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       【摘要】 
       目的观察中气虚对温病湿热证模型大鼠TC，TG，TNF-α含量影响，探讨温病湿热证湿重于热的实质。方法用Wistar大鼠40只，随机分为4组。首先建立中气虚动物模型，然后采用多因素复合造模，造成湿重于热模型；分别灌服相应汤剂后，测定大鼠血清中TC，TG和TNF-α的含量。结果温病湿热证湿重于热模型大鼠血清TC，TG明显增高，TNF-α升高，与空白对照组相比有显著性差异（P<0.01）；湿重于热反证组经三仁汤治疗后，大鼠血清中TC，TG，TNF-α均明显下降。结论中气虚使湿重于热模型大鼠血中血脂较湿热模型组明显增高，而TNF-α增高不如湿热模型组，提示血脂可能与“湿”关系密切，TC，TG与TNF-α含量的变化可能是温病湿热证湿热转化的关键。
       【关键词】  湿重于热 中气虚 血脂 肿瘤坏死因子 动物实验
       中医学认为：“中气实则病在阳明，中气虚则病在太阴” 。本研究通过多因素复合造成湿热证模型，观察中气虚对温病湿热证大鼠血中TC，TG和TNF-α的影响，探讨湿热证湿热转化的关键及温病湿热证湿重于热的实质。
       1  材料
       1.1  动物健康Wister大鼠40只，雌雄兼用，体重(200±20) g，由贵阳医学院实验动物中心提供。
       1.2  药品及主要试剂生大黄煎剂600 ml，生药浓度为2 g/ml，三仁汤煎剂100 ml，生药浓度为1 g/ml，4℃冰箱保存，药物由贵阳中医学院一附院制剂室提供；鼠伤寒沙门氏杆菌，浓度为107个/ml，由中国军事医学科学院生物研究所提供；TC，TG试剂盒由上海合富医疗科技有限公司提供，TNF-α试剂盒由解放军总医院科技开发中心放免所提供。
       1.3  造模箱由贵阳中医学院设备科设计制造，自动调温调湿，箱内控制温度（33±2）℃，相对湿度（93±3）%。
       2  方法
       2.1  动物分组及模型制备将40只大鼠随机分为4组。A组：空白对照组；B组：湿热模型组；C组：湿重于热模型组（中气虚组）；D组：湿重于热反证组（中气虚+药物组）。每组10只，分笼饲养。造模组动物均于造模前禁食12 h，自由饮水，测定肛温、体重。A组，正常环境、正常饮食下饲养（实验室温度18～25℃，相对湿度45%～65%），第25天处死做相关检查。B组，高脂高糖饲料喂养10 d（每天猪脂10 g/200 g体重，蜂蜜1 g/200 g体重），然后置于造模箱内，并仍给予高脂高糖饮食，192 h后灌胃鼠伤寒沙门氏杆菌2 ml/200 g体重，第216小时再加强感染1次（1 ml/200 g）。然后移出置于自然环境中，于造模第240小时开始灌服生理盐水2 ml/200 g，1次/d，5 d后处死动物做相关检查。C、D组，饲以200%大黄煎剂灌胃2 ml/次，1次/d，持续10 d，然后置入造模箱内，高脂高糖饲料喂养（每天猪脂10 g/200 g体重，蜂蜜1 g/200/g体重），192 h（置入造模箱8 d）后灌胃鼠伤寒沙门氏杆菌2 ml/200 g体重，第216小时（置入造模箱9 d）再加强感染一次（1 ml/200 g体重）。然后将C、D组移出置于自然环境中，于造模第240小时予C组灌服生理盐水2 ml/200 g体重，予D组灌服100%三仁汤，2 ml/200 g体重，1次/d，5 d后处死动物做相关检查。
       2.2  诊断标准模型诊断依据全国统编教材及《外感高热症诊断试行标准》（国家中医药管理局高热症南方协作组1987-10制定）。湿热气分证湿重于热证候特征：动物模型完成后，出现发热，纳呆，倦怠，懒动，饮食及饮水量较少，大便软烂或溏泄，小便浑浊，苔白腻，证候持续3 d以上。甚则出现极度倦怠，嗜睡至死亡。
       2.3  标本检测及指标检测血脂：包括总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG），采用酶学比色法测定；TNF-α采用放射免疫法测定。
       2.4  统计学方法采用SPSS统计软件，进行统计处理，全部数据以±s表示，单因素方差分析，组间两两比较。
       3  结果
       3.1  一般情况实验过程中，A组体胖，行动迅速，精神好，毛发润泽。B组经高脂高糖喂养后，逐渐出现嗜卧、食欲不振、行动呆滞、饮水减少。C组和D组于灌胃大黄后均出现大便溏泄、粘滞，渐见肛周污秽红肿，扎堆，精神萎靡，反应迟钝，毛发竖立疏散。B、C、D组置入造模箱后肛温逐渐升高。大部分动物可见大便软烂，有粘液，肛门红肿，雄性动物阴囊皮温增高，睾丸脱出。D组在给药（三仁汤）5 d后以上症状基本消失。
       3.2  体温变化见图1。
       图1  各组造模后体温变化曲线（略）
       3.3  进食量及饮水量见表1。
       表1  动物模型一般指标的变化（略）
       与空白对照组比较，*P＜0.01；与湿热模型组比较，△P＜0.01；与湿重于热模型组比较，▲P＜0.01；与空白对照组比较，●P>0.05
       3.4  血脂（TC、TG）、肿瘤坏死因子（TNF-α）的测定造模后，B，C组TC，TG，TNF-α水平升高，与A组比较,P<0.01；C组的TC，TG水平较B组增高、而TNF-α水平较B组低，与B组比较，P<0.05，说明血脂与“湿”关系较密切；D组经灌胃三仁汤后，血中TC，TG以及TNF-α水平较B，C两组明显降低，与B，C组比较，P<0.01，与A组相比,P>0.05，说明“三仁汤”疗效确切。见表2。
       表2  TG，TC，TNF-α含量的变化（略）
       与空白对照组比较，*P＜0.01；与湿重于热反证组比较，★P＜0.01；与空白对照组比较，▲P＞0.05；与湿热模型组比较，△P＜0.05
       4  讨论
       
