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塔原1号红花黄色素提取及成分分离鉴定
作者:杨晓君 吴桂荣 王 岩    
作者单位:1.新疆农业大学药学院,新疆 乌鲁木齐 830052; 2新疆医科大学药学院,新疆 乌鲁木齐 830054

《时珍国医国药》 2008年 第11期

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       【摘要】 
       目的提取塔原1号红花黄色素并分离鉴定其成分。方法采用溶剂提取、澄清剂除杂和柱层析法分离纯化红花黄色素,利用质谱和核磁共振谱确定分子结构。结果从塔原1号提取出的黄色素中分离得到羟基红花黄色素A。结论羟基红花黄色素A含量为95.09%,产率为0.33%。
       【关键词】  红花 羟基红花黄色素A 澄清剂
       红花Carthmus tinctorins L.属菊科植物的干燥管状花[1],始载于《开宝本草》。新疆由于特殊的地理环境和气候条件成为我国种植历史最悠久、种植面积及产量最大的红花产地(约占80%),而塔原1 号红花Carthamus tinctorius L.是新疆塔城地区的优质品种。现代研究表明[2]红花黄素具有扩张冠状动脉、降血压、耐缺氧、活血化瘀、抗炎镇痛等多种药理功效[3]。红花黄素中羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)含量较高、具有药理效应代表性[4]。本研究首次采用澄清剂除杂,应用聚酰胺树脂和葡聚糖凝胶树脂及高效液相色谱仪纯化、制备红花黄色素,对其进行分离,并用质谱和核磁共振谱进行成分鉴定。旨在为开发新疆红花资源提供科学依据。
       1   仪器与试药
        1.1    仪器 惠普1100型高效液相色谱仪 (美国);岛津UV-2201型紫外分光光度计(日本);高速离心机(上海安亭);SYZ-550型石英亚沸水蒸馏器(江苏金坛);美国热电公司Zirchrom C-18柱(5μm 250×4.6mm)(天津琛航科技有限公司)。  
        1.2    试药  羟基红花黄色素A(自制,含量98%);甲醇为色谱纯;磷酸为分析纯;塔原1号红花(新疆塔城);超纯水(自制)。
       2  方法与结果
        2.1   红花黄色素的提取  取红花适量,加水提取3 次,合并提取液,加入澄清剂除杂,过滤,滤液冷冻干燥, 即得红花黄色素。
        2.2   羟基红花黄色素A的提取及鉴定  取上述方法提取的红花黄素80g,加300 ml蒸馏水溶解,上聚酰胺柱,水洗脱得红花黄色素成分,再经Sephadex LH-20凝胶色谱柱反复分离纯化,冷冻干燥后得橙黄色粉末。对橙黄色粉末进行结构确证。紫外光谱λmax(logε):224.0nm ,400.0nm;红外光谱(KBr)cm-1: 3375.6(OH), 2927.5 (CH), 1604.7(C=O),1440.6,1509.4(苯环);1H-NMR谱(DMSO-d6):3.63(1H,d,1′-H),4.22(1H,d,1′′-H),6.77,7.42(各2H,d, 12,14-H和11, 15-H),9.77(1H,s,13-OH),18.70 (1H,s,5-OH)。13C-NMR谱(DMSO -d6):105.92(s,C-6),99.53(s,C-4);质谱(m/z):611([M-H-])。1H-NMR谱和13C-NMR谱的测定值见表1。结果表明,本品与文献[5]报道的羟基红花黄色素A一致。表1  羟基红花黄色素A的 1H-NMR谱和13C-NMR谱的数据
       3  讨论
        我们首次使用澄清剂除杂,它是以天然多糖等为原料制成的食品添加剂,安全无毒。实验结果表明,该澄清剂使用方便、有效成分损失小、对大分子杂质清除效率高,但对小分子糖类杂质无法清除,使最后的提取物易吸潮。
        红花黄色素为混合物,羟基红花黄色素A是其主要成分,在实验中我们还得到棕红色斑点的物质(紫外灯下),其结构有待进一步深入研究。
       【参考文献】
         [1] 国家药典委员会.中国药典[S].北京:化学工业出版社,2005:119.
       
       [2] 李光胜.谈红花的综合利用[J].山西医药工业,1992,11(4):40.
       
       [3] 尹宏斌. 红花化学成分的研究[J]. 中草药,2001,32(9):776.
       
       [4] 藏宝霞, 吴 伟. 硅胶吸附法制备红花总黄色素抗凝血作用的实验研究[J]. 中国药学杂志,2002,37(2):106.
       
       [5] 金 鸣,高子淳,李金荣. 大孔树脂色谱法制备红花黄色素和羟基红花黄色素A[J]. 中草药,35(1):25.

经典中医古籍

中药学教材(附图片)

穴位数据库(附图片)