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       【关键词】  马蹄香；,,华细辛；,,薄层色谱；,,马兜铃酸A
       　摘要：目的用薄层色谱法鉴别马蹄香及其易混品华细辛。方法对样品分别依次用石油醚、乙醚、甲醇提取；将样品碱化后用氯仿提取；将样品用水蒸气蒸馏提取挥发油。然后将所得各部分制成供试液进行薄层对比实验。结果各部分薄层对比实验结果均显示两者的色谱存在明显差异；在甲醇提取部分，马蹄香色谱中检出马兜铃酸A。结论    马蹄香含马兜铃酸A，是区别于华细辛的一个重要特征；其他薄层对比实验结果也为鉴别提供了依据。
       　　关键词：马蹄香；  华细辛；  薄层色谱；  马兜铃酸A
        马兜铃科植物马蹄香Saruma henryi Oliv.以其干燥的根及根茎入药，习称马蹄香、高脚细辛、马头细辛［1］，与我区产的同科植物华细辛Asarum siebodii Miq药用部位相同，名称易相混淆。为防止发生用药品种错误，我们曾对马蹄香做生药鉴定并与华细辛鉴别［2］。为进一步提供鉴别依据，本文对二者进行了薄层色谱对比实验。
       1  材料和试剂
       1.1  材料马蹄香药材采自汉中镇巴县，部分样品来源于民间药摊；华细辛药材来源于民间药摊，部分样品购于当地药材市场并取其根及根茎。两种药材样品的原植物均由作者鉴定，分别为Saruma henryi Oliv.和Asarum siebodii  Miq。
       1.2  试剂薄层层析用硅胶G(化学纯，青岛海洋化工有限公司产，国家药典委员会监制)，以0.5%CMCNa调制，涂布器铺板（厚度0.5 mm），室温晾干，105℃烘烤30 min，置干燥器贮备。马兜铃酸A对照品（批号07469002，中国药品生物制品检定所供）。其他用实验试剂均为分析纯。
       　　2  方法与结果
       2.1  样品石油醚提取液TLC比较取马蹄香和华细辛根及根茎粉末各0.5 g，加石油醚（30~60℃）超声处理3次，10 ml/次，10 min，滤过，合并各自石油醚液，滤渣挥尽石油醚备用。取上述2种石油醚液分别浓缩至1 ml，得2种供试液。吸取2种供试液各10 μl，分别点样于同一硅胶GCMC薄层板上，以已烷醋酸乙酯（17∶3）为展开剂，展开，取出，晾干。喷以茴香醛试液，于100℃加热3 min，立即在日光下观察。结果见图1。2种供试品色谱上各显10~11个斑点，其中多数斑点Rf值不同。
       2.2  样品乙醚提取液TLC比较取2.4项下的滤渣，分别加乙醚超声处理3次，10 ml/次，10 min，滤过，合并各自乙醚液，滤渣挥尽乙醚备用。取上述2种乙醚液分别浓缩至1 ml，得2种供试液。吸取2种供试液各10 μl，分别点样于同一硅胶GCMC薄层板上，以已烷醋酸乙酯（1∶1）为展开剂，展开，取出，挥尽溶剂，在365 nm紫外灯下检视。结果见图2。供试品马蹄香色谱所显荧光斑点明显多于华细辛。
       2.3  样品甲醇提取液TLC比较取2.2项下的滤渣，分别加甲醇回流2次，10 ml/次，15 min，滤过。合并各自甲醇液，分别浓缩至1 ml，得2种供试液。另取马兜铃酸A对照品，加乙醇制成0.5 mg/ml的对照品液。吸取2种供试液各10 μl、对照品液5 μl，分别点于同一硅胶GCMC薄层板上使成条状，以甲苯醋酸乙酯水甲酸（20∶10∶1∶1）的上层展开，取出，晾干。分别在日光下和365 nm紫外灯下检视。结果见图3。供试品马蹄香色谱在与对照品马兜铃酸A色谱相应位置上，日光下显一个相同的灰黄色条斑，紫外光下该条斑呈暗灰黄色，同时在紫外光下尚显5个荧光色斑。供试品华细辛色谱日光下未检出任何斑点，紫外灯下只检出与马蹄香色谱中其它5个荧光斑点相同的色斑。
       2.4  样品碱化后氯仿提取液TLC比较取马蹄香和华细辛根及根茎粉末各1 g，加氨水使润湿，加氯仿10 ml，回流20 min，滤过，滤渣再加氯仿10 ml振摇数分钟，滤过。合并氯仿液，浓缩至1 ml，得2种供试液。吸取2种供试液各10 μl，分别点于同一硅胶GCMC薄层板上，以正丁醇冰乙酸水（8∶2∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，在365 nm紫外灯下检视。结果见图4。马蹄香色谱中显9个荧光斑点，华细辛色谱中只显一个荧光斑点。
       2.5  样品中挥发油TLC比较取马蹄香和华细辛根及根茎粗粉，照挥发油测定去［3］测定，分别得2种密度均小于1的挥发油，得率分别为华细辛4.0%（黄白色），马蹄香0.8%（淡绿黄色）。挥发油经无水硫酸钠脱水，以乙醚溶解（110），得2种供试液。吸取2种供试液各5 μl，分别点于同一硅胶GCMC薄层板上，以苯乙酸乙脂（95∶5）为展开剂，展开，取出，晾干。喷以茴香醛试液，在105℃加热3 min，立即在日光下检视。结果见图5。两种挥发油供试品色谱不相同。
       3  小结
       3.1  马兜铃酸具有肾毒性［4］，存在于马兜铃科多种植物中，如关木通、马兜铃、青木香、汉中防己等。本文通过实验，在样品甲提取液马蹄香根及根茎色谱中亦检出马兜铃酸A，这不仅是区别于华细辛根及根茎的一个特征，也提示使用马蹄香时应注意可能发生的毒害作用。
       3.2  2.5项下的薄层实验原系对生物碱的检识，但经薄层展开后，喷以通用的生物碱显色试剂稀碘化铋钾试液未见出现生物碱的呈色斑点。而将展开后的薄层板置365 nm紫外灯下检视，2种供试品色谱所显荧光斑点却有显著差异，因此，可将其作为鉴别二者的依据之一。其他各项薄层对比实验结果，均显示二者有明显不同，也可作为鉴别的依据。
       　　参考文献：
       ［1］江苏新医学院.中药大辞典［M］.上海：上海科技出版社，1986：1160.
       ［2］马蹄香的生药鉴定及其与华细辛的鉴别［J］.中草药，2005，36（2）：277.
       ［3］国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2000.
       ［4］对美国FAD关于含马兜铃酸中草药肾损害两个通告的分析［J］.中国中医药信息杂志，2001，8（2）：82.
       1.陕西理工学院，陕西 汉中  723000； 
       2.陕西省汉中市药品检验所  723000
       基金项目：陕西省自然科学基金资助项目（No.2003C102）
       
　　陕西省教育厅重点实验室科研资助项目
       作者简介：赵  桦(1957)，男(汉族)，陕西汉中人，现任陕西理工学院生物系教授，硕士学位，主要从事植物形态学研究工作.