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       【关键词】  结香
       摘要：目的从结香的花蕾中提取分离活性成分。方法结香花蕾用工业乙醇冷浸，不同极性溶剂提取，再用硅胶层析分离，测定化合物的理化常数和波谱数据，鉴定其化学结构。结果分离得到5个化合物，分别鉴定为：异吲哚1，3二酮（1HisoIndole1,3(2H)dione Ⅰ），结香苷C（edgeworoside CⅡ）和7羟基香豆素（7hydroxycoumarin Ⅲ），西瑞香素（daphnoretin Ⅳ）和β谷甾醇（βsitosterol Ⅴ）。结论化合物Ⅰ和Ⅴ为首次从该植物的花蕾中提取得到。
       关键词：结香；化学成分；提取分离；结构鉴定
       The Chemical Constituents of the Flower of Edgeworthia Chrysantha Lindl.
       TONG Shengqiang, YAN Jizhong, YE Yongjun, SHEN Xiaofeng
       (1.College of Pharmaceutical Science of Zhejiang University of Technology, Hangzhou 310032, China; 2.Zhejiang Suichang Huikang Pharmaceutical Co., Ltd., Lishui 323300, China; 3.Zhejiang Kangyu Pharmaceutical Co., Ltd., Jinhua 322118, China)
       Abstract:ObjectiveTo abstract and isolate the active components from the flower of Edgeworthia Chrysantha Lindl.MethodsThe flower of Edgeworthia chrysantha Lindl. was extracted with ethanol and the crude extract was separated by silica gel column chromatography.Results Five compounds were isolated and their structures were determined by their physical-chemical properties and spectrum data (1HNMR, EIMS, UV and IR) respectively, and their structures were identified as: 1HisoIndole1,3(2H)dione(Ⅰ), Edgeworoside C(Ⅱ), 7hydroxycoumarin(Ⅲ), Daphnoretin(Ⅳ), and βsitosterol(Ⅴ). ConclusionCompoundⅠand Ⅴ were isolated from the plant for the first time.
       Key words:Edgeworthia Chrysantha Lindl.; Chemical constituents; Isolation;Identification
       结香Edgeworthia chrysantha Lindl.，名出《群芳谱》，系瑞香科(Thymelaeaceae)结香属(Edgeworthia)植物，其花蕾、茎和根皮均可入药。结香花自清代起常用来代替密蒙花，用于治疗目赤肿痛，多泪，目翳等眼科疾病［1］。结香花水提取物对革兰氏阳性菌如金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌有抗菌作用［2］。本实验报道从结香的花蕾中提取分离得到的5个化合物，根据理化性质和波谱鉴定其结果为：异吲哚1，3二酮（Ⅰ），结香苷C（Ⅱ），7羟基香豆素（Ⅲ），西瑞香素（Ⅳ）和β谷甾醇（Ⅴ）。其中化合物Ⅰ和Ⅴ为首次从该植物的花蕾中提取得到。
       　　1  仪器和材料
       熔点用XRC1型显微熔点仪测定，温度计未校正；红外光谱用Nicolet AVATAR370 FTIR型红外光谱仪测定；紫外光谱用Shimadzu UV260紫外分光光度仪测定；核磁共振谱用Bruker AC80型核磁共振仪测定；质谱用HP5989B型质谱仪测定。薄层用硅胶GF254和柱层析硅胶H均为青岛海洋化工厂分厂出品。结香花蕾采自本校校园内。
