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       【摘要】 
       目的以小鼠常压耐缺氧存活的时间为指标 ,探讨香丹注射液抗缺氧作用功效的有效部位。方法用极性由小到大的5种溶剂依次萃取香丹注射液,所得各提取部位组及其部位组合组给小鼠ip给药，观察小鼠在常压缺氧条件下存活的时间。结果正丁醇和水提取部位组对小鼠常压缺氧存活的时间延长作用强度等同全方;正丁醇提取部位与水提取部位组合组与全方比较有显著性差异。结论香丹注射液抗缺氧作用药效物质基础主要存在正丁醇与水的极性区间。
       【关键词】  香丹注射液; 抗缺氧作用; 有效部位
       Experimental Study on Anti-anoxia Effective Part of Xiangdan Injection
       YANG Chaoyan ,TANG Chunping*,SHEN Zhibin,GONG Mengjuan， ZHU Junfang
       (Department of Chinese Medicine,Guangdong College of Pharmacology,Guangzhou 510006,China)
       Abstract：Objective To study the anti-anoxia effective part of XiangDan injection.MethodsAdopt different polar solvents extraction method to get different extracts from XiangDan injection. Each extract was given by intraperitoneal injection in mice, and the survial time of mice was observed under the normal pressure and hypoxia.Resultsn-butanol extract and water extract could significantly prolong the survival time which were equal to the XiangDan injection. The combination of n-butanol extract and water extract were significantly different from the XiangDan injection .Conclusionn-butanol extract and water extract are anti-anoxia effective parts.
       Key words：XiangDan injection; Anti-anoxia ; Effective part
       香丹注射液又称复方丹参注射液，是由丹参、降香两味中药经提取精制而成，具有扩张冠脉、增加冠脉血液量、保护心肌缺血缺氧、清除自由基、保护肝损害、镇静、改善血液流变学等作用，主要用于心绞痛,也可用于心肌梗塞[1]。本实验以小鼠常压耐缺氧存活的时间为指标,探讨香丹注射液发挥抗缺氧作用功效的有效部位，初步确定香丹注射液抗心肌缺血的药效物质基础。
       1 材料
       1.1 药物石油醚提取部位(A)、氯仿提取部位(B)、乙酸乙酯提取部位(C)、正丁醇提取部位(D)，水提取部位(E)及其组合部位(各含生药0.8g/ml)均由广东药学院中药学院中药化学教研室提供;香丹注射液 (正大青春宝药业有限公司，批号：0702071) ;钠石灰(广东光华化学厂有限公司，批号：20061020);盐酸普萘洛尔(大同市卫华药业有限公司，批号070304)。
       1.2 动物NIH小鼠，SPF级, 体质量18～22 g ,雌雄各半,由广东省医学实验动物中心提供(合格证号:2007A004)。
       2 方法与结果
       2.1 香丹注射液对小鼠常压耐缺氧存活时间的影响[2]取50只小鼠(雌雄各半)，随机分5组:生理盐水对照组;盐酸普萘洛尔(0.04g/kg)组;香丹注射液低、中、高剂量(8，16，32 g生药/kg)组，每组10只,各组ip给药，1次/d,连续给药3 d，末次给药40 min后，将小鼠分别放入 125 ml磨口广口瓶内密封(瓶内放钠石灰25 g,每瓶放小鼠1只，瓶口涂以凡士林)，立即计时,以停止呼吸为标准,观察小鼠存活时间。结果见表1。表1 香丹注射液对小鼠常压耐缺氧存活时间的影响由表1可知，香丹注射液高、中、低剂量组都有明显延长小鼠存活时间的作用。
