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       【关键词】  中草药
        摘要：目的：观察耐药志贺菌对20味中草药的敏感性。方法：用临床分离的志贺菌为受试菌，采用几何级稀释法测定20味中草药水煎剂的体外最低抑菌浓度(MIC)。结果：20味中草药对志贺菌均有不同程度的抑菌作用，其中黄连、黄芩、苍术抑菌效果最好，其MIC范围分别为0.97～7.81，0.97～15.62和0.97～31.25，MIC50分别为3.90，3.90和7.81 g/L,MIC90分别为7.81，7.81和31.25 g/L。抑菌效果最差的是柴胡、蚤休、丁香，敏感率为0%。结论：部分中草药对志贺菌具有不同程度的体外抑菌作用。
        关键词：中草药；志贺菌；体外抑菌作用
        The Experimental Observation on the Bacteriostatic Action of 20 Chinese Herbs against Shigella.
        LIN Ping
        (Medical School of Taizhou College, Jiaojiang, Zhejiang 318000, China)
        Abstract:Objective:To observe the sensitivity of 20 kinds of Chinese herbs against drug-resistant Shigella.Methods:Test-bacteria were isolated from clinical Shigella. Minimal inhibtory concentrations (MIC) of 20 kinds of Chinese herbs were determined using geometric-progression diluting method in vitro.Results:20 kinds of tested Chinese herbs had bacterostatic activties at different extent,among which Coptis chinensis Franch, Scutellaria baicalensis Georgi and Atractyiodes lancea(Thunb.)DC were highly active against Shigella.Their MIC were 0.97～7.81,0.97～15.62 and 0.97～31.25，MIC50 were 3.90,3.90 and 7.81 g/L,MIC90were 7.81,7.81 and 31.25 g/L, respectively. Bupleuiun chinenso DC, Paris polyphylla Smith and -Syzygium aromaticum (L.)Merr.et perry acquired the worst bacteriostatic action, whose sensitivity rates were 0%.Conclusion:Some Chinese herbs had bactriostatic effect against Shigeua in vitro at different extent.
        Key words:Chinese herbs;Shigella;Bacteriostasis
        志贺菌是引起细菌性痢疾的常见致病菌。随着抗生素的使用不规范、不系统，甚至滥用，现已发现志贺菌对多种抗生素产生不同程度的耐药性,严重威胁着人类健康，已成为人们必须面对的-个难题。国内外均有大量关于多重耐药性的志贺菌感染率上 升的报道［1～3］。但有关中草药对其抗菌作用的报道甚少。因此，本实验选择了黄连、黄柏、黄芩等20味中草药对临床分离到的志贺菌进行体外抑菌实验，旨在了解中草药对志贺菌的抑菌效果，为临床进一步开展中医治疗志贺菌的感染提供实验依据。
           1材料与方法
        1.1菌株23株福氏志贺菌来自台州医院检验科细菌室从病人粪便标本中分离所得到。其中21株耐痢特灵、20株耐庆大霉素、17株耐氨苄青霉素、16株耐卡那霉素、15株耐环丙沙星和丁胺卡那。
        1.2培养基营养琼脂和营养肉汤均为杭州微生物试剂有限公司产品，批号分别为 20040107，20040229。
        1.3中草药黄连、黄芩、苍术、黄柏、马齿苋、金银花、鱼腥草、蒲公英、白芷、生大蒜、连翘、板蓝根、射干、牡丹皮、车前草、乌梅、千里光、  丁香、蚤休、柴胡均购自临海市医药公司，并经我院中医系陈贤中副教授作生药鉴定，经鉴定均《中国药典》规定之正品。各种生药以天平称取10 g，略粉碎后，用纱布包好，制成单味煎剂。制法：将纱布包好的中草药单味盛烧杯中，加水100～200 ml，浸泡1 h后加热煮沸小火10～30 min，过滤，将药渣再加水50 ml左右，按前法煎煮过滤，合并两次滤液加热浓缩至10 ml，3 000 r/min，离心20 min，取上清液，补足失水，用50%枸酸橼钠调pH 7.2～7.6，倾入无菌试管中，8磅15 min灭菌备用。