       　　2 方法与结果
       2.1 提取和分离干燥结香花蕾3 kg，用工业乙醇冷浸1个月，将乙醇提取液减压浓缩得浸膏160 g，石油醚（60～90℃）脱脂，脱脂后加入数倍量水再依次用乙醚、氯仿、正丁醇萃取，得乙醚部分35 g，氯仿部分26 g，正丁醇部分49 g。
       将乙醚部分硅胶柱层析，以醋酸乙酯石油醚梯度洗脱得Fr1-15个部分，取Fr2部分再次硅胶柱层析，3%醋酸乙酯石油醚洗脱得到化合物Ⅴ（67 mg）。
       将氯仿部分硅胶柱层析，以醋酸乙酯石油醚不同比例为洗脱剂进行洗脱，得到Fr1-66个部分。Fr4部分再次用硅胶柱层析，以醋酸乙酯石油醚（1∶3）为洗脱剂，得到化合物Ⅰ（90 mg）；取Fr6部分再次硅胶柱层析得到化合物Ⅲ（40 mg）和Ⅳ（35 mg）。
       将正丁醇部分浸膏用硅胶柱层析，氯仿甲醇梯度洗脱（甲醇0%增至10%），5%甲醇处洗脱得到黄白色混合物0.3 g，将该混合物反复进行硅胶层析得到化合物Ⅱ（20 mg）。
       2.2 结构鉴定
       2.2.1化合物Ⅰ无色针状晶体（醋酸乙酯），mp239～240℃，溶于甲醇、乙醇。UVλmax（MeOH）nm：228.5，291.5。IRυmax（KBr）cm-1：3201，3061，1774，1753，1387，1307，1053，716，534。EI-MS m/e：147，104，76，50。1H NMR(DMSO-d6)δH：11.35（1H，s，NH），7.84（4H，s，芳环上四个氢）。上述各类谱图数据与异吲哚1，3二酮标准谱图一致，故鉴定为异吲哚1，3二酮（1HisoIndole1,3(2H)dione），即邻苯二甲酰亚胺（OPhthalimide）。
       2.2.2化合物Ⅱ白色针状晶体（甲醇），mp195～197℃，溶于甲醇、乙醇、热水，微溶于冷水，UV365 nm稀溶液显强烈蓝色荧光，提示可能为香豆素类化合物。Molish反应呈阳性，薄层水解反应鉴定为鼠李糖。UVλmax（MeOH）nm：224.0，305.0，328.5，338.5。IRυmax（KBr）cm1：3 542，3 390，2 928，1 728，1 695，1 602，1 405，1 287，1 059，832。EIMS m/e：322，305，277，221，181，152，63，43。苷元1H NMR(DMSOd6)δH：6.19（1H，d，J=9.40 Hz，H3），6.98（1H，d，J=8.60 Hz，H6），7.62（1H，d，J=8.56 Hz，H5），8.02（1H，d，J=9.46 Hz，H4），6.32(1H，d，J=9.44 Hz，H3′)，7.30（1H，d，J=8.60 Hz，H6′），7.77（1H，d，J=8.68 Hz，H=5′），8.04(1H，d，J=9.52 Hz，H4′)，10.59（1H，s，OH）；鼠李糖部分1H NMR(DMSOd6)δH：5.47（1H，s，H1），3.43（1H，m，H2），3.33（1H，m，H5），3.16（1H，m，H4），3.00（1H，m，H3），1.04（3H，d，J=6.16 Hz，H6），4.49（1H，d，J=6.08 Hz，OH），4.76（1H，br s，OH）和4.97（1H，d，J=4.26 Hz，OH）。上述各类谱图数据与文献［3］报道一致，故鉴定为结香苷C（Edgeworoside C）。
       2.2.3 化合物Ⅲ无色针状晶体，mp 225～228℃，易溶于醇、氯仿、乙酸等，溶于稀碱液，难溶于醚，微溶于沸水。FeCl3反应阳性,说明结构中存在酚羟基。溶液显蓝色荧光,其极稀水溶液在365 nm下显强烈蓝色荧光，可能为香豆素类化合物。UVλmax（MeOH）nm：246，255，325。IRυmax（KBr）cm1：3 176，1 682，1 624，1 603，1 567，1 511，1 412，1 320，1 237，1 135，833，486。EIMS m/e：162，134，105，97，91，84，77，66，57，46，43。1H NMR(DMSOd6)δH：6.19(1H，ｄ，Ｊ=9.44 Hz)，6.71(1H，ｄ，Ｊ=2.30 Hz)，6.78(1H，dd，Ｊ=8.44,2.28 Hz)，7.52(1H，ｄ，Ｊ=8.5Hz)，7.92(1H，ｄ，Ｊ=9.44 Hz)，10.56（1H，s）。以上谱图数据与文献［4］报道一致，确认该化合物为7羟基香豆素（7hydroxycoumarin），即伞形花内酯（umbelliferone）。
