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       【摘要】 
       目的建立栀子和水栀子的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱并进行比较研究。方法采用反相高效液相色谱法，使用CenturySIL C18 BDS柱(20 cm×4.6 mm，5 μm)，以1%醋酸水-1%醋酸乙腈为流动相，低压线性梯度洗脱，检测波长265 nm，柱温(30.0±0.15)℃，进样量5 μl，测定栀子和水栀子的HPLC指纹图谱。结果以栀子苷峰为参照物峰，确定35个共有峰，将水栀子和栀子的HPLC指纹图谱进行比较，并用“中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统”软件对其进行全面评价。结论水栀子在化学成分分布上与栀子极为相似，但各组分的含量相差较大。
       【关键词】  水栀子; 栀子; 高效液相色谱指纹图谱
       Abstract：ObjectiveTo investigate the differences between the HPLC fingerprints of Fructus Gardeniae and Fructus Gardeniae Grandiflorae. MethodsThe chromatographic fingerprints were obtained by injecting the sample solution each time on a CenturySIL C18 BDS column (20 cm×4.6 mm，5 μm) with the gradient elution solvent system composed of 1% acetate acid -water and 1% acetate acid -acetonitrile. The flow rate was 1.0 ml/min, the column temperature was maintained at (30.00±0.15)℃ and the detection wavelength was set at 265 nm. Results35 co-possessing peaks were selected as the fingerprint peaks by taking Geniposide peak as the reference peak. The fingerprints were compared and comprehensively evaluated by “The digitized evaluation system of the Traditional Chinese Medicine fingerprint with the super-information characteristics”.ConclusionThere were good similarities between the HPLC-FPs of Fructus Gardeniae and Fructus Gardeniae Grandiflorae in terms of the distribution of chemical ingredients, but the quantitative similarity was not desirable.
       Key words：Fructus Gardeniae; Fructus Gardeniae Grandiflorae; HPLC digital fingerprint
       栀子为茜草科植物栀子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果实，2005年版《中国药典》作为正品入药的栀子仅此一种。水栀子则为同科植物大花栀子Gardenia jasminoides Ellis var.grandiflora Nakai的果实。水栀子为栀子的一个变型，果实较栀子长，历来只作染料用或外用治扭挫伤等，栽培于水溪岸旁，分布于江西、广西、贵州、湖北、湖南、四川等地[1]。研究发现，水栀子中含栀子苷高于栀子1倍多，且有利胆和抗炎作用，均比栀子更显著[2]。为了能充分利用与开发水栀子的宝贵资源，本文从指纹图谱角度对水栀子与栀子作全面比较，为其药材鉴别及开发利用提供科学依据。
       1 仪器与试药
       Agilent 1100 型液相色谱仪(配有二极管阵列检测器、低压四元梯度泵、在线脱气装置、自动进样器)，ChemStation工作站(Agilent科技有限公司)。KQ-50B型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)，旋转蒸发仪RE52(上海亚荣生化仪器厂)，Sarturius-BS110S 分析天平(北京赛多利斯天平有限公司)。栀子苷(中国药品生物制品检定所)，乙腈(色谱纯，山东禹王实业有限公司)，冰醋酸(色谱纯，天津市科密欧化学试剂开发中心)，其它试剂均为分析纯，所用水为去离子水。10批栀子药材产自S1河南唐河县，S2贵州铜仁，S3安徽池州东至县，S4河南桐柏县，S5云南威信县，S6云南省红河哈尼族彝族自治州，S7浙江五凤乡，S8四川达县，S9江西金溪县，S10广西鹿寨县。10批水栀子药材产自P1江西樟树市，P2广西富川县，P3广西全州县，P4广西柳州市，P5浙江安吉县，P6湖北广水市，P7湖北襄樊市，P8江西抚州市，P9四川开江县，P10湖南龙山县。
