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白鲜皮抗炎有效部位的研究
作者:杨桂明,艾丹    
作者单位:黑龙江中医药大学佳木斯学院,黑龙江 佳木斯 154007

《时珍国医国药》 2010年 第9期

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       【摘要】 
       目的对白鲜皮的抗炎有效部位进行筛选。方法抗炎模型采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型,以吲哚美辛为阳性对照药物,分别考察白鲜皮不同提取物的抗炎作用,筛选白鲜皮抗炎有效部位。结果白鲜皮40%乙醇提取物和70%乙醇提取物均不具有抗炎作用;水提取物和95%乙醇提取物有抑制二甲苯造成的非特异性耳廓肿胀的作用,与空白对照组比较,有显著性差异(P<0.05),与吲哚美辛作用相似,但水提取物抗炎作用弱于95%乙醇提取物。结论95%乙醇提取物是白鲜皮的抗炎有效部位。
       【关键词】  白鲜皮; 抗炎作用; 有效部位; 药效筛选; 二甲苯
       白鲜皮为芸香科白鲜属植物白鲜Dictamnus dasycarpus Turcz. 的根皮[1],具有清热燥湿、祛风解毒、止痒的功效。现代药理研究发现,白鲜皮具有抗氧化、抗病毒、抗细菌、抗炎、抗肿瘤等多种活性,临床上用于治疗急慢性湿疹、银屑病、皮肤瘙痒症、黄疸和急慢性肝炎等病,并对心血管及血液病有一定疗效[2~4],尚未见其抗炎有效部位的研究报告。为了提高白鲜皮在传统用药中的疗效,本文采用了二甲苯致小鼠耳廓肿胀的动物模型,对白鲜皮的水提物及不同浓度的醇提物的抗炎作用进行实验研究,为最大限度地开发白鲜皮的药理作用提供可靠的实验依据。
       1  材料与仪器
       1.1  动物SPF级KM小鼠60只,体质量18~22 g,♂,由黑龙江中医药大学实验动物中心提供,合格证号SCXK黑2008004,适应饲养3 d后供试。
       
       1.2  药物药材:白鲜皮购于河北安国药材市场,经黑龙江中医药大学中药学教研室陈效忠副教授鉴定为芸香科植物白鲜Dictamnus dasycarpus Turcz.的干燥根皮,粉碎成粗粉,备用。
       受试药物白鲜皮:水提物、40%乙醇提取物,70%乙醇提取物和95%乙醇提取物的生药含量均为200%,供药效筛选用。
        
       阳性对照药物:吲哚美辛肠溶片,临汾宝珠制药有限公司,批号:090201。
       
       空白对照药物:生理盐水,浙江济民制药有限公司,批号:08122403。
       1.3  试剂及仪器二甲苯,分析纯,哈尔滨化工化学试剂厂(批号:200408141);乙醇,化学纯,吉林市天池医用酒精分装厂(批号:070301);电子分析天平,德国赛多利斯集团(型号:ALC-210.4);恒温水浴锅,天津市泰斯特仪器有限公司(型号:DK-98-1)。
       2  方法
       
 
       2.1  受试药物制备方法白鲜皮水提物的制备方法:称取白鲜皮粗粉100 g,分别加1 000 ml,800 ml和600 ml的水,煎煮3次,每次煎煮1.5 h,合并水提液,滤过后浓缩至50 ml,备用。
       
