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       【摘要】 
       目的研究穿心莲内酯衍生物的急性毒性。方法采用灌胃和腹腔注射法给药，观察14 d内小鼠的活动情况及死亡情况，用寇氏（krber）法测定穿心莲内酯衍生物对小鼠的半数致死量（LD50）及可信限。结果小鼠给药途径不同毒性表现差别很大,如口服给药的LD50比腹腔注射的LD50大。结论穿心莲内酯衍生物毒性极低，属低毒范围，但对眼睛有一定刺激，对胃有一定影响。
       【关键词】  穿心莲内酯衍生物； 半数致死量； 急性毒性实验
       Experiment of Acute Toxicity of Andrographolide Derivatives
       ZHAI Na, XU Qitai,SONG Peiran, CHEN Baiquan
       (Henan University of Pharmacological College,Henan Kaifeng 475004，China)
       Abstract：ObjectiveTo study the acute toxicity of andrographolide derivatives. MethodsActivity condition and death condition of musculus albus were observed within fourteen days with intragastrically and peritoneal injection, and the method of krber was used to determine LD50 of andrographolide derivatives to musculus albus and confidence level. Results and ConclusionThe toxicity manifestation had tremendous difference due to different administration routes,for instance, LD50 of the oral administration was bigger than that of peritoneal injection. The toxicity of andrographolide derivatives is very low, belongs to low toxicity,but those can stimulate eyes and influence stomach to some extent.
       Key words：Andrographolide Derivatives;   LD50；  Experiment of acute toxicity
       
       穿心莲内酯［1］(andrographolide)为爵床科植物穿心莲Andrograp his paniculata (Bum.f) Nees中提取得到的二萜内酯类化合物，是中药穿心莲的主要有效成分之一，具有清热解毒、凉血消肿等功能。现代药理研究表明［2］，穿心莲内酯及其衍生物具有抗炎抗菌、抗病毒、抗肿瘤、免疫调节、治疗心脑血管疾病、保肝利胆及抗生育等功能。鉴于穿心莲内酯的诸多功效，致力于穿心莲内酯衍生物研究的人员越来越多，新衍生物不断出现。为确保新合成的穿心莲内酯衍生物的安全性，笔者对部分新衍生物做了急性毒性实验。
       1  器材
       1.1 动物小鼠，体重18～22 g，雌雄各半，实验前禁食12 h，不禁水。购自河南省实验动物中心。
       1.2  器材
       天平，量筒（25 ml），灌胃针，注射器（1 ml），烧杯（50 ml），玻璃棒，小鼠笼。
       1.3  试剂及药品0.5%的CMC-Na溶液，香油，DMSO，穿心莲内酯衍生物样品1，2，3，4（由河南大学药学院药物研究所提供）。
       2  方法与结果
       2.1  灌胃实验
       2.1.1  方法由于穿心莲内酯的毒性尚未见报道，所以均将4种样品以最大浓度溶于0.5%的CMC-Na水溶液中，分别以0.2，0.1，0.05 ml/10 g剂量对小鼠灌胃，另设一组空白对照组，每组小鼠10只，雌雄各半。观察14 d，记录各动物给药剂量、给药只数、死亡只数及现象。结果见表1。表1  灌胃实验结果（略）
        给药组小鼠均有食欲减弱现象，部分小鼠眼睛模糊，似有一层薄膜，浑身无力，略有颤抖，严重者在1 d后死亡。未死亡小鼠在3 d后均恢复正常，食欲增加，活动增多。
       2.1.2 结果该灌胃实验结果无100%死亡率，所以无法用寇氏（krber）法测定穿心莲内酯对小鼠的半数致死量（LD50）。可以看出这4种穿心莲内酯衍生物的毒性均属于低毒。通过实验观察可见，各组小鼠的食欲都有明显下降。在此基础上，少数死亡小鼠，死亡之前眼睛模糊，似有一层薄膜，浑身无力，略有颤抖的现象；部分小鼠有轻微此现象，但未死。足以说明，这些现象是穿心莲内酯引起的。
       2.2   腹腔注射实验
       2.2.1  预实验将4种样品最大量溶于香油中，按0.2 ml/10g，0.15ml/10g，0.112 5 ml/10g（4∶3）给药。小鼠随机分组，每组4只，雌雄各半。样品3的低剂量腹腔注射时，没有得到0%的死亡率，又补充一组实验。观察14 d，记录各动物给药剂量、给药只数、死亡只数及现象。结果见表2。表2  腹腔注射预试结果（略）
       