       2 方法
       2.1 样品溶液制备
       2.1.1 供试液制备栀子于60℃干燥40 min，粉碎后取约2.5 g，精密称定，加水50 ml，回流提取2 h，滤过，残渣加水30 ml，继续回流1.5 h，合并两次滤液，减压浓缩至20 ml，加乙醇至80%(V/V)，冷处避光放置、醇沉24 h，滤除沉淀，减压回收乙醇至无醇味，残液再用水定容至25 ml，摇匀，即得。同法可得水栀子供试液。
       2.1.2 对照品溶液制备 精密称取栀子苷对照品5.0 mg，置25 ml量瓶中，以甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，即得。
       2.2 色谱条件 CenturySIL C18 BDS 柱( 25 cm×4.6 mm，5 μm )，所用A=1%醋酸水，B=乙腈(含1%醋酸)，低压线性梯度程序：0～3 min，0～0%B;3～9 min，0～5%B;9～22 min，5～10%B;22～30 min，10～12.5%B;30～45 min，12.5～30%B;45～50 min，30～36%B;50～75 min，36～86%B;流速1.0 ml·min-1，柱温(30±0.15) ℃，进样量5 μl，紫外检测波长265 nm。
       3 结果与讨论
       3.1 栀子HPLC指纹图谱的建立
       3.1.1 参照物峰选择 将栀子苷对照品溶液和栀子样品供试液分别进样5 μl。对比保留时间及在线紫外光谱图可知栀子苷峰在23.6 min左右。由于栀子苷峰与相邻峰分离很好，在测定时比较稳定，峰面积较大，因此选作参照物峰。3.1.2 指纹图谱方法学考察经指纹图谱方法学考察，各项指标均符合要求。
       3.1.3 栀子HPLC指纹图谱建立按“2.2”项条件将10个不同产地栀子供试液在HPLC仪上进样分析，记录色谱图，比较分析并以出现率100%计，确定35个共有峰，见图1。将10批栀子色谱图原始信号导入孙国祥等[3]开发的“中药指纹图谱超信息特征数字化评价系统”软件生成对照指纹图谱(平均值法)数据(见表1)。结果10批栀子与对照指纹图谱的相似度SF≥0.936。图1 栀子的HPLC指纹图谱表1 栀子对照HPLC-FP峰信息
       3.2 水栀子的HPLC指纹图谱建立按“2.2”项条件将10个不同产地水栀子供试液在HPLC仪上进样分析，记录色谱图，比较分析并以出现率100%计，确定35个共有峰，见图2。将10批水栀子色谱图原始信号导入孙国祥等[3]开发的“中药指纹图谱超信息特征数字化评价系统”软件生成对照指纹图谱(平均值法)数据见表2。以夹角余弦为测度计算10批水栀子与对照指纹图谱的相似度SF≥0.921。图2 水栀子的HPLC指纹图谱表2 水栀子对照HPLC-FP峰信息
       3.3 水栀子和栀子HPLC指纹图谱超信息特征数字化评价结果分析由“中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统”软件分别计算得水栀子和栀子HPLC指纹图谱超信息特征数字化评价结果，选择代表性指标进行比较，见表3(表中数据为二者对照指纹图谱数据)。从表3中可见：①水栀子的γ和δ值都比栀子的相应数值小，说明其指纹信号均化性差。②水栀子的η值较大，说明其色谱空间占有率较大。③水栀子的平均峰高较大。④指纹图谱指数F和指纹图谱信息量指数I是反映指纹信号强度、信号大小均性、分离程度的综合指数，水栀子的F，Fr，I和Ir值都较大。表3 栀子和水栀子HPLC指纹图谱超信息特征数字化评价结果图3 水栀子对照指纹图谱与栀子对照指纹图谱比较图4 结论
       本实验建立了水栀子和栀子的HPLC指纹图谱，用“中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统”软件,采用多个量化指标从多维角度、多侧面、全方位、宏观定性定量揭示了水栀子HPLC指纹图谱隐含的超信息特征，并比较了水栀子与栀子HPLC指纹图谱的差异，水栀子与栀子在化学成分分布上极为相似，但各组分的含量相差较大，这为进一步开发利用水栀子提供了依据，也为进行药效学研究奠定了基础。
       【参考文献】
         　[1] 付小梅，赖学文，葛 菲，等.中药栀子类药材资源调查和商品药材鉴定[J].中国野生植物资源，2002，21(5)：23.
       
       [2] 付小梅，葛 菲，褚小兰，等.栀子和水栀子利胆抗炎作用的对比研究[J].江西中医学院学报，2001，13(4)：165.
       
       [3] 孙国祥，侯志飞，董鸿晔，等.超复方中药指纹图谱多维多息特征数字化评价方法研究[M].杭州：浙江大学出版社，2006：127.