高效液相色谱法测定泰脂安胶囊中熊果酸和齐墩果酸的含量
作者:姜从良, 黎翩
《时珍国医国药》 2006年 第1期
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【关键词】 高效
摘要:目的采用高效液相色谱法(HPLC)测定泰脂安胶囊中熊果酸和齐墩果酸的含量。方法流动相:乙醇 磷酸盐缓冲液(87∶13);流速0.6 ml/min;检测波长为220 nm。熊果酸线性范围0.976~4.88 μg,r=0.999 0(n=5)。结果平均回收率为100.9%,RSD为1.3%(n=5)。齐墩果酸线性范围0.36~1.80 μg,r=0.999 8(n=5)。平均回收率为99.0%,RSD为1.52%(n=5)。结论该法分析简便、灵敏、迅速、准确。
关键词:泰脂安胶囊;熊果酸;齐墩果酸;高效液相色谱法
泰脂安胶囊是从木樨科植物女贞叶中提取总三萜类物质加适宜辅料精制而成,其主要成分为熊果酸和齐墩果酸,用于肝肾阴虚、阴虚阳亢证所致的原发性高脂血症。由于熊果酸和齐墩果酸结构极相似,两者分离较困难,在薄层板上不易分离,且操作繁琐,重现性差。本实验参考有关文献[1,2] ,采用HPLC法,对泰脂安胶囊中熊果酸和齐墩果酸的含量测定进行了研究。
1 仪器与试剂
Lab Alliance 高效液相色谱仪,Alliance 检测器。甲醇为色谱纯,其余均为分析纯,水为双蒸水,熊果酸和齐墩果酸均为中国药品生物制品检定所提供。
2 方法与结果
2.1色谱条件色谱柱pelcosil LC 18(250 mm×4.6 mm),流动相:甲醇 磷酸盐缓冲液(87∶13),临用前超声脱气处理,检测波长220 nm,灵敏度:0.05 AUFS,柱温:室温,流速:0.6 ml/min。
2.2对照品溶液的配制精密称取齐墩果酸和熊果酸对照品,用甲醇配制成0.18 mg/ml(齐墩果酸)和0.488 mg/ml(熊果酸)的混合对照品溶液。
2.3供试品溶液的制备精密称取泰脂安胶囊(040901)50 mg置25 ml容量瓶中,加适量甲醇,超声提取(30Hz,250W)10 min,放置室温,加甲醇定容至25 ml,滤过,取续滤液用0.45 μm微孔滤膜滤过备用。
2.4线性实验分别吸取齐墩果酸和熊果酸混合对照品溶液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0 ml分别加甲醇定容至5 ml,各进样10 μl,测定峰面积值,以峰面积对浓度进行线性回归,得齐墩果酸和熊果酸回归方程分别为:A=2 892.8+2.19×106 C,r=0.999 8,n=5;A=20 814.7+2.38×106C,r=0.999 0,n=5。
2.5精密度实验取供试品(040901)溶液,重复进样5次,按齐墩果酸和熊果酸的峰面积分别计算得齐墩果酸RSD为1.3%,熊果酸RSD为1.7%。
2.6 重现性实验精密称取批号为040901的供试品,照上述供试品溶液制备方法制备5份供试品溶液,依法测定,结果齐墩果酸和熊果酸RSD分别为1.62%和2.03%。
2.7 回收率实验取已测定含量的供试品5份,每份50 mg(批号为040901),精密称定,分别精密加入齐墩果酸和熊果酸对照品各1.0 mg,照含量测定方法测定含量,计算加样回收率。结果齐墩果酸和熊果酸平均回收率分别为101.7%,100.9%。
2.8 样品测定结果及含量限度取泰脂安胶囊5批,照含量测定方法依法测定,按标准曲线法计算样品中齐墩果酸和熊果酸含量,测定结果见表1。表1样品测定结果(略)
3 讨论
在本实验中发现甲醇比例的增减对两者的分离与保留影响较大,采用磷酸盐缓冲液使流动相显弱酸性,有利于此两种三萜酸的分离,并为泰脂安胶囊的定量分析提供了准确的测定方法,泰脂安胶囊中两酸的平均含量达12.27%。
参考文献:
[1]皮文霞,蔡宝昌,邱建红.HPLC法测定山茱萸中熊果酸和齐墩果酸含量[J].中草药,2003,34(12):1103.
[2]谢莹,杭太俊,程赞,等.高效液相色谱法测定中药中齐墩果酸和熊果酸含量[J].中国中药杂志,2001,26(9):615.
作者简介:姜从良(1966 ),男(汉族),湖北秭归人,现任湖北省秭归县医疗中心副主任药师,学士学位,主要从事药品质量管理工作.
(1.湖北省秭归县医疗中心443000;2.三九黄石制药厂,湖北 黄石435002)
收稿日期:2005 03 24