       白鲜皮乙醇提取物的制备方法:称取白鲜皮粗粉3份,每份100 g,分别用浓度为40%、70%和95%的乙醇400 ml,于恒温水浴锅(100℃)中回流提取2 h,提取液经滤过后,回收乙醇至溶液体积为50 ml,备用。
       2.2  阳性对照药物制备方法吲哚美辛肠溶片,每片25 mg,实验时用蒸馏水配置成5 mg·ml-1的溶液,备用。
       2.3  抗炎实验[5]KM小鼠60只随机分成6组:空白对照组,吲哚美辛组,40%乙醇提取物组,70%乙醇提取物组,95%乙醇提取物组和水提取物组。灌胃给药,给药剂量见表1。空白对照组给予等容积生理盐水,1次/d,连续7 d。末次给药1 h后,将二甲苯50 μl均匀涂抹于小鼠右耳两面,左耳不涂作为对照,致炎1 h后脱颈处死动物,沿耳廓基线剪下两耳,用直径9 mm打孔器打下双耳同一部位圆片,用电子分析天平精密称重,右耳片重量减去左耳片的重量即为肿胀度,抑制率(%)=(模型组肿胀度-给药组肿胀度)/模型组肿胀度×100%。
       2.4  统计学处理本实验中实验结果用±s表示,运用SPSS11.5软件统计,各受试药物组数据与对照组数据的比较均选用t检验。
       3  结果
       
  
       结果如表1所示。与空白对照组比较,95%乙醇提取物组和水提取物组均能减轻二甲苯致炎小鼠的耳廓肿胀程度(P<0.05), 提示95%乙醇提取物和水提取物均有较好的抗炎作用;与吲哚美辛组比较,95%乙醇提取物组和水提物组抗炎作用未见明显差异(P>0.05);与空白对照组比较,40%乙醇提取物组和70%乙醇提取物基本不具有抗炎作用(P>0.05)。表1  对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响(略)
       4  讨论
       
  
       非特异性炎症是具有血管系统的活体组织对局部损伤的反应[6]。在炎症的早期,某些炎症介质刺激血管,使血管扩张,血管内皮间隙扩大,血管壁通透性增强,血管内的液体、蛋白质和白细胞等渗出到组织间隙,随着渗出的增加,造成组织肿胀,炎症渗出组织肿胀是急性炎症病理组织学的主要特征[7,8]。本研究采用二甲苯作为致炎因子,引起急性炎症反应,通过测定小鼠耳廓的肿胀程度,反映出白鲜皮不同提取物的抗炎效果。实验研究结果表明95%乙醇提取物和水提取物能抑制二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀,提示两者具有显著的抗炎作用,结果显示95%乙醇提取物的抗炎作用优于水提取物。
       
       本实验采用的炎症模型是非特异性炎症模型-二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型,这种模型具有方法合理、效果明显、误差范围小、技术难度低等特点,是天然药物抗炎药研究中最常使用的炎症模型。这种实验方法即可用来评价甾体类抗炎药的抗炎活性又可评价非甾体类抗炎药的抗炎活性,适合未知成分的药理实验。
       
       中药现代化是我国传统中药发展的必然趋势,作为中药现代化的基础性研究,中药有效成分的提取和分离是目前研究的重点[9,10]。本研究发现白鲜皮的95%乙醇提取物抗炎作用显著,可以对95%乙醇提取物进一步分离,得出抗炎有效成分,为研究白鲜皮的药理药效作用奠定基础。
       【参考文献】
           [1]中国卫生部药典委员会.中国药典,Ⅰ部[S]. 北京:化学工业出版社,1990:91.
       
       [2]张名发.台湾中药大型研究计划取得进展[J].中药药理与临床,1991,7(3):32.
       
       [3]肖培根.新编中药志[M].北京:化学工业出版社,2002:231.
       
       [4]黄泰康.常用中药成分与药理手册(上册)[M].北京:中国医药科技出版社,1994:762.
       
       [5]陈 奇.中药药理实验方法[M].北京:人民卫生出版社,1994:70,170.
       
       [6]马清钧.常用中药现代研究与临床[M].天津:天津科技翻译出版公司,1995:162.
       
       [7]李玉兰.抗癌抗炎药物的研究[M].沈阳:沈阳药学院,1991:58.
       
       [8]宫恩聪.大学病理学[M].北京:高等教育出版社,2001:67.
       
       [9]肖培根.21世纪与中药现代化[J].中国中药杂志,1998,23(1):3.
       
       [10]孔令义,杨 智,闵知大.对中药现代化有效成分研究的思索[J].中草药,1998,29(5):354.

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