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       【摘要】 
       目的观察小鼠和大鼠分别灌胃给予匙精胶囊的急性毒性作用和长期毒性作用。方法采用Bliss法测定小鼠灌胃匙精胶囊的LD50以及大鼠连续灌胃匙精胶囊180 d，观察给药180 d的生长、发育，血液学、血液生化学、组织病理变化及停药30 d时上述指标的变化。结果昆明种小鼠灌胃匙精胶囊的LD50为294.23 g/kg。匙精胶囊大鼠给药180 d的毒性试验，剂量分别为5.0，10.0，20.0g/kg （指含生药量，下同）（相当于临床60 kg人用量的13.3，26.7，53.3倍），给药期间各组大鼠毛色、活动、二便均无异常变化，但给药组大鼠摄食、饮水、体重以及部分血液生化学指标和脏器系数有异常变化，停药后，上述异常变化指标均已恢复正常。给药期和恢复期主要脏器病理组织学检查，除给药期间高剂量死亡7只大鼠，解剖发现其肺部和肾脏均有感染，其它给药各组大鼠均无异常发现。结论长期大剂量灌胃给予匙精胶囊对大鼠有一定毒性，但停药后均已恢复。
       【关键词】  匙精胶囊 急性毒性实验 长期毒性实验
       匙精胶囊由匙羹藤叶和黄精组成，其功能为清热凉血，活血化瘀，益气养阴，降糖止渴，用于2型糖尿病，中医消渴病热盛血瘀、气阴两虚证的治疗。本次实验目的是观察小鼠灌胃给药的急性毒性反应以及大鼠连续给药180 d所产生的毒性反应和严重程度，以及停药后的发展和恢复情况，为临床安全用药提供依据。
       1  器材与方法
       1.1  材料
       1.1.1  动物  SD大鼠，体重100～120 g，雌雄各半；昆明种小鼠，体重18～22 g，雌雄各半，均为清洁级，由中国科学院上海实验动物中心提供，合格证号：中科动管第003号。
       1.1.2  药物  匙精胶囊由天然药物研究室提供，批号：20020108。实验前用蒸馏水配成不同浓度的溶液供灌胃使用。
       1.1.3  仪器  BT-224半自动生化分析仪，意大利产；BT-2100血细胞分析仪，意大利产。
       1.2  方法
       1.2.1  小鼠LD50测定  动物按体重随机分为5组，每组10只，雌雄各半，按0.3 ml/10g灌胃给匙精胶囊，一天内共灌胃4次，每次间隔5 h。剂量分别为184.93，228.31，281.86，347.98，429.60 g/kg，连续观察14 d，记录小鼠毒性反应和死亡情况，死亡动物进行尸检，记录病变情况，按Bliss法计算半数致死量（LD50）和95%可信限。
       1.2.2   大鼠长期毒性实验  大鼠实验前先对其观察1周，包括外观体征、行为活动、腺体分泌、呼吸、粪便性状、食量、体重等，取大鼠160只，雌雄各半，按体重均匀随机分为4组，即对照组和匙精胶囊低、中、高3个剂量组（以下分别简称低、中、高剂量组），每组40只（雌雄各20只)。低、中、高3个剂量组分别给予匙精胶囊5.0，10.0和20.0 g/kg，对照组给予等容积水，灌胃给药1 ml/100 g，1次/d，连续6个月。在给药期间每天观察动物行为、毛色，二便等一般情况，每周称1次体重和大鼠摄食、饮水量，于给药3个月和6个月分别每组处理12只（雌雄各半）和16只（雌雄各半）大鼠，测其凝血时间，血常规，血小板计数，血清生化指标（ALT，AST，ALP，BUN，CRE，TP，GLU，ALB，TCHO，TBIL），然后拉断颈椎处死动物，进行尸检，取其心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、脑、睾丸（连附睾）、前列腺、卵巢、子宫、用电子天平称其湿重，并计算其脏器系数。同时取其心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、甲状腺、脑、睾丸（连附睾）、前列腺、卵巢、子宫、胰腺、胃、十二指肠作病理切片，记录其组织学改变情况，并摄下彩色图片，各项测得数据按性别分组进行统计学处理，用t值法进行组间比较。
       
