文章标题 全文   多个检索词，请用空格间隔。

       【关键词】  高效
        摘要：目的高效液相色谱法测定复方苦参洗剂中苦参碱的含量。方法采用ODS C18柱（5 μm ,4.6 mm×200 mm），流动相为乙腈0.1%磷酸（5.5∶94.5），检测波长为210nm，流速为1.0 ml・min1，柱温：室温。结果苦参碱在0.39～2.60 μg范围内线性关系良好(r=0.999 1)，方法的回收率为96.32%，RSD为1.16%(n=5)。结论该方法能准确可靠地进行苦参碱的含量测定，能够有效地控制该制剂的质量。
        关键词：复方苦参洗剂；  苦参碱；  高效液相色谱法
        Determination of Matrine in Fufang Kushen Lotion by HPLC
        GUO Dongyan1， SHI  Yajun1， CUI Chunli2， WANG Haiyan2
        (1.Shanxi College of Traditional Chinese Medicine，Xianyang 712046, China； 2.Graduate Student in Grade 2003 of College of Traditional Chinese Medicine of Shanxi，Xianyang 712046, China）
        Abstract:ObjectiveTo  establish a  method  for determining   matrine in  Fufang  Kushen  Lotion  by   HPLC.MethodsKromasil C18 column(5 μm，4.6 mm×200 mm)  was  used. The mobile phase consisted of acetonitrile 0.1% phosphoric acid （5.5∶94.5）with flow rate 1.0 ml・min1. The detection wavelength was set at 210 nm.The column temperature was room temperature.ResultsThe linear range of matrine was at the range of 0.39～2.60 μg (r = 0.999 1). The average recovery was 96.32% and RSD was 1.16% (n=5).ConclusionThe method is rapid, highly accurate and precise. It can control the quality of Fufang Kushen Lotion.
        Key words:Fufang  Kushen  Lotion;   Matrine;   HPLC
        复方苦参洗剂由苦参、蛇床子、花椒、地肤子、白鲜皮等8味药材组成，其中苦参为君药，其中主要含有生物碱成分，而以苦参碱和氧化苦参碱含量最高，对于其含量测定方法以薄层扫描为主，但其操作复杂。高效液相色谱法也有报道，但是主要以氨基柱为多，也有采用离子对色谱进行测定，对各种色谱条件经过重复性实验，均不能对本品含量进行有效的测定。本文最终以高效液相色谱法［1］，采用常用的C18柱成功地建立了适合本制剂的含量测定方法，制定出合理的含量限度。经过方法学考察及3批样品测定，测定方法提取完全性、重现性、精密度良好，回收率符合要求，整个实验过程可操作性强，能够客观地控制本品的质量。
           1  仪器与试药
        1.1  仪器Waters 600E高效液相色谱仪，Waters 600泵，Waters 2487紫外检测器，millog色谱工作站。
        1.2  试剂与试药苦参碱对照品由中国药品生物制品检定所提供（批号：805-200206），乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为双蒸水，复方苦参洗剂样品为自制。
        2  方法与结果
        2.1  色谱条件与系统适用性色谱柱Kromosil ODSC18（5 μm，4.6 mm×200 mm）, 乙腈0.1%磷酸（5.5∶94.5）为流动相，检测波长为210 nm，柱温：室温。在此条件下，样品得到良好分离。缺苦参阴性对照在苦参碱峰处无峰出现，不干扰本品的测定。
        2.2  标准曲线与线性范围  取苦参碱对照品，加甲醇制成每毫升含0.13   mg的溶液，作为对照品溶液。分别精密吸取对照品溶液3，5，10，15，20 μl，按上述色谱条件注入色谱仪，测定峰面积,以峰面积对苦参碱进样量回归,计算的回归方程为：A=1 409 106.046C＋97 272.17, 相关系数r=0.999 1, 苦参碱在0.39～2.60 μg范围内与峰面积呈良好线性关系。
        2.3  精密度实验精密吸取样品溶液10 μl，连续进样5次，记录峰面积，结果峰面积的RSD0.70%，表明本方法精密度良好。
        2.4  重复性实验称取本品5份，依供试品制备方法制取样品，依法测定含量，结果5份样品的含量分别为0.32，0.33，0.32，0.31，0.33 mg・ml1，平均含量为0.32 mg・ml-1，RSD为2.59%，结果表明本方法重复性良好。
        2.5  稳定性实验取样品，按供试品制备方法制备样品，分别于0，4，8 h测定面积，结果面积的RSD为1.64%，表明本品在8 h内稳定性良好。
        2.6  回收率实验采取加样回收法，取一定量已知含量的样品（C=0.32 mg・ml-1），加适量对照品，依法制备供试品溶液，测定含量，计算回收率。结果见表1。结果表明，本方法回收率良好。
        表1  苦参碱加样回收率实验结果 序（略）
        2.7  样品测定取本品10 ml，置于分液漏斗中，加适量水稀释，用氨试液调节pH 9～10，加氯仿提取5次（15 ml×3，10 ml×2），合并氯仿液，蒸干，残渣用氯仿溶解并定容至25 ml量瓶中，摇匀，滤过，精密量取续滤液5 ml，通过中性氧化铝柱 (100～200目，5 g，内径1 cm ) ，依次以氯仿、氯仿甲醇 (7∶3) 各20 ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，并转移至10 ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。依上述色谱条件测定。结果见表2。
        表2  复方苦参洗剂测定结果批 （略）
           3  讨论
        在本实验色谱条件下，苦参碱得到良好分离，但是氧化苦参碱不能得到有效分离，经过多方实验，也未能得到理想效果，因此，没有对其进行含量测定。实验中发现苦参碱含量与原药材比较偏高，可能因为处方中蛇床子含有的还原性成分的影响，使氧化苦参碱转变为苦参碱的缘故。本实验色谱条件中流动相pH接近2，在一般色谱柱适用范围下限。因此，实验结束后应立即用水冲洗色谱柱。
           参考文献：
        ［1］  王慕邹. 常用中草药高效液相色谱分析［M］.北京:科学出版社,1999:207.
        (1.陕西中医学院，陕西 咸阳  712046；  2.陕西中医学院2003级研究生，陕西 咸阳  712046)