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       【摘要】 
       目的比较金边瑞香不同提取物的体内抗肿瘤作用。方法采用系统溶剂萃取法对金边瑞香进行提取及初步分离，利用小鼠皮下移植性肿瘤模型观察不同浓度金边瑞香不同提取物的体内抗肿瘤作用。结果金边瑞香醋酸乙酯提取物、正丁醇提取物和总浸膏对荷S180瘤小鼠的肿瘤生长均有抑制作用，20 g/(kg·d)金边瑞香剂量组抑瘤率分别达到39.90%，48.56%，46.15%。金边瑞香各提取物对小鼠的胸腺指数和脾脏指数无明显影响。结论金边瑞香正丁醇提取物为其抗肿瘤有效部位。
       【关键词】  金边瑞香；提取物；抗肿瘤作用
       金边瑞香Daphne odora var. marginata是瑞香的变种，属瑞香科瑞香属常绿小灌木，为我国传统名花［1］，以其色、香、姿、韵四绝而具有很高的观赏价值，此外还具有较高的药用价值。金边瑞香含有瑞香苷，水解生成瑞香素，其根、茎、叶、花均可入药，性甘无毒，具有清热解毒、消炎去肿、活血化瘀、散结止痛之功效。瑞香叶能治疮疡、风痛；花可治咽喉牙齿肿痛；根茎能治毒蛇咬伤、跌打损伤等。近年来研究表明金边瑞香具有抗炎症［2］、抑菌、抗脂质过氧化、抗衰老［3］作用，对正常小鼠和荷瘤小鼠的细胞免疫、非特异性免疫、红细胞免疫功能均有促进作用［4～6］，且前期研究已表明金边瑞香浸膏具有体内外抗肿瘤作用［7］，但其抗肿瘤有效部位和有效成分尚未见文献报道。本研究主要比较金边瑞香不同提取物的抗肿瘤作用，从而初步筛选出其抗肿瘤有效部位，为金边瑞香的进一步研究开发提供实验依据。
       1  材料
       1.1  药品与试剂金边瑞香浸膏由江西省中医药研究所熊学敏教授提供，含生药量5 g/ml；石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇等所用试剂均为分析纯。
       1.2  动物及瘤株健康昆明种小鼠，由南昌大学医学院实验动物科学部提供，6～8周龄，体质量18～22 g；腹水型肉瘤S180小鼠由赣南医学院组胚教研室林卡莉教授惠赠。
       2  方法
       2.1  金边瑞香浸膏有效部位的分离取金边瑞香浸膏加水热浴后，依次用2～……3倍量石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇萃取，收集各萃取液，回收溶剂并减压浓缩，提取后的水液浓缩成浸膏，分别得到石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇及水5部分提取物。
       2.2  各抗肿瘤实验样品的配制临用前石油醚、氯仿、醋酸乙酯提取物用吐温80溶解配制，正丁醇及水提取物用氯化钠注射液溶解配制成所需浓度。
       2.3  金边瑞香不同提取物对荷S180瘤小鼠体内抑瘤实验取生长良好的小鼠移植性肿瘤细胞S180，用生理盐水稀释成1×106/ml，于小鼠右腋部皮下接种0.2 ml瘤细胞悬液，建立荷瘤小鼠模型。小鼠随机分为19组，金边瑞香5种提取物和总浸膏均设高、中、低3个剂量组，剂量分别为10 ，20 ，40 g/(kg·d)，每天用不同浓度金边瑞香各提取物灌胃给药1次，对照组给予生理盐水，0.4 ml/次，连续给药10 d。停药次日处死小鼠，解剖分离皮下瘤块，称瘤重，计算各组平均瘤重和抑瘤率。
       2.4  胸腺、脾脏指数的测定停药次日处死小鼠，称体质量，取出胸腺、脾脏，用电子天平称胸腺，脾脏重量，计算胸腺指数、脾脏指数。
       2.5  统计方法结果以 ±s表示，采用SPSS11.5软件进行统计分析，多样本均数比较用单因素方差分析，以P＜0.05为有统计学差异。
       3  结果
       3.1　金边瑞香不同提取物体内抑瘤实验给药后各组平均瘤重及抑瘤率见表1。与生理盐水对照组比较，金边瑞香醋酸乙酯提取物、正丁醇提取物与总浸膏的各剂量组差异有显著性，其中20 g/(kg·d)金边瑞香剂量组平均瘤重明显降低（P＜0.01）；而金边瑞香醋酸乙酯提取物、正丁醇提取物与金边瑞香总浸膏的高、中、低剂量组相比差异无显著性；金边瑞香石油醚、氯仿、水提取物的高、中、低剂量组与金边瑞香总浸膏的高、中、低剂量组之间差异均有显著性，平均瘤重高于总浸膏组，抑瘤率明显低于总浸膏组。表1  金边瑞香不同提取物对荷S180小鼠肿瘤重量的影响(略)
       3.2  金边瑞香不同提取物对荷瘤小鼠胸腺指数、脾脏指数的影响不同浓度的金边瑞香不同提取物对荷S180瘤小鼠胸腺指数、脾脏指数的影响见表2，金边瑞香提取物各剂量组与生理盐水对照组相比，胸腺指数、脾脏指数差异无显著性；金边瑞香石油醚和氯仿提取物在40 g/(kg·d)剂量组时胸腺指数明显低于金边瑞香总浸膏组，差异有显著性；金边瑞香氯仿提取物在20g/(kg·d)剂量组时脾脏指数明显低于金边瑞香总浸膏组，差异有显著性。
       表2  金边瑞香不同提取物对荷S180小鼠胸腺指数、脾脏指数的影响(±s)
       4  讨论
       