       所留下的动物停药观察1个月后，重复上述检查。
       2  结果
       2.1  小鼠的急性毒性实验  各组小鼠死亡前大便溏稀，踡卧少动，死亡后大体解剖除见胃、肠道膨胀充气外，其他脏器，如心、肝、脾、肺、肾、胸腺等均无异常变化。其余存活小鼠最后一次灌胃后14 d内，色泽、外观、摄食等均无异常情况。用Bliss法计算匙精胶囊灌胃给药小鼠的（LD50）和95%可信限，结果为LD50是294.23 g/kg，LD50 95%的平均可信限为267.98～323.05 g/kg。
       2.2  大鼠的长期毒性实验
       2.2.1  一般情况  本次实验中，各组大鼠给药期间行为、步态、毛色、粪便性状与水组相比，未见异常变化，停药观察1个月亦无改变。中剂量雌雄大鼠各死亡1只，由于灌药入肺导致，解剖发现肺呈水肿实质样。高剂量雌性大鼠死亡3只，高剂量雄性大鼠死亡4只。死亡大鼠病理解剖检查发现其肾脏部分呈淡黄色，肺部均有感染，动物死亡之前体重逐渐消瘦，摄食、活动减少，其余各组动物均无异常出现。
       2.2.2  摄食、饮水和体重情况  中、高剂量组雄性大鼠在给药第1周摄食明显减少。高剂量组雌性大鼠在给药第7周，高剂量雄性大鼠在给药第1，2，3，4周饮水量显著增加。雌性大鼠低剂量于给药第2周，中剂量于给药第6，11，15周，高剂量于给药第6至12周和第15周，体重明显降低；雄性大鼠，低剂量于给药第5，15周，中剂量于给药第15周，高剂量于给药第7至第27周体重明显降低。
       2.2.3   血液学检查  给药3个月、给药6个月和停药1个月进行血液学检查，各给药组血液学各指标与水组比较，均无显著差异。
       2.2.4   血液生化学指标检查  给药3个月，各给药组生化指标与水组比较均无显著差异。给药6个月，雌性大鼠中剂量ALP明显升高，高剂量ALT明显升高，高剂量CRE明显下降，与水组比较，均有显著性(P<0.05)和非常显著性意义(P<0.01)；雄性大鼠高剂量BUN明显升高，与水组比较，差异有显著性意义(P<0.05)。停药1个月后，各给药组生化指标与水组比较，均无显著意义（见表1～3）。
       表1  匙精胶囊对大鼠给药中期血液生化学指标的影响（略）
       表2  匙精胶囊对大鼠给药末期血液生化学指标的影响（略）
       表3  匙精胶囊对大鼠恢复期血液生化学指标的影响（略）
       2.2.5   主要脏器检查  给药3个月，解剖各组部分大鼠，肉眼检查，各组动物均未见异常。雌性大鼠，高剂量子宫和脾系数减少，与水组比较，有显著性(P<0.05)和非常显著性意义(P<0.01)；雄性大鼠，各给药组脏器系数与水组比较均无显著差异。给药6个月，雌性大鼠中剂量肝系数增加，高剂量组肝和肾上腺系数均增加，与水组比较，均有显著性意义(P<0.05)；雄性大鼠中剂量肝系数增加，高剂量肝和脾系数均增加，与水组比较，均有显著性差异(P<0.05)。停药1个月，雌性大鼠各给药组脏器系数与水组比较均无显著差异：雄性大鼠中剂量肝系数增加，与水组比较，差异有显著性意义(P<0.05)（见表4～6）。
       表4  匙精胶囊对大鼠给药中期脏器系数的影响（略）
       与空白组比较，*P＜0.05, **P＜0.01
       表5  匙精胶囊对大鼠给药末期脏器系数的影响（略）
       与空白组比较，*P＜0.05
       表6  匙精胶囊对大鼠恢复期脏器系数的影响（略）
       与空白组比较，*P＜0.05
       2.2.6   重要脏器病理组织学检查  给药各组在给药期和给药恢复期主要脏器病理组织学检查均无异常发现，给药期间高剂量死亡7只动物，解剖发现其肺部均有感染，肾脏部分呈淡黄色。
       3  讨论
       3.1  小鼠的急性毒性实验  匙精胶囊灌胃给药小鼠的（LD50）和95%可信限，结果为LD50是294.23 g/kg，LD50 95%的可信限为267.98～323.05 g/kg。
       3.2  大鼠的长期毒性实验  从大鼠的长期毒性实验结果中分析，匙精胶囊20.0 g/kg和10.0 g/kg（相当于60 kg人用量的53.3和26.7倍)，连续给药6个月，除雌性大鼠中剂量ALP上升，肝系数增加，高剂量ALT升高，CRE下降，肝和肾上腺系数增加；雄性大鼠高剂量BUN升高，中剂量肝系数增加，高剂量肝和脾系数增加外，其它检测各指标与水组比较均未发现有显著差异，上述变化差异在停药1个月后检查中均恢复正常。病理组织学检查除少数动物肺部有感染外，其余均未发现明显异常变化。给药期间高剂量组有7只大鼠死亡，解剖发现肾脏部分呈淡黄色，其肺部均有感染，是由于受试物浓度高，灌流的药液反流致气管肺部造成感染死亡。综上所述，匙精胶囊在人用量26.7倍（10.0 g/kg）以下的剂量组，未出现上述明显毒副反应，提示该药在临床常用剂量下长期使用，可认为是安全的。
       【参考文献】
         　［1］ 中华人民共和国卫生部.中药新药指南［S］.1993：203.
       
       ［2］ 王治乔，袁伯俊.新药临床前安全性评价与实验［M］.北京：军事医学科学院出版社，1997：43.
       
       ［3］ 王 卉，尤春来，穆 培，等.止嗽立效胶囊的毒理学研究［J］.2007,18（1）：83.