       给药组小鼠均有食欲减弱，体重减轻，活动减少现象。部分小鼠出现眼睛模糊，精神萎靡不振，1 d内后死亡。其余小鼠在14 d后，食欲、体重、活动均恢复正常。
       2.2.2  结果由预实验结果可知，在最大溶解量时，样品1和样品4无100%死亡率，所以这两种样品的半数致死量无法求出。根据数据，其在低毒范围内。样品2和样品3需做进一步实验，才可知其毒性大小。因观察期内空白对照组也有体重减轻现象，所以此现象不是药物所致。另外，小鼠又出现食欲减弱，活动减少；死亡前眼睛模糊，精神不振的现象。证实在服用穿心莲内酯剂量过大时，有食欲不振，部分有眼睛模糊，精神不振的不良反应。
       2.3  正式实验
       2.3.1  方法根据预试结果可知0%死亡率(Dmin)和100%死亡率(Dmax)，按改良的寇氏法［3］，将正式实验的剂量组数设为5，设其公比为r，由公式Dmin=Dmax×r4，可得剂量公比。样品2的剂量公比为0.866；样品3的剂量公比为0.806。将小鼠随机分为10组，每组10只，雌雄各半，每种样品5组，按一定剂量给药。观察14 d，记录各动物给药剂量、给药只数、死亡只数及现象。结果见表3。表3  腹腔注射正式实验结果（略）
        LD50计算公式［3］：LD50=lg-1［lgDm-i (∑P-0.5)］P为动物死亡百分数；i为相邻对数剂量之差。
       
       可信限的求法：X=lg-1(X50±1.96. S X50)X50为lg LD50；S X50为LD50标准误。
       2.3.2  结果该实验中，样品2的LD50为718.21 mg/kg > 500 mg/kg，LD50的95%可信限为797.81～638.75，属于低毒；样品3的LD50为342.44 mg/kg <500 mg/kg，400.67～292.70，属于中毒范围。
       3 结论
        本实验通过对穿心莲内酯衍生物急性毒性实验的研究。灌胃实验结果表明，其4种衍生物毒性均在低毒范围内，但对眼睛有一定的毒性，对胃有一定的刺激，使食欲减退。腹腔注射试验结果表明，样品1，4毒性低，但对眼有一定的刺激性；样品2和样品3实验动物给药后短期内精神萎靡，食欲不振，一天后逐渐变为正常；动物死亡前精神不振，眼睛模糊，体重下降明显。其半数致死量表明毒性不大。对照组体重也有下降，表明此项指标也可能不是药物所致。两种给药途径均有眼睛模糊，食欲不振现象，并参考空白对照组，可知此现象为穿心莲内酯的不良反应，但其毒性不大。另外，灌胃给药和腹腔注射给药的LD50差别很大，这说明给药途径不同，药物的毒性表现也不同。
       【参考文献】
         　　［1］刘国利，刘永琼.穿心莲内酯的研究进展［J］.医药导报，2006,25(1)：48.
       
       ［2］刘新建，王一飞，李贵生.穿心莲内酯及其衍生物的药理研究进展［J］.中药材, 2003,26(2)：135.
       
       ［3］陈奇.中药药理研究方法学，第1版［M］.北京：人民卫生出版社，1993：113.