       2.2 5个不同极性提取部位组对小鼠常压耐缺氧存活时间的影响[2]取80只小鼠(雌雄各半)，随机分8组:生理盐水对照组,盐酸普萘洛尔(0.04g/kg)组,香丹注射液(16 g生药/kg)组,香丹注射液5个不同极性提取部位A、B、C、D、E (16 g生药/kg)组，每组10只，其余操作同上。结果见表2。表2 不同极性提取部位组对小鼠常压耐缺氧存活时间的影响与生理盐水组比较，★ ★P<0.01，(t检验);n=10
       由表2可知，正丁醇提取部位与水提取部位使对小鼠常压耐缺氧存活的时间明显延长(P < 0.01)，且与全方比较无显著性差异 (P>0.05) ,作用强度等同全方,即正丁醇提取部位与水提取部位均能代表全方抗缺氧功效的物质基础。而石油醚提取部位, 氯仿提取部位, 乙酸乙酯提取部位对小鼠存活的时间没有延长作用。
       2.3 各提取部位组合组对小鼠常压耐缺氧存活时间的影响[2] 取150只小鼠(雌雄各半)，随机分15组:生理盐水对照组，盐酸普萘洛尔(0.04 g/kg)组，香丹注射液(16 g生药/kg)组，香丹注射液12组不同极性提取部位组合组：DE、AE、CE、ABCDE、ABC、AB、ACD、ADE、BCE、BD、BDE 、CD组(16 g生药/kg)，每组10只，其余操作同上。表3 各提取部位组合组对小鼠常压耐缺氧存活时间的影响与生理盐水组比较，★ ★P<0.01，★P<0.05;与香丹注射液组比较，▲P<0.05(t检验);n=10
       由表 3可知，其中DE、AE、ABCDE、ADE和BDE组合组对小鼠常压耐缺氧存活的时间有延长作用，其中DE组合作用最强 ,且与全方组比较有显著性差异 ( P<0.05) ,推测认为该组合部分是香丹注射液抗缺氧的物质基础。
       3 讨论
       香丹注射液在临床主要用于心绞痛、心肌梗塞等。心肌代谢，特别是氧的供需矛盾是冠心病的重要病理生理变化。小鼠在密闭容器中受缺氧因素损害,主要反应在心和脑缺氧[2]，本实验全方具有显著延长小鼠的存活时间，说明该方对脑缺氧和心肌缺氧有改善作用。正丁醇提取部位与水提取部位也有对小鼠常压耐缺氧存活的时间延长作用，强度等同全方功能。而石油醚提取部位﹑氯仿提取部位和 乙酸乙酯提取部位对小鼠存活的时间没有延长作用,其中正丁醇提取部位+水提提取部位组合组延长小鼠的存活时间作用最强 ,且与全方组比较有显著性差异,表明该组合提取部位是香丹注射液抗缺氧的物质基础。
       香丹注射液是由丹参的水提液和降香的饱和芳香水加工配制而成的，丹参为该制剂的君药，其化学成分主要为脂溶性的二萜醌类和水溶性的酚酸类两大类，脂溶性成分具有抗肿瘤，抗氧化和对心肌有保护等药理作用[3];水溶性成分丹酚酸B具有抗肝纤维化，对大鼠心肌缺血再灌注损伤和对脑缺血具有保护作用,对动脉粥样硬化具有防治等药理作用[4]。降香主要化学成分为挥发油类和黄酮化合物，其挥发油能抑制血栓的形成[5]。本实验表明香丹注射液抗缺氧的有效部位主要是正丁醇部分与水部分，正丁醇部分与水部分主要是极性较大的物质，所以降香的挥发油在这两极性部分的含量极少，两极性区间的物质可能主要是丹参的水溶性成分[6]，如丹参素，原儿茶醛、丹酚酸 C 和 B等，具体有效成分有待进一步探讨。本研究仅选择小鼠在常压缺氧条件下存活的时间为指标结论有一定局限性。我们还将根据香丹注射液的功能主治，采用大鼠心肌缺血模型和血流动力学实验，进一步研究香丹注射液的抗心肌缺血的物质基础。
       【参考文献】
         　　[1] 杨 丽.香丹注射液的临床用途及其不良反应[J].中华实用医药杂志，2004,14(4):60.
       
       [2] 陈 奇.中药药理研究方法学，第2版[M].北京：人民卫生出版社，2006.
       
       [3] 范慧霞.中药丹参药理作用研究概况[J].新疆中医药，2007,25(5):113.
       
       [4] 吕志刚,徐列明.丹参酚酸B的药理研究概况[J].医学研究杂志,2008,37(8):114.
       
       [5] 訾 慧.中药降香研究进展[J].辽宁中医学院学报,2003,5(2) :90.
       
       [6] 王海峰.丹参有效成分及药理研究概况[J].社区医学杂志，2007,5 (1):40.