       2.2.4化合物Ⅳ浅黄色针状晶体（醋酸乙酯），mp253～254℃，易溶于醇。FeCl3反应阳性,说明结构中存在酚羟基。溶液显蓝色荧光,其极稀水溶液在365 nm下显强烈蓝色荧光，可能为香豆素类化合物。UVλmax（MeOH）nm：211，230，267，350。IRυmax（KBr）cm1：3 398，1 712，1 608，1 277，1 128，846。EIMS m/e：352，309，179，89，69，63，57。1H NMR(DMSOd6)δH：10.31(1Ｈ，s，7OH)，8.03(1H，ｄ，Ｊ=9.56 Hz，4′H)，6.38(1Ｈ，d，Ｊ=9.48 Hz，3′H)，7.71(1H，ｄ，Ｊ=8.60Hz，5′H)，7.12(1Ｈ，dd，Ｊ=8.56，2.3Hz)，7.19（1H，d，Ｊ=2.10 Hz，5H），6.87（1H，s，4H），7.22（1H，s，8H），7.88（1H，s，8′H），3.95(3H，S1OCH3)。以上谱图数据与文献［5］报道一致，确认该化合物为西瑞香素（daphnoretin）。
       2.2.5 化合物Ⅴ无色针状晶体（醋酸乙酯），mp136～138℃，易溶于氯仿、醋酸乙酯。UVλmax（MeOH）nm：213。IRυmax（KBr）cm1：3 423，2 959，1 464，1 382，1 054。EIMS m/e：414（M+），107，106，95，93，81，67。1H NMR(CD3Cl)δH：5.34（1H，d，3OH氢），3.52（1H，m，3H），2.27（2H，m，4H），1.83（2H，m，6H），0.61.5（m，甲基亚甲基质子峰）。与文献［6］报道一致，故鉴定为β谷甾醇（βsitosterol）。
       　　3 结论
       目前，国内外对结香化学成分的研究报道不多，从本次实验以及查阅的文献［3,5,7］来看，结香中含有大量香豆素类化学成分，其生理活性都具有植物生长调节作用、抗菌抗病毒作用、平滑肌松弛作用、抗凝血作用等。近年来［8］，人们从中草药和海洋生物体中分离到了具有抑制ＨＩＶ活性的生物碱、萜类、木脂素、皂苷以及香豆素等天然活性物质。其中，香豆素类化合物由于分子量小、合成相对简单、生物利用度高等优点,引起了药物学家们的高度重视。另外，结香的花蕾中含有丰富的挥发油成分，挥发油都具有祛痰、止咳、平喘、祛风、健胃、解热、镇痛、抗菌消炎等作用。因此我们认为对结香的化学成分作进一步研究是很有必要的。
       参考文献：
       ［1］肖培根.新编中药志，第2卷，第1版［M］.北京：化学工业出版社,2002:800.
       ［2］李秀兰, 孙光洁, 戴树培,等.密蒙花/结香有效成分的抑菌作用［J］.西北药学杂志,1996,11(4):165.
       ［3］Baba, K; Taniguti, M; Yoheda, Y; Kozawa, M. Coumarin glycosides from: Edgeworthia Chrysantha［J］.Phytochemistry, 1990, 29(1)：247.
       ［4］冯宝民,裴月湖.瑞香狼毒中的化学成分研究［J］.中国药学杂志,2001,36(1):21.
       ［5］张海军,赵玉英,欧阳荔.结香化学成分的研究［J］.天然产物研究与开发,1997,9(1):24.
       ［6］国家医药管理局中草药情报中心站.植物药有效成分手册，第1版［M］.北京：人民卫生出版社,1986:1013.
       ［7］Baba, K; Tabata, Y; Taniguti, M; Kozawa, M. Coumarins from Edgeworthia Chrysantha［J］.Phytochemistry,1989,28(1):221.
       ［8］杨劲松.抗HIV活性香豆素类化合物的研究进展［J］.华西药学杂志, 2001,16(4):285.
       作者简介：童胜强(1977)，男(汉族)，浙江临安人，现任浙江工业大学药学院助教，硕士学位，主要从事天然产物有效成分的提取分离工作.
       (1.浙江工业大学药学院，浙江 杭州310032；2.浙江遂昌惠康药业有限公司，浙江 丽水323300；3.浙江康裕制药有限公司，浙江 金华322118)
       收稿日期：20050310；