电子分析天平(梅特勒－托利多仪器(上海)有限公司)；MP502B型电子天平(上海精科天平)；TP－3型智能透皮扩散仪(南京新联电子设备有限公司 南京红蓝电子科技中心)；尤尼柯紫外可见分光光度度UV－2102(尤尼柯(上海)仪器有限公司)；Agilent4890D气相色谱仪(美国安捷伦公司)；玻璃匀浆器(江苏通州市南兴申海玻璃仪器厂)；TGLL－18K台式高速冷冻离心机(太仓市化美生化仪器厂)；pHs－3C型酸度计(上海雷磁)等。
       　　2  实验方法
       2.1  紫外标准曲线的建立在190 nm～400 nm之间，以80%［V/V］乙醇做空白，扫描丁香酚的紫外图谱，如图2。得到209，229，281 nm 3个最大吸收波长。考虑到末端吸收的干扰等原因，本文选择281 nm作为丁香酚的特征吸收峰。
       精取丁香酚0.032 35 g，以80%［V/V］乙醇定容至25 ml，分别精取0.2，0.5，1.5，2 ml该溶液，以80%［V/V］乙醇定容至50 ml，制得系列标准液，于281 nm出测定吸收度A值，计算C，得回归方程C＝0.004 42＋0.018 53A(n＝5)，r＝0.999 97线性范围为50.176～51.76 μg/ml。
       2.2 气相色谱标准曲线的建立［5］精取丁香酚0.015 20 g，以无水乙醇定容至10 ml，分别精取0.2，0.5，1，1.5，2 ml该溶液，以无水乙醇定容至10 ml，制得系列标准液。初始温度110℃，时间2 min，速率10℃/min，结束温度200℃，时间10 min，检测得温度250℃，进样口温度240℃，进样1 μl，测得峰面积A，计算C，得回归方程为C＝－28.157 16＋44.878 98A(n＝5)，r＝0.999 24，线性范围为30.4～456 μg/ml。
       2.3  凝胶的制备
       2.3.1  正交实验筛选处方［6］正交实验指标为扩散介质中的丁香酚含量。采用卡波末、月桂氮酮、三乙醇胺为影响因子。因子及水平设计见表1。采用L9(34)正交表。表1  实验因子和水平表的确定%因（略）           
       实验结果为丁香酚在281 nm下紫外吸收度。结果以正交设计助手Ⅱ分析处理。
       2.3.2 处方工艺［7］将卡波末均匀分散于适量的蒸馏水表面，溶胀过夜，加入甘油，月桂氮酮研磨使润湿，加三乙醇胺研磨成透明凝胶基质。精取丁香酚加入到基质中，慢加快搅，加蒸馏水至全量，继续搅拌均匀，得无色透明凝胶剂。
       2.4 局部透皮实验及含量测定
       2.4.1用剪刀除尽SD大鼠(雌性，体重约200 g)腹部毛，以0.9% NaCl溶液洗净皮肤表面，24 h后处死，取下无损伤皮肤，除去皮下组织，备用［8］。
       2.4.2  将上述皮肤置于Franz扩散小池的释放池内，角质层面向释放池，另一面也接受液紧密接触。以凝胶2 g均匀分布于释放池内皮肤上，容积为10 ml接受池内注满0.9% NaCl溶液后，扩散池置于TP－3型智能透皮扩散仪内，37℃ 恒温，搅拌速率为100 r/min，进行实验。
       2.4.3 精取扩散面积处的皮肤，以剪刀剪碎后装入玻璃匀浆器中，加入2 ml无水甲醇，放置片刻，搅拌制得匀浆［9］，小心取出，置于10 ml离心管中，以8 000 r/min，20℃ 低温离心30 min，精取全部上清液，针头过滤器过滤，备用。
       以无水甲醇定容2.4.3中溶液至10 ml，以80%［V/V］乙醇定容至10 ml，于281 nm波长下进行紫外测定，重复3次，求平均值。
       精取2.4.3中溶液1 μl于2.2中气相色谱条件上进行含量测定［5］，重复3次，求平均值。
全取接受液置于10 ml离心管中，以8 000 r/min，20℃低温离心30 min，精取全部上清液，针头过滤器过滤，并以上述方法进行测定。
       2.5 回收率实验［10］精取适量丁香酚5份，分别加入处方量的基质中，制成凝胶。用无水乙醇温热溶解，置100 ml容量瓶中，稀释至刻度，过滤，以续滤液1 ml以80%［V/V］乙醇定容至10 ml，于281 nm处紫外测定。
       　　3 实验结果和讨论
       3.1    正交实验结果见表2。表2 正交实验直观分析（略）
       根据直观分析，可以确定最优组方为：卡波末1%月桂氮酮0.5%三乙醇胺0.5%。再根据单因素实验可确定甘油的含量。所得处方如下：
       卡波末1%，丁香酚0.5%，月桂氮酮0.5%，三乙醇胺0.5%，甘油适量H2O加至全量。
       3.2 质量评价
       3.2.1 外观无色或近无色透明状半固体，质地均匀细腻，稠度适宜，涂展性好，吸收快，符合《中国药典》2000版(Ⅱ部)规定。
       3.2.2 pH值取本品10 g加入25 ml注射用水，用pHs－3C型酸度计精密测定，pH值为6.5～7.5，符合中国药典2000版(Ⅱ部)规定。
       3.2.3 稳定性实验取本品10 g置于离心管中，以8 000 r/min离心30 min后无异常现象。
       3.2.4 含量测定皮内丁香酚的12 h累积浓度≥62.5 μg/ml［3］，符合药用要求。接收液中浓度不能达到62.5 μg/ml。
       3.3求得平均回收率为99.45%，RSD＝1.35%(n＝5)
       3.4 讨论寻常性痤疮患者多皮脂腺功能亢进，毛囊皮脂导管堵塞，不宜选用油性过强的剂型。凝胶剂为水溶性，无油腻感，细腻滑爽，与皮肤耦合效果极佳，且易清洗、吸收快、使用方便，特别使用于外用皮肤用药，故凝胶剂是一种使用方便，适宜于痤疮治疗的剂型［11］。
       通过局部透皮实验主要考察丁香酚凝胶剂在与人体皮肤比较近似的SD大鼠腹部皮肤中12 h内的累积药量，实验证明，抑制痤疮丙酸杆菌和表葡萄球菌疗效确切的丁香酚制成凝胶剂后，适合局部给药，质量可控，初步评价令人满意。
       　　4  结论
       丁香酚凝胶制剂处方合理，工艺可行，质量可控，体外释放能够达到痤疮丙酸杆菌MIC。
       　　参考文献：
       ［1］Schltiter G.Locak toxicityactivity of bifonazoloe gel［J］.Arzncimittcl forsch,1993,33(5):739.
       ［2］Leyden J,Grove GL.Randomized tolerability studies comparing gel formulation of retioids used totreat acne vulgaris［J］.Cutis,2001,67(6):17.
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       ［4］Yoshifumi Irie,Nanae Itokazu,Naoko Anjiki, et al.Eugenol exhibits antideprressantlike activity in mice and induces expression of metallothioneinlll in the hippocamous［J］.Brain Research.2004,10(11):243.
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       基金项目：江苏省镇江市科技局高新技术项目(No.SG2000019)
       作者简介：张 (1977)，男(汉族)，江苏镇江人，现在读江苏大学生药学硕士研究生.学士学位，主要从事生物活性成分及新药研究.
       (1.江苏大学生物与环境工程学院，江苏 镇江212013；2.江苏省镇江市第一人民医院212002)
       收稿日期：20050628；