        1.4实验方法
        1.4.1菌液制备将志贺菌接种于营养肉汤培养基中．经37℃培养18～24 h，然后用预温无菌的营养肉汤培养基制成浓度约为109/ml的菌液。
        1.4.2中草药煎剂的最低抑菌浓度(MIC)测定参照周氏法［4］，采用几何级稀释法。操作在净化工作台内进行。(1)先取加塞无菌小试骨12支，在第2、3管分别加入备用中药煎剂0.5 ml。(2)在第3管至第11管分别加入营养肉汤0.5 ml。(3)用微量加样器从第3管开始倍比稀释备用中药煎剂至第11管。(4)第1管加营养肉汤1.5 ml，第2管至11管各加1.0 ml。(5)第12管加2.0 ml，第1至11管各加志贺菌菌液0.5 ml。(6)第1管为阳性对照。第12管为阴性对照。药液浓度从第2管开始依次为250.00，125.00，62.50，31.25，15.62，7.81，3.90，1.95，0.97，0.48 g/L。共10个稀释度。充分混匀，放置37℃培养18～24 h。因为中药液本身的浑浊，细菌生长后使得肉眼无法观察结果，分别从每一管中取两接种环接种在营养琼脂平板上，37℃培养18～24 h观察是否有细菌生长，记录各味中草药的MIC，并计算MIC50及MIC90的药物浓度［5］。
1.4.3判断标准中草药对细菌的MIC目前国内外尚无统一标准，笔者参照同类实验［6］的标准作为判断标准，即MIC＜7.81 g/L生药浓度时为较高敏感；当MIC在7.81～250.00 g／L时为中度敏感：当MIC在＞250.00 g/L生药浓度时为不敏感。
           2结果
        20味中草药煎剂对23株志贺菌体外有不同程度的抑制作用，结果见表1，MIC见表2；设定MIC=7.81 g/L生药浓度作为中草药对志贺菌的中介浓度，在该浓度时志贺菌对20种中草药的敏感率依次为黄连、黄芩、苍术、黄柏、马齿苋、金银花、鱼腥草、蒲公英、白芷、生大蒜、连翘、板蓝根、射干、牡丹皮、车前草、乌梅、千里光、丁香、蚤休、柴胡。结果见表3。
        表120味中草药煎剂对23株志贺菌体外抑菌作用结果(株)（略）
        表220味中草药对23株志贺菌的MIC值（略）
        表323株志贺菌在中草药浓度7.81 g・L1时的敏感率（略）
           3讨论
        志贺菌目前在临床上引起的细菌性痢疾仍是夏秋季节中一种较为常见的疾病。尽管目前氟喹酮类抗生素对志贺菌具有较强抗菌作用的西药，并且可能成为近几十年来临床上对志贺菌治疗的有力武器，但值得注意的是，由于抗生素长期应用及滥用，不少志贺菌对其已逐渐产生耐药性，有的甚至呈多重耐药，加之-些西药存在较大的副作用，价格昂贵等缺点，在这种情况下，继承和发扬祖国医学遗产，寻找并研制对志贺菌具有抗菌作用的中草药具有重大意义。我国传统中医药以其独特理论及功效显示出极强的生命力。由于中草药成分复杂，具有清热解毒、抗菌等作用，且药源广泛、价格低廉、副作用小、不易产生耐药性的特点，已得到人们的关注。现代药理学的研究证明，许多中草药都有极好的抑菌、杀菌作用。本实验结果表明：临床选用的清热解毒中草药，体外对志贺菌具有不同程度的抑制作用，其中最敏感的是黄连、黄芩、苍术；最不敏感的是柴胡、蚤休、  丁香等。本次实验用的是体外抑菌实验，中草药在体内作用机理比体外还要复杂，且临床多采用复方治疗，中草药在体内能否达到与体外相同效果，尚待进一步探讨。本实验结果，仅从一个侧面说明中草药对志贺菌具有一定的抑菌作用。
本学院中医系刘伶俐老师及本教研室边保华老师协助本实验，特此致谢!
           参考文献：
        ［1］李立津，王哲，胡文芝.氟哌酸和黄连素对志贺菌耐药性质粒清除研究［J］.中华传染病杂志，1994，12(1)： 47.
        ［2］Mitsuhahi S．Drug resistance plasmids．Molecular and cellular Biochemistry［J］.1979，26：135135.
        ［3］Farrar WE Jr Antibiotic resistance in intestinal bacteria  clinics in Gastroenterology［J］.1979，8：803803.
        ［4］周邦清.常用中药的抗菌作用及其测定方法［M］.重庆：科技文献山版朴社重庆分社，1987：4648.
        ［5］徐叔云，卞如濂，陈修，等.药理学实验方法学［M］.北京，人民卫生山版社，2003：16651667.
        ［6］刘忠仪，张国威，何云志.解脲支原体中药药敏试验［M］.中华皮肤科杂志，1996，29(5)：349349.
        (台州学院医学院，浙江 椒江318000)