文章标题 全文   多个检索词，请用空格间隔。

       【摘要】 
       目的探索从地骨皮中提取总黄酮的最佳工艺。方法以总黄酮含量为指标，应用正交实验，优化地骨皮总黄酮的提取工艺。结果总黄酮提取最佳工艺：75%乙醇，料液比1∶10，回流2 h，提取2次。结论 该工艺简单易行，是提取地骨皮总黄酮物质的有效途径。
       【关键词】  地骨皮 总黄酮 提取工艺
       Study on the Extraction Condition of the Total Flavonoid from Lycium barbarum L.
       MA Xueqin, GAO Xiaojuan, YANG Kai, FU Xueyan
       （Ningxia Medical College, Yinchuan 750021，China)
       Abstract：ObjectiveTo study and optimize the extraction procedure of the total flavonoids from Lycium barbarum L.MethodsThe orthogonal design was used with the content of flavonoids in Lycium barbarum L.  as index.ResultsThe optimized extraction procedure was : 75% alcohol with 1:10 solid liquid ratio, fluxing 2 h for 2 times. ConclusionThe procedure is simple and feasible, and can also provide important theoretical basis for the exploitation of Lycium barbarum L. resources.
       Key words：Lycium barbarum L.;   Total flavonoids;  Extraction technology
       地骨皮是茄科植物枸杞Lycium chinense Mill或宁夏枸杞Lycium barbarum L.的干燥根皮，为常用中药，具有主“五内邪气，热中，消渴，周痹”的作用。现代药理也表明其有降血压、降血糖、调血脂、解热、抗菌及抗病毒等活性［1］，药用价值非常明显。因此，测定地骨皮中总黄酮的含量具有重要的意义。本文就总黄酮的提取工艺进行优化。
       1  仪器与试药
       1.1  仪器岛津UV-2550紫外分光光度仪(日本),CQ-2200超声波清洗器(上海新超超声波仪器有限公司)。
       1.2  试药芦丁(中国药品生物制品检定所),所用试剂均为分析纯。
       2  方法与结果
       2.1  对照品溶液的制备精密称取芦丁对照品(100℃干燥至恒重)20.43 mg, 置100 ml量瓶中，加30%乙醇溶解并定容得浓度为0.204 3 mg/ml对照品溶液。
       2.2  测定波长的选择依据《中国药典》方法［2］，取对照品溶液适量，加入1 ml 5%亚硝酸钠溶液和1 ml 10%硝酸铝溶液，放置10 min后加入1 ml 10%氢氧化钠溶液，空白试液为不加氢氧化钠溶液的对照品溶液，进行全波长扫描，结果表明对照品溶液在500 nm有最大吸收，故选500 nm为测定波长。
       2.3  线性范围考察精密量取对照品溶液各1，2，3，4，5 ml置25 ml容量瓶中，再依次加入1 ml 5%亚硝酸钠溶液和1 ml 10%硝酸铝溶液，放置10 min后加入1 ml 10%氢氧化钠溶液，以相应试剂为空白测定500 nm各溶液的吸光度，以吸光度对浓度进行线性回归，得到回归方程A=14.378C+0.008 3， 线性范围：8.17～49.03 μg/ml， r=0.999 8。
       2.4  药材的预处理和供试品的制备地骨皮药材经粉碎、过60目筛、粉末经恒温(60℃) 干燥24 h后，精密称取约10 g，依据正交实验所得浸膏精密称取约0.05 g，60%乙醇50 ml使溶解，精密量取25 ml置50 ml容量瓶中，加水稀释至刻度成贮备液。精密量取贮备液3 ml，置25 ml量瓶中，加30%乙醇至6 ml，依次加入1 ml 5%亚硝酸钠溶液和1 ml 10%硝酸铝溶液，放置10 min后加入1 ml 10%氢氧化钠溶液，加30%乙醇至刻度，以相应试剂为空白，在λ=500 nm测定吸收光度。
       2.5  地骨皮总黄酮提取工艺研究
       2.5.1  回流法和提取溶剂的考察分别用60%，75%，100%的甲醇和60%，75%，100%乙醇，料液比1∶10对地骨皮进行提取，热回流2次，2 h/次，以总黄酮含量为指标进行考察，从而确定正交实验所用溶剂。结果见表1。表1  回流法和提取溶剂与含量的关系（略）
       表1结果表明，同一浓度乙醇较甲醇提取率高，并且60%，75%乙醇提取率相当，因此，正交实验中选取乙醇浓度为60%，75%，90%作为考察的3个水平。
       2.5.2  超声法和提取溶剂的考察分别用60%，75%，100%的甲醇和60%，75%，100%乙醇，料液比1∶10对地骨皮进行提取，提取2次，0.5 h/次，以总黄酮含量为指标进行考察。结果见表2。表2  超声法和提取溶剂与含量关系（略）
       表2结果表明，溶剂对总黄酮提取率的影响与回流法一致，但超声法的提取率明显低于回流。因此，正交实验中采用回流法。
       2.5.3  正交实验在对溶剂和提取方法进行考察后，根据工艺要求，选定乙醇浓度、料液比、提取次数、提取时间作为考察的4个因素，每个因素选择3个水平，编制因素水平表，（见表3）。采用L9 (34)正交表进行实验，以地骨皮总黄酮含量为考察指标，结果见表4。对表4结果进行统计学处理，得方差分析见表5。表3  正交实验因素水平（略）表4  地骨皮正交实验及结果（略）表5  方差分析（略）
       表4～5结果表明，影响总黄酮提取效果的因素依次为A>D>B>C，即因素中乙醇浓度有显著性差异（P<0.05），乙醇量、提取时间和提取次数无显著性差异，综合考虑确定最佳工艺为A2B2C3D3。
       3  讨论
       单因素和正交实验结果表明，乙醇浓度对总黄酮的提取有显著影响，最后确定最佳提取工艺为A2B2C3D3，即75%乙醇，料液比为1∶10，提取3次，3 h/次。鉴于成本和时间，并且提取次数和时间对总黄酮提取无显著性影响，可改为提取2次，2 h/次。
       【参考文献】
         　　［1］国家中医药管理局《中华本草》编辑委员会.中华本草，第七册［M］.北京：科学与技术出版社，1999：274.
       
       ［2］国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2005.