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       【摘要】 
       目的优选二葛解酒颗粒的最佳提取工艺。方法采用正交实验法，以葛根素含量为考察指标，比较不同乙醇浓度、溶剂用量及提取时间对提取效果的影响。结果最佳提取条件为10倍量50%乙醇，1.5 h/次，80℃回流提取3次。结论该工艺所得葛根素含量较高，稳定性、重现性好，可为二葛解酒颗粒的制备提供参考资料。
       【关键词】  二葛解酒颗粒 葛根素 正交实验 提取工艺
       Study on the Extraction Technology of Ergejiejiu Granule with Orthogonal Test
       WANG Yan, LI Li
       Hubei Key Laborotary of Novel Chermical React & Green Chermical Technology, Wuhan Institute of Technology, Wuhan 430074, China
       Abstract：ObjectiveTo optimize the extraction technology of Ergejiejiu Granule． MethodsOrthogonal test was carried out．The influence of solvent concentration，the dosage of solvent，and time of extraction on extraction results were investigated with the content of puerarin as index．Results The optimum extraction was described as follows：the concentration of alcohol was 50%，volume of alcohol was 10 times amount of raw herb，and the herb was extracted 3 times with 1.5 h and 80℃ for each time．ConclusionHigh content of puerarin is obtained with the present technology．The method is stable and replicable and it can provide reference for preparation of Ergejiejiu Granule.
       Key words：Ergejiejiu Granule；  Puerarin；  Orthogonal test；  Extraction technology
       少量饮酒能活血通络散寒，如恣饮无度，则成为“酒毒”而伤人肺腑［1］。许多资料表明［2］，急性酒精中毒严重时可导致意识障碍，呼吸和循环衰竭，甚至危及生命。很久以来，人们就采用各种方法来解除和减轻饮酒所带来的不适，然而效果不甚明显。因此，研究与开发有效的解酒药物是医药市场的迫切需求。二葛解酒颗粒由葛根、川芎、葛花等组成，临床实践证明其对酒精中毒具有良好的治疗和预防作用。而作为君药的葛根主要含有葛根素等黄酮类化合物，现代药理学证明，葛根素对酒精中毒有显著的治疗作用［3］。本文采用正交实验法，以葛根素为检测指标，对二葛解酒颗粒的提取工艺进行优化选择。
       1  材料
       2450型紫外分光光度计（日本岛津）。葛根购于武汉市老百姓大药房，川芎、葛花购于湖北中医学院附属医院，符合《中国药典》(2005年版一部)各药材项下之规定。葛根素对照品（中国药品生物制品检定所，批号752-200108），其余试剂均为分析纯。
       2  方法与结果
       2.1   正交实验设计采用L9(34)正交表进行实验，以提取所得葛根素总量为指标，考察溶剂乙醇浓度(A)、提取时间(B)、溶剂用量(C) 3种因素对提取结果的影响。因素水平详见表1。表1  正交实验因素水平（略）
       2.2  提取工艺据文献报道［4］，条件一定时温度越高，葛根素提取率增加，但到70℃后，提取率变化不明显。常压下，体系在70～80℃附近溶剂沸腾，沸点还要受到溶剂浓度的影响。故按处方称取葛根、葛花、川芎，按表2排定的实验，于80℃进行回流提取，每个样品提取3次，分别将3次滤液合并。
       2.3   含量测定
       2.3.1  对照品溶液的配制取葛根素对照品适量，于105℃恒温干燥2 h，精确称取0.331 6 g，置于100 ml容量瓶中，用30%乙醇 3.35 ml温热3～5 min，溶解后加乙醇定容至100 ml。从上述溶液中吸取1 ml置于100 ml容量瓶中，用乙醇定容至100 ml，即得葛根素标准液(33.16 μg/ml)。
       2.3.2  测定波长的确定将葛根素标准液、样品供试液在200～400 nm波长范围内进行光谱扫描，发现标准对照品在250   nm处有最大吸收且待测样品有较大吸收，故选择250 nm为测定波长。
       2.3.3  标准曲线的绘制取33.16 μg/ml的葛根素标准液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 ml，分别置于10 ml容量瓶中，并分别加30%乙醇至3.35 ml后，加蒸馏水至刻度，摇匀。以30%乙醇3.35ml加蒸馏水至10 ml的溶液做空白对照，于250 nm波长处测定吸收度。以浓度C（μg/ml）为横坐标，吸收度A为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程A = 0.065 3C - 0.009 3，r =0.999  1。结果表明，葛根素在0.663～3.316 μg/ml范围内与吸收度呈良好的线性关系。
       2.3.4   正交实验结果及分析按L9(34 )正交实验设计进行实验，结果见表2，方差分析见表3。
       3  最佳工艺验证
       由表2和表3可知，二葛解酒颗粒的最佳提取条件为A2B2C3，符合正交表设计的第5号实验，故按此条件进行3次重复性验证实验，即制备3批该提取液。经测定其葛根素含量分别为2.601，2.661，2.643 mg/g。验证试验结果与正交实验结果吻合，表明重现性良好，工艺可行。表2  正交实验结果（略）表3  方差分析结果（略）
       4  讨论
       现代研究表明［5～6］，葛根、葛花均能降低醉酒动物血中乙醇浓度，起到解酒防醉的作用。川芎能活血行气、祛瘀止痛，具有促进血液循环、加速乙醇代谢的作用。而葛根作为君药，其主要成分为葛根素等黄酮类物质，故选用葛根素为提取工艺的评价指标。
       由表2可知，影响提取效果的主次因素顺序为：C>A>B，即溶剂用量>乙醇浓度>提取时间。最佳提取条件为A2B2C3，即在50%乙醇、每次提取时间1.5 h、溶剂用量为10倍、80℃、提取3次的条件下，提取液的葛根素含量较高。方差分析结果表明，溶剂用量对提取结果的影响非常显著，提取时间和乙醇浓度对提取结果均有显著影响。最佳工艺验证实验也表明，用正交实验优选的提取工艺稳定、重现性好，故本文为二葛解酒颗粒的制备工艺提供了一定的实验依据。
       【参考文献】
         　　［1］张若明，李经才．解酒天然药物研究进展［J］.沈阳药科大学学报，2001，18(2)：138.
       
       ［2］柏喜桂，周保林，章忠林.急性酒精中毒证治探讨［J］.中国中医急症，2006,15（3）：276.
       
       ［3］郑 皓.葛根的研究与开发现状［J］.氨基酸和生物资源，2006，28(2)：24.
       
       ［4］黄银秀，谢 果. 用正交试验优选葛根黄酮的提取工艺研究［J］.中国现代临床医学杂志，2006，5（3）：1.
       
       ［5］周红雨.葛花改善肾囊肿无水酒精硬化治疗所致醉酒样反应的作用［J］.临床超声医学杂志，2006，8（4）：250.
       
       ［6］张会香，杨世军.葛根解酒饮料的研究［J］.实验报告与理论研究，2006，9（1）：31.