       　　自20世纪70年代初，瑞香科瑞香属植物便成了植物化学和药学研究的一个热点［8］。金边瑞香为我国名贵花卉之一，国内外研究不多，鉴于金边瑞香具有促进小鼠免疫功能［4～6］和体内外抗肿瘤作用［7］ ，而目前对金边瑞香的生物学活性研究大部分局限于总浸膏，本研究采用系统溶剂萃取法对金边瑞香进行提取及初步分离，进一步比较金边瑞香不同提取物的抗肿瘤作用，从而初步筛选出金边瑞香的抗肿瘤有效部位，其研究价值是不言而喻的。
       
       不同浓度的金边瑞香不同提取物体内抑瘤实验结果表明，金边瑞香醋酸乙酯提取物、正丁醇提取物和总浸膏对荷S180瘤小鼠的肿瘤生长均有抑制作用，差异无显著性，20 g /(kg·d)金边瑞香剂量组抑瘤率分别达到39.90%，48.56%，46.15%，且对小鼠的胸腺指数和脾脏指数无明显影响；而金边瑞香石油醚、氯仿、水提取物与对照组相比均未见明显抑瘤效果。由此我们认为金边瑞香醋酸乙酯提取物和正丁醇提取物在体内有显著的抗肿瘤活性，尤其以金边瑞香正丁醇提取物抗肿瘤活性最强，为其抗肿瘤有效部位，其作用机理和抗肿瘤成分值得进一步研究与探讨。
       【参考文献】
         ［1］熊学敏，方裕华，曹珏，等.金边瑞香鲜花中瑞香素的超临界萃取及条件的优化［J］.中国新药杂志, 2003,12（7）：534.
       
       ［2］叶和杨，曾靖，杨敬格，等.金边瑞香的抗炎症作用［J］. 赣南医学院学报，2002, 22（l）：7.
       
       ［3］叶和杨，周俐，曾靖，等. 金边瑞香对小鼠SOD活性及MDA含量的影响［J］.赣南医学院学报，2003,23（3）：246.
       
       ［4］徐静，傅颖媛.金边瑞香对小鼠免疫细胞的影响［J］. 广东医学，2005，26（9）：1207.
       
       ［5］徐静，傅颖媛.金边瑞香浸膏对小鼠免疫功能影响的量效关系［J］. 中国临床康复,2005，9（43）：103.
       
       ［6］黄彬红，傅颖媛，徐静，等.金边瑞香对荷S180瘤小鼠免疫功能的影响［J］. 时珍国医国药，2008，19（10）：2376.
       
       ［7］徐静，傅颖媛，黄彬红，等.金边瑞香浸膏体内外抗肿瘤作用［J］. 中国新药杂志，2008，17（23）：2019.
       
       ［8］莫建初，程家安.瑞香属植物生物活性研究进展［J］. 天然产物研究与开发，2003, 15（2）：167.