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开音颗粒对小鼠免疫功能影响的实验研究
作者:严道南 卞慧敏 邢业强 蔺莉霞    
作者单位:南京中医药大学,江苏 南京 210029

《时珍国医国药》 2009年 第4期

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       【摘要】 
       目的观察开音颗粒对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和对小鼠血清溶菌酶含量的影响。 方法参照文献所载方法进行实验。结果开音颗粒高、中剂量均能提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数,并具有提高正常小鼠溶菌酶含量的趋势。结论开音颗粒对机体非特异性免疫功能有一定的增强作用。
       【关键词】  开音颗粒 免疫
       开音颗粒由活血祛淤、化痰散结的中药红花、三棱、浙贝母等组成,治疗慢性喉炎、声带小结有良好的临床效果[1]。对此方进一步开发研究,有必要检验其对免疫功能的影响,为此我们进行了开音颗粒对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和对小鼠血清溶菌酶含量影响的实验研究。现报道如下:
       1  材料
        1.1  动物ICR小鼠50只,雌雄各半,体重18~22 g,由南京中医药大学实验动物中心提供。
        1.2  药物开音颗粒浸膏,由南京中医药大学附属医院药厂提供,4.25 g生药/ml;金嗓散结丸,西安碑林中药厂产品。
        1.3  鸡红细胞悬液的制备在无菌操作下,自鸡翼下静脉采血,置于三角烧瓶中,加入相当于血液量5倍的Aisever’s溶液[枸橼酸钠·2H2O 80 g,枸橼酸0.5 g,无水葡萄糖18.7 g,NaCl 14.2 g,蒸馏水加至1 000 ml后过滤,在68.9 kPa(10磅)蒸气压灭菌20 min,4℃冰箱保存],摇匀,临用时用生理盐水洗涤3次,前2次以1 500 r/min离心分离红细胞,各5 min,最后1次以2 000 r/min离心,直至红细胞压积恒定。然后按此压积量,用生理盐水配成1%的浓度。
        1.4  溶菌酶检测板购自南京大学生化测试实验室。
       2  方法与结果
        2.1  对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响
        2.1.1  动物分组小鼠随机分为5组,每组10只,即空白对照组(等容积生理盐水)、金嗓散结丸组(2.08 g/kg)及开音颗粒高(19.5g生药/kg)、中(6.5g生药/kg)、低(2.17g生药/kg)3个剂量组。
        2.1.2  方法各组小鼠分别灌胃给药,连续5 d。第5天给药后1h于腹腔注入1%的鸡红细胞0.5 ml/只,45 min后颈椎脱臼处死小鼠,取腹腔液涂片,然后将玻片放在垫有湿纱布的盒中,置于37℃孵箱中温育30 min,取出玻片,放入生理盐水中漂洗,以除去未贴壁细胞。晾干后以甲醇液固定5 min,再用4%姬姆萨-瑞特氏液染色3 min后,用蒸馏水漂洗,晾干后在油镜下每片计巨噬细胞数200个,按下式计算其吞噬指数与吞噬百分率[2]:
        吞噬百分率(%)=吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/200个巨噬细胞×100%
        吞噬指数=被吞噬的鸡红细胞总数/200个巨噬细胞
        2.1.3  结果开音颗粒高、中剂量和金嗓散结丸对照药均能提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数,与空白对照组比较有显著性差异。结果见表1。 表1  开音颗粒对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响与空白对照组比较,*P<0.05,**P<0.01;n=10
        2.2  溶菌酶含量测定
        2.2.1  动物分组同“2.1.1”项。
        2.2.2  方法各组小鼠分别灌胃给药,连续5 d。第5天给药后1 h小鼠球后静脉丛取血,离心析出血清,用溶菌酶检测板,精确吸取10 μl小鼠血清加入检测板,水平放置,于36~37℃隔水式恒温箱,扩散反应4 h,然后用附尺量取各孔检品的溶菌圈直径,查标准曲线得出相应的溶菌酶含量。
        2.2.3  结果各给药组均有提高正常小鼠血清溶菌酶含量的趋势,但与金嗓散结丸对照组比较差异均无显著性。结果见表2。表2  开音颗粒对小鼠血清溶菌酶含量的影响
       3  讨论
        开音颗粒具有活血祛淤、化痰散结的功能,是用于治疗慢性喉炎和声带小结气滞血淤痰凝证,在临床和实验研究中均发现此方具有良好活血化淤作用[3],但是考虑到用活血化淤药物治疗炎症性疾病,必须观察其是否具备抗炎作用和提高机体免疫功能的作用,所以我们进行了此项实验。开音颗粒19.5,6.5 g生药/kg两个剂量有提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的作用,并且有提高正常小鼠血清溶菌酶含量的趋势。实验结果表明开音颗粒对机体非特异性免疫功能有一定的增强作用,可提高机体的抗感染能力,在一定程度上有助于疾病的治疗。
        
       【参考文献】
         [1] 严道南,徐 静,陈小宁,等.开音颗粒治疗慢性喉炎、声带小结65例的临床观察[J].江苏中医杂志,1999,20(10):30.
       
       [2] 徐叔云,卞如濂,陈 修. 药理实验方法学,第3版[M].北京:人民军医出版社,2002:915.
       
       [3] 严道南,卞慧敏,徐 静,等.开音片治疗慢性喉炎、声带小结的临床和实验研究[J]. 中医杂志,1998,39(11):674.

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