干柱法在中草药化学成分分离中的应用创新
作者:钟方晓, 李岩
《时珍国医国药》 2006年 第6期
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【关键词】 干柱法;,,,中草药;,,化学成分;,,,分离
摘要:目的对传统的干柱方法进行了改进。方法采用玻璃干柱代替传统的方法。结果分离效果理想。结论改进后的干柱可快速有效地进行中草药化学成分的分离。
关键词:干柱法; 中草药; 化学成分; 分离
干柱层析属于液―固层析的范畴,其分离效能高于湿法装柱,并可直接运用薄层层析的最佳条件。普通干柱层析一般采用尼龙袋和塑料袋等装柱,装柱较麻烦而且柱体不易装实,从而影响分离效果,故最近几年很少被采用。我们对此方法进行了改进,并成功地应用于中草药化学成分的分离,改进后的干柱法,可快速有效得到所需分离的单体成分。兹介绍如下。
1 材料
不同规格的玻璃柱,滤板,标本缸,薄层层析用硅胶H,适宜溶剂。
2 方法
2.1 干柱的制作根据需要选择不同直径玻璃柱,长约20 cm,两端截平,一端在离柱口1 mm处烧结滤板,干柱完成,用前用洗液浸泡,洗净烘干备用。
2.2 装柱要点在柱的底端加入约1.5~2 cm薄层层析用硅胶H,敲实,装入用硅胶H分散好的待分离样品1~2 cm,敲实,继续装入薄层层析用硅胶H,并敲实,至硅胶H高度12~15 cm为止,装柱完成。
2.3 展开运用10 cm×20 cm的硅胶薄层板选择最佳的展开系统,选择密封良好体积相应的标本缸,底部放入2张滤纸,放入待分离的干柱,沿壁加入适量展开剂,加盖密闭,上行展开,随时补充展开剂,待展开剂至前沿时取出。
2.4 硅胶柱体的分离根据所分离的化学成分的Rf值,将柱体标记成数段,用不锈钢铲依次将柱内成分段刮松,倒出,并分别收集,薄层检查所分成分的位置,用适当溶媒抽滤,回收溶媒至干,用适当溶媒结晶,反复精制即可得到所需的化学成分。
2.5 应用实例
2.5.1 运用该法对金银花中绿原酸,异绿原酸进行了分离,并得到单体。
2.5.2 对侧柏叶专属性鉴别成分进行了分离,得到了三个单体化合物,其中之山达海松酸(Samdaracopimaric acid)为侧柏叶的专属性鉴别成分。
3 小结
3.1 目前常用的液―液柱层析被广泛应用于中草药化学成分的分离,此法通过梯度洗脱可将所含成分进行系统分离,但有时分离效果并不理想,并且耗费大量的溶媒,耗时较长,改进后的干柱法,也可进行系统的化学成分分离,分离效果非常理想,分离时间短,一天可完成数个柱体分离操作,并在很短的时间得到单一化学成分,特别适合中草药专属性鉴别成分的分离。
3.2 改进后的干柱,加工简单,价格低廉,载样量大,操作方便迅速,简单直观,分离效果理想,很值得从事中草药化学成分分离工作者借鉴。
(山东省中医药研究院,山东 济南 250014)
作者简介:钟方晓(1963 ),男(汉族),山东济南人,现任山东省中医药研究院副研究员,学士学位,主要从事中药生药和中药化学工作.