       湿热证是临床常见证候。脾为湿土之脏，胃为水谷之海，湿土之气同类相召，故湿热病证以中焦脾胃为病变中心，其发展取决于中气的盛衰，也就有湿热孰轻孰重的不同转归，即清·薛生白所言“中气实则病在阳明，中气虚则病在太阴”。因此详审湿热偏盛偏衰，正确使用祛湿与清热，是治疗湿热证的关键。
       
       近年来大多实验研究停留在对湿热证这一笼统概念的模拟中，忽视了温病湿热证因中气虚实不同，而有湿热偏盛偏衰之异，因此，如果将“中气虚”与“内湿”“外湿”3因素通过动物模型有机结合，就可能建立起符合温病湿热证湿重于热的动物模型，以期寻求“湿”与“热”的本质，阐明温病湿热转化的关键。本实验运用湿热气候和肥甘饮食下“湿”性致病因子与血脂的关系，建立“血中膏脂”为湿邪相关生化物质及大黄致泄、鼠伤寒沙门氏杆菌致热等建立中气虚湿热证模型，观察血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG），TNF-α的变化。结果显示中气虚使湿重于热模型大鼠血中血脂（TC、TG）较湿热模型组明显增高、而TNF-α增高不如湿热模型组。“血中膏脂”为湿邪相关生化物质的假说［1］，“高血脂为血中之痰浊”理论已被临床实践和一些实验研究所证实［2，3］。TNF-α为介导炎症反应的一种重要物质，在感染或某些应激状态下，TNF-α大量释放，引起内毒素血症，其中主要表现为发热反应。因此，湿热证“热”的量化与内毒素所诱导的TNF-α成正相关［4］。由此提示血脂（TC，TG）与“湿”关系更为密切，而肿瘤坏死因子（TNF-α）与热的关系更为密切，血脂与TNF-α含量的变化可能是温病湿热证湿热转化的关键。
       【参考文献】
         　［1］ 吕文亮.湿邪与血脂代谢异常关系的探讨［J］.河南中医学院学报，2004，19（19）：5.
       
       ［2］ 王彦晖.中医湿病学［M］.北京：人民卫生出版社，1998：10.
       
       ［3］ 朱学云.高脂血证中医辨证观现代化研究进展［J］.江苏中医药，2002，23（12）：55.
       
       ［4］ 焦炳华.分子内毒素学［M］.上海：上海科学技术出版社，1995，1：228.