文章标题 全文   多个检索词，请用空格间隔。

       【摘要】 
       目的为确定红车轴草最佳采收期提供依据。方法采用紫外分光光度法测定红车轴草不同采收期异黄酮的含量，同时计算各个生长期的产量。结果 红车轴草在现蕾期和初花期的异黄酮含量较高，分别为1.80%和1.79%。结论 建议红车轴草在初花期时采收。
       【关键词】  红车轴草； 采收期； 异黄酮
       
       Opitimal Harvest Time of Trifolium pratense
       CHEN Fengzheng，LI Shuhua， WANG Xiongqing
       1.Department of Chemistry and Life Sciences, Leshan Normal College, Sichuan 614004,China；
       2. Department of Life Sciences and Engineering, Mianyang Normal College, Sichuan, 621000,China
       Abstract：ObjectiveTo identify the optimal harvest time for maximal contents of isoflavones in Trifolium Pratense. MethodsUltraviolet spectrophotometry was used to determine the contents of isoflavones in Trifolium pratense. ResultsThe contents of isoflavones in Trifolium pratense were the highest in the initial flowering stage and the budding stage. ConclusionTrifolium Pratense should be harvest in the initial flowering stage.
       Key words：Trifolium pratense;  Collecting time;  Isoflavone
        红车轴草Trifolium Pratense L.为豆科多年生草本植物，又名红三叶、红菽草、三叶草等，现在我国已进行大面积栽培。文献报道其提取物具有抗肿瘤，治疗胃溃疡、胃癌、乳腺癌和骨质疏松症等作用［1］，其主要活性成分为异黄酮类化合物，如大豆素、染料木素和鹰嘴豆芽素等［1，2］，这些异黄酮化合物具有植物雌激素样作用，能够双向调节人体内的激素水平，当人体雌激素水平不足时，它与人体雌激素受体结合，产生弱雌激素作用，以弥补人体自身雌激素的不足；当人体雌激素水平过高时，它与人体雌激素受体结合，从而阻止人体自身所分泌的雌激素与受体结合，达到降低人体雌激素水平的目的，因而对妇女有关体内激素方面的疾病具有预防、保健和医疗作用［3］，其提取物广泛用作保健食品或功能食品的原料，因而倍受人们关注。但目前尚未见到红车轴草最佳采收期的研究。为此，我们以有效成分异黄酮为目标，结合不同生长期植株的产量，研究了红车轴草不同采收期的含量和植株产量，为其确定合理采收期提供科学依据。
       1  材料
        红车轴草Trifolium PratenseL.采自乐山师范学院生物基地不同生长时期（分蘖期、现蕾期、初花期、花后期）的植物地上部分；鹰嘴豆芽素对照品（含量≥98%），购自Sigma公司；UV762紫外可见分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）；电子天平（FC204，上海精科实业有限公司）；恒温水浴锅（H·H·S 216C，上海医疗器械五厂）；植物粉碎机（FZ102，天津市泰斯特仪器有限公司）；试剂均为分析纯。
       2  方法与结果
       2.1   红车轴草的前处理采收不同生长期的红车轴草植物地上部分，除去泥沙和杂草，60℃鼓风干燥5 h，粉碎。
       2.2  测定波长的选择将鹰嘴豆素对照品、红车轴草异黄酮提取液配成适当浓度，在200～400 nm波长范围内进行光谱扫描，二者吸收曲线类似，均在258.5 nm处有最大吸收，故选择285.5 nm为测定波长。
       2.3  对照品溶液的制备精密称取干燥至恒重的鹰嘴豆芽素对照品4.0 mg，置于50 ml容量瓶中，加入95%的乙醇溶解，并定容至刻度，摇匀，即可。
       2.4   标准曲线的制备 精密吸取0.3，0.6，0.9，1.2，1.8，2.4 ml标准液，分别置于10 ml容量瓶中，各自加入95%的乙醇1 ml，加蒸馏水定容，摇匀，在波长258.5 nm处测定吸收值。得回归方程为：C=0.009 56A+0.000 04，r=0.999 3， 结果表明，鹰嘴豆芽素对照品在2.4 ～19.2 μg/ml范围内，浓度与吸光度线性关系良好。
       2.5  供试品溶液的制备准确称取不同采收期的红车轴草干粉5.00 g，置于索氏提取器中，加入95%的乙醇50 ml，置于60℃水浴锅中回流提取1.5 h，回流提取2次，合并滤液，即为样品提取液。精密吸取不同采收期的样品提取液0.8 ml，置于100 ml容量瓶中，加入9.2 ml 95%的乙醇，然后用蒸馏水定容，摇匀，即为供试品溶液。
       2.6  样品含量测定取不同采收期的供试品溶液，在波长285.5 nm处测定吸收值。通过标准曲线，计算不同采收期总异黄酮的含量。结果见表1。表1  不同采收期红车轴草总异黄酮的含量（略）
       2.7  稳定性实验初花期供试品溶液于室温分别放置0，30，60，90，120 min后依样品含量测定步骤进行测定，RSD=2.22%，表明样品溶液放置120 min稳定性好。
       2.8 重复性实验取初花期供试品溶液5份，按含量测定方法进行测定，平均含量为1.79%，RSD=1.68%，表明重现性良好。
       3  讨论
        红车轴草在分蘖期、现蕾期、初花期、花后期的总异黄酮含量分别为：1.43%，1.80%，1.79%，0.73%。现蕾期和初花期该植物的总异黄酮含量最高，但鉴于初花期的植物总产量高于现蕾期，初步确定初花期为最佳采收期。
        
       【参考文献】
         　　［1］Jiangsu New Medical College. Dictionary of Chinese Materia Medica （中药大辞典）［M］.Shanghai：Shanghai Scientific and Technical Publishers, 1975：1012.
       
       ［2］Zeng Hong-yan, Zhou Pu-hua, Hou tuan-zhang. Advances in studies on chemical constituents of Trifolium pratense［J］.Chinese Traditional and Herbal Drugs（中草药）, 2001,32(2)：189.
       
       ［3］Peter H M. van de Weijer, Ronald Barentsen. Isoflavones from red clover significantly reduce menopausal hot flush symptoms compared with piacebo［J］.Maturitas, 2002,42：187.