文章标题 全文   多个检索词，请用空格间隔。

       【摘要】 
       目的研究常规煎煮法提取赤芍中芍药苷的方法。方法采用正交实验设计，考察乙醇浓度、提取时间、提取次数、提取温度对煎煮法提取芍药苷的影响并进行优化。结果最佳煎煮法提取赤芍中芍药苷的工艺是80℃下40%乙醇提取3次，2 h/次，芍药苷提取率为35.4 mg/g。结论煎煮仍是常用的中药提取方法，该研究为赤芍煎煮法提取提供参考的优化方法和工艺条件。
       【关键词】  煎煮法; 赤芍; 芍药苷; 正交实验
       赤芍Radix Paeoniae Rubra为毛茛科植物芍药Paeonia lactiflorapau或川赤芍的干燥根，在神农本草经和历代医籍文献中均有记载，其功效为清热凉血、祛瘀止痛。赤芍有免疫调节作用，临床常用于肿瘤和血瘀症的治疗，尤以肝病常见[1]。国内外研究表明，其主要有效部位为赤芍总苷[1，2]，赤芍总苷中的主要成分为芍药苷，芍药苷具有扩张血管、镇痛镇静、抗炎抗溃疡、解热解痉、利尿、抗应激性溃疡病、扩张冠脉血管、对抗急性心肌缺血以及抑制血小板凝聚等多方面作用，而且毒性小，临床已用于治疗冠心病。
       赤芍提取方法很多，包括超声波提取[3]、水煎煮[4]、微波提取[5]等，使用的提取溶剂包括水、乙醇、甲醇等[6]，然而常规的煎煮法仍然是目前药典和工业实际应用最常用的提取方法。本文采用L16(45)正交设计实验，综合考虑水和乙醇作为溶剂，以乙醇浓度(当浓度为0时即为水煎煮)、提取时间、提取次数和提取温度等工艺条件为考察因素，以芍药苷含量为考察指标，确定煎煮法提取赤芍中芍药苷的最佳工艺。
       1 仪器与试药
       日本岛津液相：LC-10ATvp，SPD-M10Avp二级管阵列检测器(DAD)，SIL-10AD自动进样器，CLASS-VP色谱处理系统。电子天平，恒温水浴锅。赤芍(净制中药饮片，杭州中药饮片厂);芍药苷对照品(购于中国药品生物制品检定所);甲醇(色谱纯);乙醇(分析纯);桶装纯净水经Milipore过滤后使用。
       2 方法与结果
       2.1 高效液相色谱分析
       2.1.1 色谱条件色谱柱：Agilent C18 柱(150 mm×4.6 mm，5 μm);流动相：甲醇-0.5%醋酸(30∶70);流速：1.0 ml/min;检测波长：230 nm;进样量：20 μl。保留时间约在7.0 min。柱温：30℃。
       2.1.2 对照品溶液的配制精密称取芍药苷标准样品12.7 mg，置50 ml量瓶中，加30%的甲醇定容至刻度，摇匀，即得对照品溶液(0.254 mg/ml)。
       2.1.3 标准曲线的绘制分别精密称取芍药苷标准品0.6295 g，用30%甲醇定容至50 ml(12.59 mg/ml)，取该溶液依次进样1.0，3.0，6.0，9.0，12.0，15.0，18.0 μl，以色谱峰峰面积积分值对进样量回归，回归方程为Y=-6 613.6+349 027.2X，r=0.999 94，线性范围是12.59～151.08 μg。
       2.2 芍药苷的提取按正交设计实施实验，每次称取赤芍饮片10 g，溶剂用量固定为10倍，提取完毕后，用10 ml的移液管量取提取液10.00 ml，稀释至100.0 ml，然后从稀释后的提取液中移取1ml于离心管中， 12 000 r/min的条件下离心10 min，取样进行高效液相分析芍药苷浓度，并计算芍药苷得率。其中芍药苷得率为单位质量赤芍药材提取出来的芍药苷质量，单位为 mg/g。
       2.3 最佳工艺条件的研究采用L16(45)正交试验设计表，对乙醇浓度、提取时间、提取次数、提取温度4个因素进行考察，并进行方差分析。结果见表1～2。
       由表1～2可得各因素对芍药苷提取率的影响大小次序为C>B>A>D，最佳工艺条件为A2B4C3D4，即以40%乙醇为提取溶剂，100℃提取3次，2 h/次。由于80℃和100℃下的提取率非常相近，故从能源节约的角度出发，选择提取温度80℃。提取次数增加1次，不仅增加10倍溶剂倍量，并且40%乙醇回收过程也较为耗能，提取次数为3次和4次差别在10%以内。综合考虑，在实际生产中，为了节约能耗和成本，最佳工艺方案为以40%乙醇为提取溶剂，80℃提取3次，2 h/次。
       按上述最佳工艺条件对芍药苷的提取工艺进行验证，结果芍药苷提取率为35.4 mg/g。表1 正交实验表2 方差分析
       3 结论
       通过正交实验分析可知，影响因素顺序为提取次数>提取时间>乙醇浓度>提取温度。综合考虑节能和提取成本，最佳煎煮法提取赤芍中芍药苷的工艺为以40%乙醇为提取溶剂，80℃提取3次，2 h/次。
       【参考文献】
         　[1] 许惠玉. 赤芍总甙对荷瘤鼠细胞因子及诱导细胞凋亡影响因素的实验研究[D]. 黑龙江医药大学硕士学位论文，2005：22.
       
       [2] 刘 超，王 静，杨 军. 赤芍总甙活血化瘀作用的研究[J]. 中药材，2000，23(9)：557.
       
       [3] 陈 赟，瞿海斌. 超声强化水提赤芍中芍药苷的工艺研究[J].中国现代应用药学杂志，2005，22(7)：607.
       
       [4] 蒋宇利. 正交试验优选赤芍水煎煮工艺[J].现代中药研究与实践，2003，17(5)：48.
       
       [5] 范文成，叶晓红，李向军，等. 微波提取赤芍中芍药苷的实验研究[J]. 中成药，2008，30(1)：137.
       
       [6] 路小平. 赤芍中芍药苷提取溶剂的选择[J].时珍国医国药，2006，17(6)：1017.